Presencia de lesiones histopatológicas relacionadas con el método de eutanasia / Histopathological lesions related to euthanasia method

RESUMEN

Introducción: los métodos experimentales son un valioso instrumento para estudiar los procesos biológicos del hombre. Se hace necesario buscar el método de eutanasia a emplear para obtener las menores variaciones posibles del tejido. Objetivo: identificar la presencia de lesiones histopatológicas relacionadas con el método de eutanasia, en busca del adecuado para realizar el estudio del daño múltiple de órganos. Métodos: se estudiaron ratones Balb/c, del sexo femenino, de 20 ± 2 g, con edad de 12 semanas. Se subdividieron en tres grupos correspondientes a los métodos de tracción y dislocación cervical, de inmersión en nitrógeno líquido durante 7 s y de sobreanestesia con pentobarbital en dosis de 60 mg/kg. La autopsia se realizó inmediatamente in situ, y se obtuvieron fragmentos de varios órganos, fijados en formol al 10 % y procesados para ser incluidos en parafina, cortados y coloreados con hematoxilina/eosina. Resultados: las lesiones encontradas entre focales y parciales en el pulmón fueron aspectos importantes. El edema cerebral se presentó en la dislocación cerebral y en la sobreanestesia. La inmersión en nitrógeno líquido durante 7 s proporcionó muerte instantánea y obtención de fragmento para estudios histopatológicos con el mínimo de alteraciones. Conclusiones: el estudio histopatológico de los diferentes métodos de eutanasia mostró que la inmersión en nitrógeno líquido fue el de menor cambios posmorten, por lo que es adecuado para emplear en estudios donde se requiera evaluar cambios histopatológicos desde los cambios leves de lesión en los diferentes órganos. Por eso, es recomendable para estudios de la respuesta inflamatoria sistémica en modelos experimentales.

ABSTRACT

Introduction: experimental methods are valuable tools for studying human biological processes. It is necessary to find the proper method of euthanasia to be used for obtaining the lowest possible variations of tissue. Objective: to identify the presence of histopathological lesions related to euthanasia method, in the search of suitable one for the study of multiple organ failure. Methods: BALB/c, female mice weighing 20 ± 2 g, aged 12 weeks. They were included into three groups corresponding to the methods of traction and cervical dislocation, immersion in liquid nitrogen for 7 s and over anesthesia with pentobarbital 60 mg/kg. Autopsy was performed immediately on the spot, and fragments of various organs were obtained, fixed in 10% formalin. These fragments were processed for inclusion in paraffin, sectioned and stained with hematoxylin/eosin. Results: lesions found in the lung between focal and partial were important aspects. Cerebral edema occurred in brain dislocation and over anesthesia groups. Immersion in liquid nitrogen for 7 s afforded instantaneous death nod obtaining fragment for histopathological studies with minimum alterations. Conclusions: the histopathological examination of the various methods of euthanasia showed that immersion in liquid nitrogen had lower postmortem changes, making its use suitable in studies which require assessing histopathological changes from slight changes in different organs lesions. It is therefore advisable for studies of systemic inflammatory response in experimental models.