Isolamento de candida spp. com utilização de meio de cultura cromogênico CHROMagar candida / Isolation of candida spp. using of the chromogenic culture medium CHROMagar candida

RESUMO

O objetivo do presente estudo foi comparar o isolamento e identificação de leveduras do gênero Candida em meio de cultura cromogênico CHROMagar Candida com o isolamento convencional em ágar Sabouraud dextrose com cloranfenicol. Foram coletadas amostras de saliva de 50 indivíduos com idades entre 13 e 70 anos. Os participantes realizaram enxágue bucal com solução fisiológica esterilizada e tamponada com fosfato (PBS) durante 30 s. Essas amostras foram semeadas em CHROMagar Candida e ágar Sabouraud dextrose com cloranfenicol e incubadas a 37°C por 48h. A seguir, foi realizada a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL) em CHROMagar Candida e em ágar Sabouraud. Foi realizada a identificação presuntiva das espécies de Candida em CHROMagar através da observação da morfologia e cor das colônias. As colônias de Candida foram isoladas para identificação fenotípica convencional por meio das provas de produção de tubos germinativos, formação de hifas e clamidoconídeos, fermentação e assimilação de açúcares, diferencial de temperatura e urease. Os isolados identificados como C. albicans também foram analisados genotipicamente, pela técnica de Reação em Cadeia da Polimerase, para diferenciação de C. dubliniensis. Os resultados demonstraram que o ágar Sabouraud apresentou maior contagem de leveduras (UFC/mL) em relação ao CHROMagar, entretanto sem diferença estatisticamente significante. O CHROMagar foi eficaz na pré-identificação de Candida albicanse Candida tropicalis. Concluiu-se que ambos os meios foram eficazes para o crescimento de leveduras, sendo queo ágar Sabouraud dextrose com cloranfenicol apresentou maior quantidade de UFC/mL. O CHROMagar possibilitou a identificação presuntiva da maioria das espécies de Candida.

ABSTRACT

The aim of this study was to compare the isolation and identification of yeasts of gender Candida by medium CHROMagarCandida with the convencional medium Sabouraud Dextrose agar with chloramphenicol. Fifty samples of saliva werecollected from individuals between 13 to 70 years old. The individuals rinsed their mouth with sterile phosphate bufferedsaline (PBS) for 30 seconds. Those samples were plated in CHROMagar Candida and Sabouraud Dextrose agar withchloramphenicol, and incubated at 37°C for 48h. After that, the number of colony-forming units per mL (CFU/mL) werecounted in CHROMagar Candida and Sabouraud Dextrose agar. The presumptive identification of Candida species inCHROMagar was carried out by color and morphology of colonies. The Candida colonies were isolated in order toperform phenotypic identification through the production of germinative tubes, presence of hyphae and chlamydospores,carbohydrate fermentation and assimilation, temperature differentiate, and urease test. The isolates identified as C. albicans were analyzed by genotypic characterization using the Polymerase Chain Reaction (PCR) to discriminate C.dubliniensis. The results demonstrated that Sabouraud Dextrose agar presented higher number of Candida (CFU/mL) in relation to the CHROMagar, however no statistical difference was observed. The CHROMagar was effective for presumptive identification of C. albicans and C. tropicalis. It was concluded that both medium were effective for growingof yeasts, with higher number of UFC/mL in CHROMagar. The CHROMagar allowed the presumptive identification of the most Candida species.