Camundongos inoculados com DENV2 por via intracerebralhistopatologia, detecção viral e avaliação de proteção mediada por uma vacina de DNA / Mice intracerebrally inoculated with DENV2: histopathology, virus detection and evaluation of protection mediated by a DNA vaccine

RESUMO

A dengue constitui um sério problema de saúde pública, principalmente em regiões tropicais e subtropicais do mundo. [...] Apesar disso, um dos modelos mais utilizados para testes de vacinas contra a dengue se baseia na inoculação em camundongos por via intracerebral (i.c.) de vírus neuroadaptado. No entanto, poucos estudos avaliaram o efeito da infecção i.c. e/ou proteção gerada por protótipos vacinais em diferentes órgãos, tais como fígado, um dosórgãos comprometidos pela dengue em humanos. O nosso grupo construiu a vacina de DNA, pcTPANS1, que induziu altos níveis de sobrevivência em camundongos desafiados por via i.c. com vírus da dengue 2 (DENV2). Diante disso, o presente trabalho se propõe avaliar aspectos da patogênese no cérebro, cerebelo, fígado e pulmão, no modelo de camundongos BALB/c inoculados pela via i.c. com uma dose letal de DENV2, em diferentes dias após infecção (d.p.i.). Adicionalmente, tais análises foram estendidas para animais imunizados com a vacina pcTPANS1 e desafiados com DENV2. Detectamos alterações histopatológicas no cérebro/cerebelo (edema,hemorragia, gliose reacional, microglia hiperplásica e hipertrofiada e infiltrado mononuclear na pia-máter, no neurópilo e perivasculares), no fígado (edema,hemorragia, balonização hepatocitária, infiltrado mononuclear, hiperplasia e hipertrofiade células de Kupffer) e no pulmão (edema, hemorragia, infiltrados mononuclear esperibronquiolares, aumento do número de macrófagos alveolares e espessamento de septo interalveolar). Alguns destes danos foram quantificados, utilizando uma escala subjetiva com atribuição de diferentes graus, revelando diferenças significativas...

ABSTRACT

The dengue is a serious public health problem, mainly in tropical and subtropicalregions of the world. [...] Nevertheless, oneof the most widely used model for vaccine tests against dengue is based on theinoculation of mice by the intracerebral route (i.c.) with neuroadapted virus. However,few studies have evaluated the effects of i.c. infection and/or protection generated byvaccine prototypes in different organs, such as the liver, one of the compromised organin dengue in humans. Our group have constructed a DNA vaccine, pcTPANS1, whichinduced high survival rates in mice challenged by the i.c. inoculation with dengue virus2 (DENV2). Therefore, the present work aim to evaluate aspects of the pathogenesis inthe brain, cerebellum, liver and lung in the BALB/c mouse model intracerebrallyinoculated with a lethal dose of DENV2, at different days post infection (d.p.i.). Inaddition, these analyzes were extended to pcTPANS1-immunized animals challengedwith DENV2. We detect histopathological changes in the brain/cerebellum(hemorrhage, edema, reactive gliosis, hyperplasic and hypertrophied microglia andmononuclear infiltrate in the pia-mater, neuropile and perivascular), the liver(hemorrhage, edema, hepatocyte ballooning, mononuclear infiltrate, hyperplasia andhypertrophy of Kupffer cells) and the lung (hemorrhage, edema, peribronchialmononuclear infiltrates, increased number of alveolar macrophages and thickening ofinteralveolar septa). Some of these damages were quantified using a subjective scalewith different degrees and revealing significant differences...