Identificação bioquímica e molecular de Lactobacillus spp. isolados do íleo de frangos de corte tratados ou não com antimicrobianos / Biochemical and molecular characterization of Lactobacillus spp. isolated from the ileum of broilers treated with or without antimicrobials

RESUMO

Objetivou-se caracterizar bioquimicamente e molecularmente as espécies de Lactobacillus spp. isoladas do íleo de frangos de corte tratados ou não com antimicrobianos. Utilizou-se 400 pintos de corte alojados em 25 boxes de 2m² (16 aves/boxe), distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, em grupos de cinco tratamentos e cinco repetições dieta sem promotor de crescimento; dieta com promotor de crescimento; dieta com 0,4% de óleo de aroeira-vermelha (OAV); dieta com 200mg de vitamina E kg-1; dieta com 0,4% OAV e 200mg de vitamina E kg-1. Após a caracterização fenotípica do gênero Lactobacillus, foram identificadas, em ambas as metodologias, 100 amostras de Lactobacillus spp. sendo 20 amostras por tratamento. Os resultados bioquímicos identificaram L. acidophilus, L. fermentum, L. plantarum, L. delbrueckii subsp. delbrueckii além de Lactococcus lactis subp. lactis. Para as amostras padrão ATCC, a identificação bioquímica suscitou algumas dúvidas em relação aos seus resultados. Os resultados da identificação molecular mostraram que os Lactobacillus que amplificaram ambos os iniciadores (LU-1'/ Lac-2) e (Laci-1 / 23-10C) são os da espécie L. acidophilus. As amostras que amplificaram apenas com o iniciador (LU-1'/ Lac-2) tratam-se das demais espécies que compõe o grupo L. acidophilus. Já as amostras com o iniciador L. fermentum (Fer 3/Fer 4) amplificaram um fragmento de 192pb padrão para essa espécie. Conclui-se que a identificação das espécies de Lactobacillus spp. isoladas do íleo a partir da PCR apresentou-se mais sensível que o método bioquímico.

ABSTRACT

This study aimed to characterize biochemically and molecular species of Lactobacillus spp. isolated from the ileum of broiler chickens treated with or without antimicrobial. A total of 400 day-old male chicks, Cobb, distributed in a randomized design in groups of five treatments and five replicates diet without antimicrobials; diet with antimicrobials; diet with 0.4% Brazilian red pepper oil (BRP); diet with 200mg vitamin E kg-1; diet with 0.4% BRP and 200mg vitamin E kg-1. The biochemical results have identified L. acidophilus, L. fermentum, L. plantarum, L. delbrueckii subsp. delbrueckii besides Lactococcus lactis subp. Lactis. For samples ATCC, the biochemical identification raised some doubts about their results. The molecular identification showed that Lactobacillus that amplified both primers (LU-1 '/ Lac-2) and (Laci-1 / 23-10C) are the species L. acidophilus. However, samples that amplified only with primer (LU-1 '/ Lac-2) are other species that constitute the group L. acidophilus. However, the samples with the primer L. fermentum (Fer 3/Fer 4) amplified a 192pb fragment pattern for this species. We conclude that the identification of species of Lactobacillus isolated from the ileum of PCR was more sensitive than the biochemical method.