CORAL SNAKE ANTIVENOM PRODUCED IN CHICKENS (Gallus domesticus) / Antiveneno de serpiente coral producido en gallinas (Gallus domesticus)

ABSTRACT

The production of anti-snake venom from large mammal's blood has been found to be low-yielding and arduous, consequently, antivenom immunoglobulins for treatment are achieved regularly as polyvalent serum. We have standardized an undemanding technique for making purified immunoglobulin IgY antivenom consisting of polyclonal antibodies against coral snake venom in the egg yolk of immunized hens. We have adapted a reported process of antibody purification from egg yolks, and achieved 90% antibody purity. The customized technique consisted of the removal of lipids from distilled water-diluted egg yolks by a freeze–thaw sequence. The specific immunoglobulins were present in the egg yolk for up to 180 days postimmunization. Therefore, by means of small venom quantities, a significant amount of immunoglobulins were found in an adequately purified state (The obtained material contained about 90% pure IgY). The antigen binding of the immunoglobulins was detected by a double immunodiffusion test. Titers of antibodies in the yolk were estimated with a serum protection assay (Median effective dose = ED50) (ED50= 477 mg/kg). Given that breeding hens is economically feasible, egg gathering is noninvasive and the purification of IgY antibodies is quick and easy, chicken immunization is an excellent alternative for the production of polyclonal antibodies. To the best of our knowledge, this is the first coral snake antivenom prepared in birds.

RESUMEN

La producción de antiveneno de serpiente usando sangre de grandes mamíferos se ha encontrado que es de bajo rendimiento y de trabajo arduo, en consecuencia, las inmunoglobulinas antiveneno para el tratamiento se obtienen generalmente, como suero polivalente. Hemos estandarizado una técnica poco exigente para la fabricación de inmunoglobulina purificada IgY, que consistió en generar anticuerpos policlonales contra el veneno de la serpiente coral en huevos de gallinas inmunizadas. La técnica consistió en la eliminación de lípidos de las yemas del huevo, diluidas en agua y en una secuencia de congelación-descongelación. Las inmunoglobulinas específicas estuvieron presentes en la yema de huevo hasta 180 días después de la inmunización. La unión del antígeno a las inmunoglobulinas se detectó mediante un ensayo de inmunodifusión doble. Los títulos de anticuerpos en la yema fueron estimados con un ensayo de protección (dosis efectiva media = ED50). Dado que las gallinas reproductoras son económicamente viables, la recolección de huevos es no invasiva y la purificación de anticuerpos IgY es rápida y fácil, la inmunización de la gallina es una excelente alternativa para la producción de anticuerpos policlonales. A nuestro entender, esta es el primer anti-veneno contra serpiente de coral preparado en aves.