Mecanismos de apoptosis en testículos de ratones con rearreglos cromosómaticos robertsonianos / Mechanisms of apoptosis in testes of mice with Robertsonian chromosomal rearrangements

RESUMEN

Se han reportado casos de esterilidad masculina en seres humanos portadores de fusiones Robertsonianas. En este trabajo se estudió el deterioro espermatogénico y la participación de las vías apoptóticas en dos modelos animales de ratones machos híbridos subfértiles (hembras CD1 x machos Milano II) de 5 meses de edad e híbridos infértiles (hembras Graomys griseoflavus x machos Graomys centralis) de 1, 2 y 3 meses de edad, con fusiones Robertsonianas. La presencia de apoptosis se estudió mediante inmunohistoquímica y análisis de Western blots de las moléculas pro-apoptóticas Fas, Fas-L, Bax, citocromo c y caspasa-3, y calbindina D28K como molécula antiapoptótica. La fragmentación del ADN se analizó mediante la técnica de TUNEL. La ultraestructura testicular se visualizó por microscopía electrónica. Los resultados revelaron que la morfología y las asociaciones celulares del epitelio seminífero fueron anormales en los ratones híbridos Robertsonianos, con un mayor deterioro en los híbridos infértiles. Un intenso proceso apoptótico se observó en los túbulos seminíferos del estadio XII en los híbridos subfértiles, principalmente en los espermatocitos en metafase. Estos espermatocitos también mostraron redistribución de Bax y citocromo c. Los ratones híbridos infértiles presentaron mayor mortalidad de células germinales, con arresto de la espermatogénesis en estadios pre-meióticos. La apoptosis de las células germinales se produjo especialmente a nivel de los espermatocitos en paquitene, no llegándose en ningún caso a la espermatogénesis completa. Los espermatocitos de los tres grupos de animales Graomys de 1 mes de edad fueron positivos para todos los marcadores apoptóticos. En los parentales, esta expresión disminuyó a los 2 y 3 meses, mientras que permaneció elevada en los testículos de los híbridos.