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Robust and low-cost ELISA based on IgG-Fc tagged recombinant proteins to screen for anti-SARS-CoV-2 antibodies.
Frumence, Etienne; Lebeau, Grégorie; Viranaicken, Wildriss; Dobi, Anthony; Vagner, Damien; Lalarizo Rakoto, Mahary; Sandenon Seteyen, Anne-Laure; Giry, Claude; Septembre-Malaterre, Axelle; Raffray, Loïc; Gasque, Philippe.
  • Frumence E; Unité de recherche en Pharmaco-Immunologie (UR-EPI), Université et CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France; Laboratoire d'immunologie Clinique et expérimentale de la ZOI (LICE-OI), Pôle de Biologie, CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France. Electronic address: etienne.frumence@univ-reunion.
  • Lebeau G; Unité de recherche en Pharmaco-Immunologie (UR-EPI), Université et CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France; Laboratoire d'immunologie Clinique et expérimentale de la ZOI (LICE-OI), Pôle de Biologie, CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France.
  • Viranaicken W; UMR PIMIT 'Processus Infectieux en Milieu Insulaire Tropical' CNRS 9192, INSERM1187, IRD 249, Université de La Réunion, Saint-Denis 97400, France.
  • Dobi A; Unité de recherche en Pharmaco-Immunologie (UR-EPI), Université et CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France; Laboratoire d'immunologie Clinique et expérimentale de la ZOI (LICE-OI), Pôle de Biologie, CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France.
  • Vagner D; Laboratoire d'immunologie Clinique et expérimentale de la ZOI (LICE-OI), Pôle de Biologie, CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France; UMR PIMIT 'Processus Infectieux en Milieu Insulaire Tropical' CNRS 9192, INSERM1187, IRD 249, Université de La Réunion, Saint-Denis 97400, France.
  • Lalarizo Rakoto M; Unité de recherche en Pharmaco-Immunologie (UR-EPI), Université et CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France; Laboratoire d'immunologie Clinique et expérimentale de la ZOI (LICE-OI), Pôle de Biologie, CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France; Faculté de Médecine, Campus universitaire Ambohits
  • Sandenon Seteyen AL; Unité de recherche en Pharmaco-Immunologie (UR-EPI), Université et CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France; Laboratoire d'immunologie Clinique et expérimentale de la ZOI (LICE-OI), Pôle de Biologie, CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France.
  • Giry C; CNR associé arbovirus, Laboratoire de Microbiologie, Pôle de Biologie, CHU de La Réunion, Saint-Denis 97440, France.
  • Septembre-Malaterre A; Unité de recherche en Pharmaco-Immunologie (UR-EPI), Université et CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France; Laboratoire d'immunologie Clinique et expérimentale de la ZOI (LICE-OI), Pôle de Biologie, CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France.
  • Raffray L; UMR PIMIT 'Processus Infectieux en Milieu Insulaire Tropical' CNRS 9192, INSERM1187, IRD 249, Université de La Réunion, Saint-Denis 97400, France; Service de Médecine Interne, Centre Hospitalier Universitaire La Réunion Site Félix Guyon, CS11021, 97400 Saint Denis de La Réunion, France.
  • Gasque P; Unité de recherche en Pharmaco-Immunologie (UR-EPI), Université et CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France; Laboratoire d'immunologie Clinique et expérimentale de la ZOI (LICE-OI), Pôle de Biologie, CHU de La Réunion, Saint-Denis 97400, France.
J Immunol Methods ; 495: 113082, 2021 08.
Article in English | MEDLINE | ID: covidwho-1243047
ABSTRACT
The development of new diagnostic assays become a priority for managing COVID-19. To this aim, we presented here an in-house ELISA based on the production of two major recombinant and high-quality antigens from SARS-CoV-2. Full-length N and S-RBD fragment proteins fused to mouse IgG2a-Fc were produced in the CHO cell line. Secreted recombinant proteins were easily purified with standard Protein A chromatography and were used in an in-house ELISA to detect anti-N and anti-RBD IgGs in the plasma of COVID-19 RTPCR-positive patients. High reactivity against recombinant antigens was readily detected in all positive plasma samples, whereas no recognition was observed with control healthy subject's plasmas. Remarkably, unpurified recombinant N protein obtained from cell culture supernatant was also suitable for the monitoring by ELISA of IgG levels in positive patients. This work provides an early prospection for low price but high-quality serological kit development.
Subject(s)
Keywords

Full text: Available Collection: International databases Database: MEDLINE Main subject: Recombinant Proteins / Immunoglobulin G / Immunoglobulin Fc Fragments / Enzyme-Linked Immunosorbent Assay / COVID-19 Serological Testing / SARS-CoV-2 / COVID-19 Type of study: Diagnostic study Limits: Animals / Humans Language: English Journal: J Immunol Methods Year: 2021 Document Type: Article

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