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Producción de factor básico de crecimiento de fibroblastos (Beta-fgf) trasla estimulación de fibroblastos pulmonares humanos in vitro confactor transformador del crecimiento Beta1 (tGf-Beta1). Estudio dosis respuesta / The production of basic fibroblast growth factor following in vitro stimulation of human lung fibroblasts with transforming growth factor Beta1: Dose response Study

Díaz Baquero, A; Rodríguez Portal, J. A; Arellano Orden, E; Saenz Coronilla, F. J; Rodríguez Becerra, E; Rodríguez Panadero, F.
Rev. esp. patol. torac ; 24(3): 257-261, jul.-sept. 2012. ilus, tab
Artículo en Español | IBECS (España) | ID: ibc-106178

Objetivo:

Establecer cuál es la dosis de TGF-β1 más adecuada para la estimulación de cultivos de fibroblastos pulmonares humanos y el tiempo necesario de incubación de los mismos para obtener la máxima respuesta. Material y

métodos:

Diseñamos un estudio de dosis respuesta con TGF-β1 sobre una línea celular de fibroblastos pulmonares humanos. Analizamos la producción de factor básico de crecimiento de fibroblastos (b-FGF) como marcador de estímulo fibrogénico. Para ello se cultivaron fibroblastos humanos procedentes de una línea celular (MRC5) obtenida de la ECCC (European Collection of Cell Culture, UK). Las células se cultivaron en placas de 33cm2, cuando estuvieron confluentes se les estimuló con diferentes dosis de TGF-β1 (Peprotech, USA) 5, 10 ng/ml. Las células se incubaron durante 12, 24, 48 y 72 horas. Se usaron como control células no estimuladas con TGF-β1. Los niveles de factor básico de crecimiento de fibroblastos (b-FGF) se midieron por ELISA (R&D System, Minneapolis, MN). Se analizó la viabilidad celular mediante Azul Trypan a las 24, 48 y 72 horas de la estimulación con TGF-β1.

Resultados:

La mayor producción de b-FGF se produjo a las 24 horas tras la estimulación con la dosis de 10 ng/ml de TGF-β1, siendo la producción de b-FGF igual a 501 pg/ml. La viabilidad celular tiene su mayor valor a las 48 horas, disminuyendo en horas sucesivas, alcanzando los niveles más bajos a las 72 horas.

Conclusiones:

Existe un efecto estimulador del TGF-β1 sobre los fibroblastos pulmonares humanos in vitro. Esta acción del TGF-β1 es dosis dependiente y alcanza el nivel máximo de proliferación con la dosis de 10 ng/ml a las 24 horas de su tratamiento (AU)
Biblioteca responsable: ES1.1
Ubicación: BNCS