Utilidad del ensayo de nitrato reductasa en la detección de Mycobacterium tuberculosis multirresistente en caso de recursos limitados / Utility of nitrate reductase assay for detection of multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis in a low resource setting

RESUMEN

Introducción. El rendimiento de cualquier prueba rápida de sensibilidad a medicamentos para Mycobacterium tuberculosis puede cambiar cuando se pasa de la etapa de investigación a su implementación en la práctica de salud pública. Objetivo. Describir el rendimiento del ensayo de nitrato reductasa para detectar tuberculosis multirresistente en la rutina de trabajo de un laboratorio de referencia con recursos limitados. Materiales y métodos. Se comparó prospectivamente la utilidad del ensayo de nitrato reductasa con el método de las proporciones para la detección de resistencia a isoniacida y rifampicina en aislamientos de pacientes con riesgo de multirresistencia. Resultados. Comparando con el método de las proporciones, la sensibilidad del ensayo de nitrato reductasa fue de 86,8 % y 84,9 % para rifampicina e isoniacida, respectivamente; la especificidad fue 100 % para rifampicina e isoniacida. La sensibilidad del ensayo de nitrato reductasa fue significativamente mayor cuando se emplearon aislamientos en los cuales el tiempo entre la realización del cultivo y la inoculación del ensayo de nitrato reductasa no superaba 70 días 94,3 % Vs. 78,1 % para resistencia a rifampicina usando aislamientos frescos o envejecidos, respectivamente; prueba exacta de Fisher, p=0,05; 94,4 % Vs. 74,3 % para resistencia a isoniacida usando aislamientos frescos o envejecidos, respectivamente, y prueba de ji al cuadrado, p=0,03. La proporción de resultados no interpretables en el ensayo de nitrato reductasa fue mayor en los aislamientos multirresistentes que en los otros Conclusiones. La experiencia con el ensayo de nitrato reductasa demuestra que produce resultados resistentes confiables. El uso de cultivos envejecidos conduciría a una mayor proporción de resultados falsos sensibles, mientras que su capacidad para detectar multirresistencia disminuye a consecuencia de una mayor proporción de resultados no interpretables.

ABSTRACT

Introduction. The performance of a drug susceptibility test may change when moving from the research stage to implementation on a population level in actual public health practice. Objective. The performance of a rapid drug susceptibility test was described for detecting multidrugresistant Mycobacterium tuberculosis when implemented in the routine workflow of a low-resource reference laboratory. Materials and methods. A prospective study was done comparing the performance of the nitrate reductase assay with the conventional proportion method for rifampicin and isoniazid on 364 isolates were obtained from multidrug-resistant tuberculosis risk patients referred from diffrent Colombian laboratories. Results. When compared with the proportion method, the nitrate reductase assay sensitivity was 86.8% and 84.9% for rifampicin and isoniazid, respectively, whereas nitrate reductase assay specificity was 100% for isoniazid and rifampicin. Nitrate reductase assay sensitivity was significantly higher when the age of isolate was less than 70 days. A sensitivity of 94.4% dropped to 78.1% for rifampicin resistance for fresh and old isolates, respectively (Fisher exact test, p=0.05). For isoniazid resistance using fresh and old isolates, 94.7% vs.74.3% sensitivities, were achieved (chi square test, p=0.03). The proportion of nitrate reductase assay ambiguous results was significantly higher in multidrug-resistant than in nonmultidrug-resistant isolates (17.6% vs. 4.0%, chi square test, p<0.005). Conclusions. The nitrate reductase assay demonstrated provided reliable results for antibiotic resistance. However, using old cultures leds to a higher proportion of false sensitive results; furthermore, the nitrate reductase assay capability to detect multidrug-resistant tuberculosis decreased due to a higher proportion of non-interpretable results.