Cultivo de la línea celular HEp-2: doblaje poblacional y coloración con Giemsa Perspectivas para el estudio de la infección con Chlamydia trachomatis / Cultivation of the cell line hep-2: dubbing of population and coloring with Giemsa

RESUMEN

Los cultivos celulares se han convertido en herramientas esenciales para la investigación básica. Se aplican en inmunología, virología, biología molecular, ingeniería genética y farmacología, entre otras áreas. Se usan también en procesos industriales farmacéuticos, en técnicas de diagnóstico clínico y para estudio de trasplante de tejidos. En bacteriología, estos cultivos permiten confirmar una infección, evaluar la eficiencia de antimicrobianos, realizar estudios de infectividad, investigar sobre nuevas especies, obtener gran cantidad de microorganismos no cultivables para optimizar técnicas y examinar las relaciones entre la célula huésped y los microorganismos intracelulares (virus, bacterias y parásitos). La línea celular HEp-2 (Human Epidermoid Cancer Cells) es utilizada en estudios de infección con diferentes bacterias, entre ellas Chlamydia trachomatis (CT), con el fin de determinar los mecanismos por los cuales este patógeno sobrevive en la célula huésped. También se emplea para observar la acción de péptidos antimicrobianos y de extractos para combatir la infección causada por dicha bacteria. Para este estudio se realizaron curvas de crecimiento en la línea celular HEp-2 con medios DMEM-F12 y MEM. Se estandarizó, además, la coloración con Giemsa y se calculó el doblaje poblacional con diferentes inóculos para evaluar el desarrollo de la línea celular en cultivo y seleccionar las condiciones óptimas para realizar futuros ensayos de infección con parásitos intracelulares, en particular con CT serovar L2.

ABSTRACT

Cell cultures have become essential tools for basic research. They are applied in immunology, virology, molecular biology, genetic engineering and pharmacology, among other areas. They are also used in pharmaceutical industrial processes, in techniques of clinical diagnostic, and to study tissue transplantation. In bacteriology, these crops allow us to confirm an infection, assess the efficiency of antimicrobials, carry out studies of infectivity, investigate on new species, obtaining a large number of microorganisms non-arable to optimize techniques, and to examine the relationship between the host cell and intracellular microorganisms (bacteria, viruses, and parasites). The HEp-2 cell line (Human epidermoid cancer cells) is used in studies of infection with different bacteria, including Chlamydia trachomatis (CT), in order to determine the mechanisms by which the pathogen survives in the host cell. It is also used to observe the action of antimicrobial peptides and extracts to combat the infection caused by the bacterium. For this study, growth curves of the HEp-2 cell line were carried out with DMEM-F12 and MEM media. In addition, the staining with Giemsa was standardized, and the population dubbing was calculated with different inocula for assessing the development of the cultured cell line and select the optimal conditions for future tests of infection with intracellular parasites, in particular with CT serovar L2.