Detección de la presencia de antígeno y ADN de virus herpes simple tipo 1 en ganglios trigeminales humanos / Viral DNA and antigen detection of type 1 herpes simplex virus in human trigeminal ganglia

RESUMEN

Antecedentes la infección por virus herpes simple tipo 1 (VHS-1) es una de las más frecuentesen la población humana; produce infecciones en mucosa oral, piel, ojos e inclusoen el sistema nervioso, que causa encefalitis. Después de la infección en la región orofacial,este virus puede permanecer en estado de latencia en el ganglio trigémino y eventualmentereactivarse. Objetivo: determinar la presencia de VHS-1 en ganglios trigeminales humanosmediante pruebas paralelas de PCR, RT-PCR e inmunohistoquímica. Métodos: previa aprobacióndel Comité de Ética de la Facultad de Odontología de la Universidad Nacional deColombia y del Instituto de Medicina Legal y Ciencias Forenses, se recolectaron dieciséispares de ganglios trigeminales humanos, que se procesaron tanto para extracción de ácidosnucleicos como para inmunohistoquímica. Resultados: en seis de los ocho donantesanalizados por inmunohistoquímica se encontró marcaje positivo para antígeno de VHS-1.Se halló que nueve de los donantes evaluados por PCR para VHS-1 y cinco de los diezexaminados para transcritos asociados a latencia (LAT) fueron positivos. Conclusión: seencontraron ganglios trigeminales en los que no se detectó virus y otros con distintosestados de infección (activa y latente). En casi todos los ganglios fue evidente el infiltradoinflamatorio asociado. El presente es el primer trabajo en el que se busca sistemáticamentetanto genoma viral como proteínas y transcritos LAT en ganglios trigeminales humanos, locual abre puertas para la investigación tanto de la epidemiología como de los fenómenosasociados a la LAT y reactivación del VHS-1...

ABSTRACT

Background: Infection by type 1 Herpes Simplex Virus (HSV-1) is the most frequent viralinfection in human population being able to cause injuries in oral mucosa, skin, cornea,and even the central nervous system causing encephalitis. After mucosal infection, HSV-1establishes a lifespan latent infection in trigeminal ganglia where it occasionally reactivatesinfecting primary sites again. It is little known about cell and molecular events responsiblefor infection reactivation and immune response in human ganglia. Objective: To standardizethe obtaining and processing of human trigeminal ganglia to detect specific HSVantigen, DNA and RNA. Methods: After approval of the study by the Universidad NacionalIRB, 32 trigeminal ganglia were obtained from 16 cadavers from the Colombian ForensicMedicine Institute. Results: Using PCR technique to detect viral DNA, it was found that 56.3 %of ganglia (9/16) amplified specific fragment and five out of ten with suitable quality RNAwere positive for latency associated transcript. Conclusion: Some trigeminal ganglia did notshow evidence of infection and some had different HSV-1 infection status (active or latent)with inflammatory cells infiltrate in almost all samples. This is the first work that detectssimultaneously genome, proteins and LAT of HSV-1 in human trigeminal ganglia, leading toexplore findings about the latency and r eactivation pr ocess...