Terapia celular em camundongos com cardiopatia chagásica crônica: mecanismos envolvidos na miocardite chagásica Crônica experimental / Stem cell therapy in mice with chronic Chagas disease: mechanisms involved in experimental chronic chagasic myocarditis

RESUMO

A cardiomiopatia chagásica crônica é uma das principais causas de insuficiência cardíaca nos países latino-americanos. Cerca de 30% dos indivíduos infectados pelo Trypanosoma cruz; desenvolvem essa forma grave e sintomática da doença, caracterizada pela presença de uma resposta inflamatória intensa seguida de fibrose no coração. Foi demonstrado previamente que o transplante de células da medula óssea (BMC) melhora a inflamação e a fibrose em corações de camundongos chagásicos crônicos. Neste trabalho nós investigamos alterações da expressão gênica no coração de camundongos chagásicos crônicos submetidos ou não à terapia BMC. [MÉTODOS] Camundongos C57BL/6 cronicamente infectados com T. cruz; (6 meses) foram transplantados com células mononucleares da medula óssea (BMC) ou solução salina intravenosamente (Lv.) e sacrificados após 2 meses. RNA foi extraído de corações de animais controles normais e chagásicos. Análise de microarranjos de DNA foi realizada utilizando uma matriz de 27.400 cDNAs. Imunofluorescência e análises morfométricas foram realizadas em secções dos corações. [RESULTADOS] Foram encontradas alterações significativas na expressão de -12% dos genes amostrados. Genes com expressão aumentada nos corações chagásicos foram associados com as respostas imune-inflamatória (quimiocinas, moléculas de adesão, catepsinas e moléculas de MHC) e fibrose (componentes da matriz extracelular, lisil oxidase e Timp1). Quando corações chagásicos de animais tratados com BMC foram comparados com o de animais normais, cerca de 90% das alterações gênicas não foram encontradas. Muitos dos genes com expressão modulada pelo tratamento com BMC foram relacionados à inflamação e fibrose. Imunofluorescência e análise morfométrica confirmaram os efeitos moduladores da terapia com BMC no padrão de resposta inflamatória e na expressão de moléculas de adesão. Nossos resultados demonstram um importante efeito imunomodulador do BMC e indicam fatores potencialmente relevantes envolvidos na patogênese da doença, que podem constituir novos alvos terapêuticos para esta doença. Para investigar a contribuição natural das células da medula óssea nas lesões no coração e músculo esquelético durante a infecção aguda pelo T. cruzi, camundongos quiméricos foram gerados através do transplante de células da medula óssea GFP+ em camundongos receptores do tipo selvagem letalmente irradiados que foram infectados com T. cruz; um mês após o transplante. A migração de células derivadas da medula óssea para o coração e músculo esquelético foi vista durante e após a fase aguda da infecção, uma vez que o infiltrado inflamatório era composto por células GFP+. Cardiomiócitos e células endoteliais GFP+ foram encontrados nas secções de coração de camundongos quiméricos infectados. Além disso, um grande número de fibras GFP+ foi observado no músculo esquelético de camundongos quiméricos em diferentes momentos após a infecção por T. cruz;. [CONCLUSÃO] Nossos resultados reforçam o papel das células derivadas da medula óssea na regeneração tecidual em lesões provocadas pela infecção por T. cruz.