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Principios y relevancia del ensayo cometa / Principles and relevance of the comet assay
Rodríguez-Rey, Alexis; Noris-García, Elena; Fundora Torres, María Teresa.
  • Rodríguez-Rey, Alexis; Instituto Nacional de Higiene, Epidemiología y Microbiología. La Habana. CU
  • Noris-García, Elena; Instituto Nacional de Higiene, Epidemiología y Microbiología. La Habana. CU
  • Fundora Torres, María Teresa; Instituto Nacional de Higiene, Epidemiología y Microbiología. La Habana. CU
Rev. cuba. invest. bioméd ; 35(2): 184-194, abr.-jun. 2016.
Artigo em Espanhol | LILACS, CUMED | ID: lil-783764
RESUMEN
Desde hace varias décadas el ensayo Cometa, o electroforesis alcalina de células individuales, se ha convertido en un método establecido para el estudio del daño de ácido desoxirribonucleico, con múltiples aplicaciones en ensayos de genotoxicidad, estudios de biomonitoreo en humanos, epidemiologia molecular y ecotoxicología; así como una herramienta fundamental para investigaciones sobre daño y reparación del ácido desoxirribonucleico. Este ensayo se distinguió por su simplicidad, sensibilidad, versatilidad, rapidez y economía. Es una poderosa técnica que se basa en la visualización microscópica de las imágenes del ácido desoxirribonucleico después que las células son embebidas en agarosa, lisadas y sometidas a una electroforesis alcalina. Esta metodología básica ha sido ampliada, y permite ahora, detectar con alta sensibilidad una gran variedad de daños del ácido desoxirribonucleico en cualquier tipo de células. La inclusión en este ensayo, de enzimas capaces de producir lesiones específicas en la hebra de ácido desoxirribonucleico, ha incrementado su rango de detección y sensibilidad. Pero es importante tener claro que su especificidad no es absoluta. El propósito es destacar algunos aspectos útiles de este método y sus ventajas; describir la experiencia en algunos aspectos técnicos del proceder, normalizado según las condiciones del laboratorio en el instituto para ampliar su utilización en el país.
ABSTRACT
For several decades now the comet assay (single cell gel electrophoresis assay) has been the method used for the study of deoxyribonucleic acid damage, with multiple applications in genotoxicity assays, biomonitoring studies in humans, molecular epidemiology and ecotoxicology, and a fundamental tool for research into deoxyribonucleic acid damage and repair. The comet assay has stood out for its simplicity, sensitivity, versatility, rapidity and economy. It is a powerful technique based on microscopic visualization of deoxyribonucleic acid images after the cells have been embedded in agarose, lysed and subjected to alkaline electrophoresis. This basic methodology has been broadened, and may now detect with great sensitivity a large variety of deoxyribonucleic acid damage in any type of cell. Inclusion in the assay of enzymes capable of producing specific lesions on the deoxyribonucleic strand has broadened its detection range and sensitivity. However, it is important to bear in mind that its specificity is not absolute. The purpose of the present study is to point out some useful aspects and advantages of the method, and describe the experience with some technical aspects of the procedure, standardized in keeping with the conditions in the laboratory at the institute to extend its use in the country.
Assuntos

Texto completo: DisponíveL Índice: LILACS (Américas) Assunto principal: DNA / Ensaio Cometa Limite: Humanos Idioma: Espanhol Revista: Rev. cuba. invest. bioméd Assunto da revista: Medicina Ano de publicação: 2016 Tipo de documento: Artigo País de afiliação: Cuba Instituição/País de afiliação: Instituto Nacional de Higiene, Epidemiología y Microbiología/CU

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