b-n-acetylglucosaminidase production by Lecanicillium (Verticillium) lecanii ATCC 26854 by solid-state fermentation utilizing shrimp shell / Producción de b-n-acetilglucosaminidasa de lecanicillium (verticillium) lecanii ATCC 26854 por cultivo sólido fermentado utilizando caparazón de camarón / Produção de b-n-acetilglucosaminidasa de lecanicillium (verticillium) lecanii ATCC 26854 em fermentação em estado sólido utilizou exoesqueleto do camarão

ABSTRACT

Lecanicillium (Verticillium) lecanii produced chitinases using shrimp shell as inducer. Maximum production of b-N-acetylglucosaminidase was measured at 80h. Enzyme stability was obtained at temperatures ranging from 30 to 40°C and maximum activity at 50°C, pH 6.0. Enzyme activity increased with Ba2+, Co2+, Fe3+ and Zn2+. Bioassays against the phytopathogenic fungus Oidium spp. showed mycelial and germination inhibition. SDS-PAGE electrophoresis of the partially purified extract revealed four bands of 70, 58, 45 and 31kDa and this extract showed activity of b-N-acetylglucosaminidase through zymogram analysis. Chitinases produced by L. lecanii are potentially useful against phytopathogenic fungi, insects and chitosan bioconversions.

RESUMEN

Lecanicilium (Verticillium) lecanii produjo quitinasas mediante el uso de caparazón de camarón como inductor. La máxima producción de b-N-acetylglucosaminidasa se obtuvo a las 80h. Se observó estabilidad de la enzima en el intervalo de temperatura entre 30 y 40°C y su actividad máxima a los 50°C, pH 6,0. La actividad enzimática se incrementó con Ba2+, Co2+, Fe3+ and Zn2+. El bioensayo contra el hongo fitopatógeno Oidium spp. mostró inhibición micelar y de la germinación. La electroforesis SDS-PAGE del extracto parcialmente purificado mostró cuatro bandas de 70, 58, 45 y 31kDa y este extracto mostró actividad de b-N-acetylglucosaminidasa a través de un análisis de zimograma. Las quitinasas producidas por L. lecanii pueden ser potencialmente utilizadas contra hongos fitopatógenos, insectos y en la bioconversión del quitosán.

RESUMO

Lecanicillium (Verticillium) lecanii producido quitinases utilizou exoesqueleto do camarão como inductor. Produção máxima de b-N-acetilglucosaminidasa foi obtido em 80h. A estabilidade de enzima estava em o intervalo de temperaturas de 30 - 40°C e os niveis máximos de atividade enzimática foram obtidos em 50°C, pH 6,0. A atividade de enzima foi aumentada com Ba2+, Co2+, Fe3+ e Zn2+. O Bioensaios contra fungo fitopatógenos Oidium spp. mostrou inibição miceliar e germinação. O electroforesis SDS-PAGE do extrato parcialmente purificado revelou quatro faixas de 70, 58, 45 e 31kDa e este extrato apresentou atividade b-N-acetilglucosaminidasa através de uma análise zimograma. O quitinases produzido por L. lecanii são potencialmente capaz de ser utilizado contra fungos fitopatógenos, insetos e bioconversions de quitosano.