Caracterização da adenosina desaminase (ADA) e suas isoenzimas em tecidos de caprino: um modelo para o estudo da artrite encefalite caprina (CAE) / Characterization of the adenosine deaminase (ADA) and their isoenzymes from goat tissues: a model for the study of caprine arthritis encephalitis (CAE)

RESUMO

A adenosina desaminase (ADA), uma aminohidrolase (E.C.3.5.4.4) de fundamental importância na via metabólica das purinas, vem sendo alvo de estudos por seu envolvimento com o sistema imunológico e utilização como ferramenta diagnóstica em várias desordens patológicas. Entretanto, pouco se sabe sobre sua expressão em caprinos. A atividade sérica da ADA caprina apresentou um pH ótimo de 7,2, Km aparente de 49,19+-5,28 μM para a adenosina (Ado) e de 41,28+-4,58 μM para 2'-deoxiadenosina (dAdo). A enzima é estável pelo menos até trinta dias a -20°C com termoestabilidade até um máximo de 53°C por 1 hora, sendo inativada aos 60°C em dez minutos. A atividade da ADA (nmoles/mg prot/min) foi detectada em fígado (3,35+-0,51), coração (3,71+-0,49), duodeno (83,54+-9,72), baço (51,15+-4,82) e pulmão (7,23+-0,92), tendo como substrato a Ado. Utilizando a dAdo foram obtidas as atividades de 3,23+-0,82; 2,73+-0,76; 79,22+-6,62; 49,72+-5,78 e 7,38+-1,13, respectivamente. A filtração molecular em gel Sephadex G200 mostrou três isoformas em duodeno (picos 1,2 e 3), tendo o pico 2 atividade predominante. O pico 3 surgiu quando amostras (homogenato ou frações do pico 1) foram congeladas. O fígado revelou dois picos (1 e 3), sendo o pico 1 o de maior atividade. O pico 3 mostrava aumento da atividade quando o homogenato era congelado. Somente uma isoforma foi detectada no baço, correspondendo ao pico 2. Utilizando os substratos Ado e dAdo o pico 1 apresentou um Km de 6,26+-1,41 μM e 35,82+-3,84 μM, respectivamente e o pico 3 um Km de 5,42+-0,68 μM e 32,89+-3,64 μM, com um pH ótimo de 6,8...