Functional study on galactose-specific lectin 3 from tumor-associated macrophage based on single-cell sequencing / 中国肿瘤生物治疗杂志

ABSTRACT

@#[摘 要] 目的：从肿瘤相关巨噬细胞（TAM）在化疗前后的表型变化入手，寻找通过调控肿瘤免疫微环境（TIME）从而影响肿瘤治疗效果和预后的功能分子。方法：利用欧洲核苷酸数据库（ENA）的PRJEB45598数据集，分析进展期胃癌患者化疗前后活检肿瘤组织单细胞测序数据，采用主成分分析（PCA）和一致流形近似与投影（UMAP）降维，获得31个亚群细胞，并进一步进行TAM亚型分析、差异基因筛选，寻找化疗后M2型TAM中高表达的基因。通过黑色素瘤B16-F10细胞皮下移植瘤模型验证化疗前后特定基因mRNA和蛋白水平表达变化，并通过Incucyte体外分析该蛋白是否调控化疗药物诱导的肿瘤细胞死亡。结果：聚焦单细胞测序数据中M2型TAM的特征表达基因，发现半乳糖凝集素3（LGALS3）在胃癌化疗后mRNA水平显著升高（P<0.01），在多种肿瘤中LGALS3高表达且与患者生存期呈负相关（P<0.05或P<0.01）。黑色素瘤B16-F10细胞移植瘤模型中，LGALS3在M2型TAM中高表达（P<0.01），且奥沙利铂化疗后表达进一步升高（P<0.05）。体外对肿瘤细胞给予重组LGALS3蛋白可抑制化疗药物奥沙利铂诱导的肿瘤细胞死亡（P<0.01）。结论：奥沙利铂化疗后的M2型TAM通过合成和分泌LGALS3促进黑色素瘤细胞的化疗抵抗，因此通过免疫治疗的方法靶向LGALS3分子可能有效提高肿瘤的治疗效果。