Perspectivas Inovadoras Na Abordagem Na Doenca Do Olho Seco (Dos) E O Interfaceamento Com Bancos De Sangue De Cordao Umbilical Humano

ABSTRACT

Os bancos de sangue de cordao umbilical e placentario (BSCUP), os laboratorios de processamento de medula ossea/ sangue periferico para transplante e os centros de tecnologia celular, passaram a receber a denominacao comum de Centros de Processamento Celular - CPC. O pais tem BSCUP 14 unidades publicas e 19 de natureza privada, totalizando 33 BSCUP. Uma analise retrospectiva dos relatorios da ANVISA identifica que em 2003 foram coletadas 26 unidades, com desqualificacao de 15,38% delas, o crescimento da coleta foi exponencial e dez anos depois, em 2013, foram coletadas 13.995 unidades (5,82% de desqualificacao). Em 2020, houve uma diminuicao expressiva de coletas, reflexo da pandemia de COVID-19 4.918 unidades (desqualificacao de 12,69%). Este tipo de produtividade compromete a viabilidade financeira destes servicos, e encontrar formas de otimizar bolsas desqualificadas por volume ou quantidade de celulas para demais finalidades e uma vertente de gestao que deve ser estabelecida. O objetivo deste projeto foi a coleta de segmentos de cordao umbilical das unidades ja previamente validadas pelos BSCUP para extracao de celulas tronco, caracterizacao imunofenotipica e producao de meio condicionado isento de soro fetal bovino. A obtencao do meio condicionado (MC) da cultura de celulas tronco. Tem crescido cada vez mais o interesse pelo uso dos fatores de crescimento, citocinas e moleculas sinalizadoras livres no MC alem das vesiculas extracelulares, que se tornaram relevantes, tanto para diagnostico como para terapeutica, inclusive para aplicacoes oftalmologicas. Neste campo, identificamos a DOS que impacta profundamente a qualidade de vida das pessoas. Ha 15 anos o Laboratorio de Biologia Celular tem desenvolvido o soro autologo, para atendimento dos pacientes refratarios aos tratamentos convencionais e farmacologicos disponiveis, em especial aqueles pacientes submetidos ao Transplante de Medula Ossea e que desenvolveram DOS2ario a doenca de enxerto versus hospedeiro. No entanto, existem pacientes com impossibilidade de acesso venoso ou com sorologias reagentes para doencas infecciosas que sao impedidos de utilizar o produto. Diante disto, optou-se por produzir o MC de celulas tronco de cordao umbilical de parturientes jovens e sem comorbidades para obtencao do secretoma das celulas para avaliacao terapeutica na DOS. Um segmento do cordao umbilical foi retirado e processado seguido de plaqueamento e expansao para posterior identificacao de adesao ao plastico, caracterizacao imunofenotipica por citometria de fluxo utilizando marcadores como CD11b, CD13, CD14, CD34, CD31, CD36, CD45,CD73, CD90, CD 105, CD106 e HLA-DR. Todas as amostras tiveram adesao ao plastico com aspecto fibroblastoides e perfil imunofenpotipico corrobora com o determinado pela SITC. Para a obtencao de MC foram semeadas CTMcup ate 70% de confluencia e foram submetidas ao wash out, recebendo meio de cultura DMEM-F12 aditivado por 48 horas. Apos isto, foi coletado 60mL do secretoma das celulas para o experimento especificos in vitro. Copyright © 2022