Desarrollo y evaluación de un método de obtención de larvas estériles de Lucilia eximia para su uso en terapia larval / Development and evaluation of a method to obtain sterile Lucilia eximia larvae for use in larval therapy

RESUMEN

Objetivo: desarrollar un método de tratamiento de huevos de Lucilia eximia para la obtención de larvas estériles y evaluar la capacidad de supervivencia de dichas larvas en condiciones de refrigeración a 4°C. Métodos: se estableció un sistema de crianza para L. eximia. Los huevos fueron colectados en el sustrato de oviposición, se lavaron con solución salina estéril (0,85%), se trataron con hipoclorito de sodio (0,5%) y finalmente se esterilizaron con formalina, evaluando tres diferentes concentraciones (2,5%; 5,0% y 10,0%). Se verificó la esterilidad de los huevos empleando medios de cultivo bacteriológicos y la eclosión de los huevos esterilizados fue expresada mediante el cálculo de un índice de eclosión (IE). Además, se evaluó la supervivencia de las larvas de segundo y tercer estadio temprano (L2 y L3, respectivamente) en condiciones de refrigeración, durante las 4 primeras horas y luego a las 24 y 48 horas. Resultados: todas las concentraciones de formalina evaluadas fueron capaces de esterilizar los huevos. No se encontró una correlación entre el IE y las concentraciones de formalina utilizadas (R Spearman = -0,030, p = 0,848). Durante las primeras 4 horas a 4°C, un 100% de las L2 y las L3 sobrevivieron. Sin embargo, en ambos estadios larvales hubo un marcado descenso de la supervivencia a las 24 y 48 horas, siendo las L2 las más sensibles a las condiciones de refrigeración. Conclusiones: los resultados mostraron que la obtención de larvas estériles de L. eximia con el método utilizado es un proceso sencillo, pero la supervivencia de las larvas en condiciones de refrigeración es limitada.

ABSTRACT

Objective: develop a method to treat eggs of Lucilia eximia to obtain sterile larvae and evaluate the survival capacity of those larvae under refrigeration at 4°C. Methods: a rearing system was set up for L. eximia. The eggs were collected from the oviposition substrate, washed with sterile saline solution (0.85%), treated with sodium hypochlorite (0.5%), and sterilized with formalin. Three concentrations were evaluated 2.5%; 5.0% and 10.0%. Egg sterility was verified by bacteriological culture. Eclosion of sterilized eggs was expressed by estimation of an eclosion rate (ER). An evaluation was conducted of the survival of larvae from the second and third early stages (L2 and L3, respectively) under refrigeration during the first 4 hours and then at 24 and 48 hours. Results: all the formalin concentrations evaluated were capable of sterilizing the eggs. No correlation was found between the ER and the formalin concentrations used (Spearman's Rho = -0.030, p = 0.848). During the first 4 hours at 4°C, 100% L2 and L3 survived. However, both larval stages showed a marked decrease in survival at 24 and 48 hours, L2 being the most sensitive to refrigeration. Conclusions: results show that obtaining sterile L. eximia larvae by this method is a simple process. However, larval survival under refrigeration is limited.