Cryptococcus laurentii é um patógenohumano raro, ubíquo na natureza. O objetivo deste estudo foi avaliar a aplicação do método de difusão do disco para determinar a sensibilidade ao fluconazol de isolados de C. laurentii e determinar a concentração fungicida mínima (CFM) do fluconazol. Foi determinada a sensibilidade ao fluconazol pelos métodos de difusão do disco e microdiluição em caldo de 11 isolados de C. laurentii, de acordo com CLSI (Clinical and Laboratory StandardsInstitute), e a CFM pelo método de microdiluição em caldo. O método de difusão do disco mostrou quatro isolados sensíveis, três sensíveis dose-dependentes e quatro resistentes, enquanto que pelo método de microdiluição, 10 isolados foram sensíveis e um sensível dose-dependente. A concordância entre os dois métodos foi de 36,4por cento. Um isolado apresentou CFM de 8 mi g/mL e dois de 64 mi g/mL. Embora o número de isolados estudados seja pequeno, os resultados sugeremque o método de difusão do disco não deve ser usado na determinação da sensibilidade in vitro dos isolados de C. laurentii ao fluconazol, e apesar de ser uma droga fungistática, o fluconazol pode apresentar atividade fungicida in vitro para alguns isolados do complexo C. laurentii.