Caracterização de inibidores de complemento liberados pelas formas metacíclicas de Tripanosoma cruzi e sua função na evasão da imunidade inata / Characterization of complement inhibitors released by Trypanosoma cruzi metacyclic forms and their role in evasion of innate immunity

RESUMO

O Tripanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas, constitui um grave problema desaúde pública que afeta 18 milhões de pessoas na América latina. Para produzir a infecçãoformas tripomastigotas metacíclica de T. cruzi , liberadas durante a picada do inseto vetor,precisam evadir o sistema imune inato do hospedeiro vertebrado para infectar as células. Osistema complemento, devido à sua capacidade para rapidamente reconhecer e eliminarmicrorganismos constitui a principal linha de defesa do sistema imune inato. O sistema docomplemento é composto por vßrias proteínas, ativadas em cascata por serino proteases, queculmina com a formação do complexo de ataque a membrana e lise do patógeno. Todavia,muitos organismos patogênicos desenvolveram formas de escapar do ataque do sistema docomplemento por meio de diversos mecanismos. Visando à melhor caracterização dos fatoresde virulência do T. cruzi, o grupo foi verificar se os sobrenadantes de formas metacíclicasapresentam atividade inibitória de complemento. Devido às vias do complemento seremativadas por serino proteases, foi realizada uma busca no banco genômico de T. cruzi atrßs demotivos de SERPINAS (inibidores de serino protease) que o parasito poderia estar liberandono primeiro contato parasito-hospedeiro. Foram realizados experimentos de lise mediada pelocomplemento com sobrenadantes das formas metacíclicas de T. cruzi. Observou-se, ainda, queos sobrenadantes das formas metacíclicas do T. cruzi são capazes de inibir a lise mediada pelocomplemento de formas epimastigotas...

ABSTRACT

The Trypanosoma cruzi, etiologic agent of Chagas disease, is a serious public health concernthat affects 18 million people in Latin America. To produce the infection, metacyclictrypomastigotes de T cruzi released during the bite of the insect vector must evade the innateimmune system of the vertebrate host to infect cells. The complement system, due to itsability to rapidly recognize and eliminate microorganisms is the major line of innate immunesystemdefense. The complement system is composed of various proteins, activated by serineproteases cascade that culminates in the formation of the membrane attack complex and lysisof the pathogen. However, many pathogens have developed ways to evade the attack of thecomplement system through several mechanisms. Aiming to better characterize the virulencefactors of T. cruzi, the teamwas to verify whether the supernatants of metacyclic forms exhibitinhibitory activity of complement. Due to the complement pathways are activated by serineproteases, we seek in genomic library of T. cruzi motifs related to serpin (serine proteaseinhibitors), a protein that the parasite could be releasing at the first parasite-host contact.Experiments were carried out to complement-mediated lysis with supernatants of metacyclicforms of T. cruzi. Furthermore, it was observed, that the supernatants of metacyclic forms ofT. cruzi are capable of inhibiting the complement mediated lysis of epimastigotes...