Molecular identification and evaluation of the probiotic ability of lacticacid bacteria from sow colostrum / Identificación molecular y evaluación de la capacidad probiótica de bacterias ácido lácticas aisladas del calostro de cerdas / Identificação molecular e avaliação da capacidade probiótica de bactérias ácido lácticas isoladas do colostro de porcas

ABSTRACT

Probiotics have become relevant in animal health, especially because of their ability to replace antibiotic growth promoters. This study assessed the probiotic ability of lactic acid bacteria (LAB) isolated from sow colostrum obtained from pig farms in the southwest of Antioquia, Colombia. Bacteria were identified by molecular methods. Colostrum (1 ml) was collected from 20 sows postpartum. Colostrum (0.1 ml) was plated on Man Rogosa and Sharpe agar (MRS) (Merck), and incubated anaerobically at 37 °C for 48h. Probiotic capacity was determined measuring growth at pH 3,0 and growth on 0.3% w/v ox bile salts. Hemolytic activity, antimicrobial activity against Salmonella typhimurium, and sensitivity to antibiotics commonly used in veterinary were also determined. Molecular identification was made by gen16S Ribosomal analysis method. Of all the strains tested, only BAL 1 and BAL3 showed probiotic ability to grow and withstand an acidic pH (3,0) and 0.3% w/v of ox bile. They had γ-hemolytic activity, were catalase-negative, and inhibited growth of Salmonella typhymurium with halos larger than 11 mm. They were sensitive to amoxicillin, penicillin, chloramphenicol and erythromycin, and were identified as Pediococcus pentosaceus. The existence of Pediococcus pentosaceus in sow colostrum and its probiotic ability was demonstrated.

RESUMEN

Los probióticos han cobrado importancia en la salud animal, especialmente por la capacidad de reemplazar los antibióticos promotores de crecimiento. En este trabajo se evaluó la capacidad probiótica de algunas bacterias ácido lácticas (BAL) aisladas de leche calostro de cerdas en granjas del Valle de Aburrá (zona sur); las cuales fueron identificadas por métodos moleculares. Materiales y métodos: Se recolectó 1mL de calostro de 20. Se inocularon 0.1 mL de cada una de las muestras para su aislamiento sobre el agar Man Rogosa Sharpe (MRS) (Merck), incubándolas a 37 °C durante 48h en anaerobiosis. Se determinó la capacidad probiótica realizando las siguiente pruebas: tolerancia a un pH ácido de 3,0, crecimiento en bilis de buey 0,3%P/v, actividad hemolítica, actividad antimicrobiana frente a Salmonella tiphymurium, y sensibilidad a los antibióticos de uso común en veterinaria; y su identificación molecular se realizó por el método análisis del gen16S Ribosomal. De todas las cepas evaluadas solo dos mostraron tener capacidad probiótica al crecer y resistir a un pH ácido de 3,0 y 0,3% P/v de bilis de buey, con actividad γ-hemolitica, catalasa negativa, que inhibieron el crecimiento de Salmonella tiphymurium con halos mayores a 11mm sensibles a Amoxicilina, Penicilina, Cloranfenicol y Eritromicina, e identificadas como Pediococcus pentosaceus. Se demostró la existencia de Pediococcus pentosaceus con características probióticas en el calostro de cerdas.

RESUMO

Os probióticos tem aumentado sua importância na saúde animal, especialmente pela sua capacidade de ser utilizados ao invés dos antibióticos promotores de crescimento. Neste trabalho, avaliou-se a capacidade probiotica de algumas bactérias ácido lácticas (BAL) isoladas de leite de colostro de fêmeas suínas, as amostras foram obtidas de granjas localizadas em Sudeste antioqueño: as bactérias identificaram-se por métodos moleculares. Materiais e métodos: Coletou-se 1ml de colostro em 20 fêmeas suínas recém paridas, das cidades previamente descritas, cultivou-se em superfície 0,1 ml da amostra em ágar Man Rogosa e Sharpe (MRS) (Merck), e foram incubadas a 37 °C/48h em anaerobiose. Determinou-se a capacidade probiótica avaliando o crescimento dos isolados a pH de 3,0 e a sais biliares de boi 0.3%P/v, além, foi determinada a atividade hemolítica, atividade antimicrobiana frente a Salmonella tiphymurium e sensibilidade aos antibióticos de uso comum em veterinária. A identificação molecular realizou-se pelo método de análise do gene 16S Ribosomal. Resultados: de todas as cepas avaliadas só dois, BAL 1 e BAL3 mostraram ter capacidade probiótica ao crescer e resistir a um pH ácido de 3,0 e 0,3% P/v de bílis de boi, com atividade γ-hemolítica, catalase negativa, que inibiram o crescimento de Salmonella tiphymurium com anéis maiores a 11mm, sensíveis a Amoxicilina, Penicilina, Cloranfenicol e Eritromicina, e identificadas como Pediococcus pentosaceus. Conclusão: demostrou-se a existência de Pediococcus pentosaceus com características probióticas no colostro de fêmeas suínas.