Clonación y caracterización del sistema de restricción-metilación Pvull de Proteus vulgaris: purificación de la restrictasa recombinante / Cloning and characterization of the Pvull restriction-modification system from proteus vulgaris: purification of the recombinant restrictase

RESUMEN

El sistema de restrición-metilación (RMSII) Pvull de P. vulgaris fue clonado y expresado con altos niveles en E. coli. Se estudió el efecto de la alta expresión de restrictasa y metilasa en diferentes cepas de E, coli, resultando la cepa HB101 (mrcB) la única eficientemente transformable con plasmidios portadores de RMSII Pvull. Se aplicó un nuevo procedimiento para la purificación de la restrictasa Pvull recombinante utilizando cromatografía de intercambio iónico. Los métodos empleados permitieron la obtención de grandes cantidades de restrictasa Pvull, libre de exonucleasas y endonucleasas inespecíficas