Construção e caracterização de vírus febre amarela (FA) 17D recombinantes expressando o domínio III da proteína e de dengue 2 na região intergênica e NS1 do vírus FA 17D / Construction and characterization of virus yellow fever (FAN) 17D recombinant expressing domain III of the protein and of dengue 2 in intergenic region and NS1 of the virus FAN 17D
Valadão, Ana Luiza Chaves.
Rio de Janeiro; s.n; 2008. xx,135 p. ilus, tab, graf, mapas.
Tesis
en Portugués
| LILACS | ID: lil-500660
A dengue é uma arbovirose transmitida ao homem por meio da picada de insetos vetores que albergam o vírus dengue (gênero Flavivirus, família Flaviviridae). Este vírus apresenta-se como 4 sorotipos (den-1 a den-4), antigenicamente distintos, embora todos possuam mesma epidemiologia e causem os mesmos sintomas. A infecção por dengue é caracterizada por amplo espectro de manifestações clínicas e sua re-emergência é responsável por grande impacto na saúde pública mundial. Apesar de diversas tentativas para o desenvolvimento de uma vacina contra dengue, nenhuma ainda está disponível. Neste trabalho utilizamos o vírus vacinal da Febre Amarela 17D (FA 17D) para expressão do domínio III (DIII) da proteína de envelope (E) de den-2, na região intergênica E/NS1, baseado nas boas propriedades da vacina contra FA. A escolha do DIII den-2 justifica-se por ele estar associado a processos de infecção celular e por ser o principal indutor de resposta imune mediada por anticorpos neutralizantes dirigida à partícula viral. O estudo de alinhamento do DIII de diferentes genótipos e asua modelagem molecular permitiram uma melhor caracterização desta região em relação à sua variabilidade, mutantes de escape de neutralização e sítios de ligação a receptores celulares. A abordagem de expressão do DIII da proteína E de den-2 no genoma do vírus FA 17D baseou-se na montagem do cassete de expressão contendo motivos duplicados de aminoácidos conservados, flanqueadores da região intergênica E e NSI (Bonaldo et al., 2007), permitindo desta forma, o correto processamento da poliproteína viral em associação ao retículo endoplasmático (RE) celular. Foram gerados dois diferentes vírus FA recombinantes que albergavam a inserção heteróloga correspondente ao DIII den-2, indicando que esta inserção não acarretou em um grande comprometimento da estrutura e função virais. Estes vírus FA recombinantes diferiam entre si quanto à porção C-terminal do cassete de expressão, onde um deles...Flavivírus.
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