Perfil de metilación de genes supresores de tumores APAF1, ASSP1, p73 y FHIT en pacientes con leucemia linfoblástica aguda infantil / Detection of hypermethylation in tumor suppressor genes APAF1, ASSP1, p73 and FHIT in childhood acute lymphoblastic leukemia

RESUMEN

La leucemia linfoblástica aguda (LLA), es la neoplasia mas frecuente en la población infantil. Se manifiesta por una perdida de diferenciación de progenitores linfoides produciendo un aumento de células inmaduras. La hipermetilación en la región promotora de genes supresores de tumores (GST) puede producir un silenciamiento génico que le proporciona a la célula leucémica una ventaja proliferativa o la previene de la apoptosis. Se estudia el estado de hipermetilación de 4 GST involucrados en la apoptosis APAF1, ASPP1, p73 y FHIT y su asociación con la sobrevida de pacientes menores de 15 años con diagnóstico de LLA. Se analizaron 38 muestras de médula ósea mediante modificación con bisulfito del ADN y reacción en cadena de la polimerasa especifica de metilación (MSP). El rango de edad al diagnóstico fue de 10 meses a 13,8 años. La sobrevida global fue de 69 por ciento a los 5 años. El 81,5 por ciento de los pacientes tuvo al menos un gen hipermetilado. La frecuencia de metilación observada fue APAF1 68,4 por ciento, FHIT 56,4 por ciento, p73 42 por ciento y ASPP1 18,4 por ciento. La asociación entre hipermetilación y grupo <5 años y 5 años fue Global p=0,20, APAF1 p=0,03, FHIT p=0,51, p73 p=0,51 y ASPP1 p=0.67. Las curvas de sobrevida se calcularon según frecuencia de hipermetilación de cada gen APAF1 p=0,05, FHIT p=0,31, p73 p=0,98 y ASPP1 p=0,82. La alta frecuencia de hipermetilación obtenida reafirma la participación de la metilación en la región promotora de GST en la patogénesis de la LLA. La hipermetilación del gen APAF1 fue muy frecuente y se asoció significativamente a la sobrevida del grupo de estudio, mostrando a este gen como un factor predictivo de mal pronostico en pacientes con LLA.

ABSTRACT

Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is the most common malignancy in children. It is manifested by a loss of differentiation of lymphoid progenitors, producing an increase of immature cells. Hypermethylation in promoter region of tumor suppressor genes (GST) may produce a gene silencing that provides a leukemic cell a proliferative advantage or prevent apoptosis. We studied the hypermethylation status of 4 GST involved in apoptosis APAF1, ASPP1, p73 and FHIT and its association with survival of patients <15 years diagnosed with ALL. We analyzed 38 samples of bone marrow by DNA bisulfite modification and chain reaction methylation-specific polymerase (MSP). The mean age at diagnosis was 10 months to 13.8 years. Overall survival was 69 percent at 5 years. 81.5 percent of patients had at least one hypermethylated gene. The frequency observed was APAF1 68.4 percent, 56.4 percent FHIT, p73 ASPP1 42 percent and 18.4 percent. The association between hypermethylation and group <5 years and 5 years was Global p = 0.20, APAF1 p = 0.03, FHIT p = 0.51, p73 p = 0.51, ASPP1 p = 0.67. Survival curves were calculated by frequency of hypermethylation of each gene APAF1 p = 0.05, p = 0.31 FHIT, p73 p = 0.98 and ASPP1 p = 0.82. The high frequency of hypermethylation obtained confirms enrollment of methylation in the promoter region of GST in the pathogenesis of ALL. APAF1 gene hypermethylation was very frequent and was significantly associated with survival in the study group, showing this gene as a predictor of poor prognosis in patients with ALL.