Apoptose e perfil do repertório da cadeia variável beta do receptor de células T em linfócitos T CD8+ de pacientes com leishmaniose cutânea / Apoptosis and profile of the repertoire of beta chain variable T cell receptor on CD8 + T lymphocytes of patients with cutaneous leishmaniasis

RESUMO

A resposta imune envolve a participação de subpopulações de células naïve, efetoras e de memória, as quais são funcionalmente distintas, e a atividade destas células depende do reconhecimento antigênico, que ocorre no contexto MHC-peptídeo-TCR. A manutenção destas subpopulações e a homeostasia do sistema imune são controlados, entre outros fatores, pela apoptose. No entanto, este processo de morte também tem sido relacionado à diversas patologias, sendo responsável pela modulação de eventos imunológicos, interferindo no curso da infecção. Em pacientes com leishmaniose cutânea (LC), apesar da indução preferencial de linfócitos T CD4(positivo), os linfócitos T CD8(positivo) estão envolvidos nos processos de progressão e controle da infecção. Neste contexto, a citometria de fluxo foi utilizada definir simultaneamente as subpopulações de linfócitos T CD8(positivo) naïve, efetora, de memória central e de memória efetora; a diversidade do repertório VBeta destes linfócitos; e a ocorrência de apoptose, na resposta imune da LC. Neste estudo foram analisadas amostras de sangue periférico, obtidas ex vivo de pacientes durante e após o tratamento, e de indivíduos sadios; e após cultivo in vitro frente a antígenos de Leishmania braziliensis. Os resultados mostram que a apoptose exerce um papel modulados, diminuindo a freqüência de linfócitos T CD8(positivo), o que parece contribuir para a persistência da lesão ativa, no décimo dia de tratamento; enquanto a cura clínica parece ser conseqüência da diminuição de apoptose nestes linfócitos T CD8(positivo) contribuindo para o restabelecimento da freqüência destas células. A análise da distribuição das subpopulações de linfócitos T CD8(positivo) revelou que a proporção de células naïve e efetoras é invertida ao longo do tratamento e do processo de resolução da lesão. Paralelamente, apesar do maior percentual de linfócitos T CD8(positivo) efetores observados em pacientes durante o tratamento, a ocorrência de apoptose nestas células pode comprometer uma resposta imune eficaz, estando associada à presença de lesão ativa ulceradaO caráter modulador que este processo de morte exerce na resposta imune em ambos os grupos de pacientes sugere que a ocorrência de apoptose, mais intensa na fase ativa da doença, esteja relacionada à manutenção da infecção. A reunião das análises de repertório VBeta nas diferentes subpopulações de linfócitos T CD8(positivo) mostraram uma indução oligoclonal na qual as células que expressam VBeta 9, VBeta 13.2 ou VBeta 23 podem ser os clones selecionados a se diferenciar em células de memória central após a cura clínica; enquanto que os clones que expressam a cadeia VBeta 22, parecem ser preferencialmente selecionados a se diferenciar em células de memória efetora, durante a fase ativa da doença. Os únicos clones de linfócitos T CD8(positivo) efetores que apresentaram uma expansão significativa foram aqueles que expressam a cadeia VBeta 12, a qual parece estar associada à resposta imune efetora desencadeada na fase ativa da LC. Sendo assim, a heterogeneidade entre o repertório VBeta das diferentes subpopulações de linfócitos T CD8(positivo) ressalta a importância de avaliar separadamente o repertório das células naïve, efetoras, de memória central e de memória efetora.