Biblioteca Virtual en Salud

A diferenciação dos epimastigotas (formas replicativas e não-infectivas) em tripomastigotas metacíclicos (formas não-replicativa e infectivas) é o processo denominado metaciclogênese. Um evento essencial para a metaciclogênese, que pode ser mimetizado in vitro, é o estresse nutricional que os parasitas enfrentam nas porções posteriores do tubo digestivo do inseto vetor. Importantes mudanças no programa de expressão gênica ocorrem durante o estresse e desempenham um papel fundamental nas mudanças morfológicas e fisiológicas observadas durante a metaciclogênese. No entanto, poucas informações estão disponíveis em relação à capacidade e diferentes condições de estresse em disparar a metaciclogênese e, também, sobre os genes envolvidos na regulação dessas respostas. Para tanto, foi realizada uma análise comparativa das diferentes condições estresse (aumento temperatura, diminuição do pH e o estresse nutricional), em experimentos de metaciclogênese in vitro a fim de avaliar a capacidade de diferenciação do parasita diante de tais condições. Foi observado que todos os parasitas submetidos às condições de estresses são capazes de se diferenciar, entretanto, os parasitas provenientes dos estresses de pH e temperatura sofrem um retardo no disparo da metaciclogênese, porém esta diferença é minimizada até o final do processo. Para comparar as propriedades biológicas dos tripomastigotas metacíclicos originados de cada condição de estresse, foram feitos ensaios de infecção em células Vero e camundongos Swiss. Foi possível constatar que todos os ripomastigotas foram capazes de infectar as células Vero, assim como, infectar os camundongos. Para investigar a expressão dos genes foi utilizada a tecnologia de microarranjos. Foi selecionado um conjunto de 32 genes especificamente expressos nos tipos de estresse estudados. Para os genes selecionados foram realizadas análises quantitativas pela técnica de PCR em tempo real (RT-PCR) que validaram os dados de...epimastigotas.(AU)