Development and validation of an HPLC method for the simultaneous determination of artesunate and mefloquine hydrochloride in fixed-dose combination tablets

ABSTRACT

The present study developed and validated an HPLC method for the simultaneous determination of artesunate (AS) and mefloquine hydrochloride (MQ) in fixed-dose combination tablets, according to ICH guidelines. The chromatographic separation was carried out on an XBridge C18 (250 x 4.6 mm i.d., 5 µm particle size, Waters) analytical column. The mobile phase included a 0.05 M monobasic potassium phosphate buffer (pH adjusted to 3.0 with phosphoric acid) and acetonitrile (50 + 50, v/v). The flow rate was 1.0 mL/min, and the run time was 13 minutes. A dual-wavelength approach was employed AS detection was performed at 210 nm and MQ was detected at 283 nm, using a diode array detector. Stability of sample solutions was evaluated for 8 hours after preparation, during which time the solutions remained stable. Youden's test was employed to evaluate robustness. The method proved to be linear (r²>0.99), precise (RSD<2.0%), accurate, selective, and robust, proving to be appropriate for routine drug quality control analysis.

RESUMO

Um método por cromatografia a líquido de alta eficiência para a determinação simultânea de artesunato (AS) e cloridrato de mefloquina (MQ) em comprimidos em dose fixa combinada foi desenvolvido e validado, de acordo com as normas do ICH. A separação cromatográfica foi realizada com uma coluna analítica XBridge C18 (250 x 4,6 mm d.i., partículas de 5 µm, Waters). A fase móvel foi constituída de tampão fosfato monobásico de potássio 0,05 M (pH ajustado para 3,0 com ácido fosfórico) e acetonitrila (50 + 50, v/v). O fluxo da fase móvel foi de 1,0 mL/min e o tempo de corrida foi de 13 minutos. Utilizaram-se dois comprimentos de onda a detecção do AS foi realizada em 210 nm e a de MQ foi realizada em 283 nm, utilizando-se um detector de arranjo de diodos. A estabilidade das soluções padrão e amostra foi avaliada por 8 horas após sua preparação e as soluções permaneceram estáveis nesse período. O teste de Youden foi empregado para a avaliação da robustez do método. O método se mostrou linear (r²>0,99), preciso (DPR<2,0%), exato, seletivo e robusto, sendo adequado para análises rotineiras de controle de qualidade dos medicamentos.