Viability of fresh and frozen bull sperm compared by two staining techniques / VIABILITY OF FRESH AND FROZEN BULL SPERM COMPARED BY TWO STAINING TECHNIQUES
Semencryopreservation results in sublethal damage to sperm due to membrane deterioration and an increased number of spermatozoa that undergo acrosome reaction, these damages lead to fertility reduction. The objective of this study was to compare two methods of staining in order to evaluate bull sperm viability after cryopreservation. A single batch of fresh and frozen semen from eight Holstein bulls was obtained for assessment of sperm viability and acrosomal status. Fresh and frozen-thawed semen samples were stained with eosin-nigrosin (EoNig) and the triple stainingtechnique (TriSt) and evaluated under a light microscope. The results showed a significant decrease (P 0.05) in the number of viable cells after cryopreservation with both techniques. A significant difference (P 0.05) in viability on both fresh and frozen thawed sperm was observed when the two stains were compared. Differences in viability among bulls using both stainingtechniques were found on fresh samples, whereas in frozen-thawed sperm no differences were observed with the TriSt (P 0.05). A marked decline (41.4 ± 11 S.D., P 0.001) in the mean number of acrosome intact live sperm (AILS) was observed after cryopreservation using TriSt. In contrast, the EoNig technique overestimated the mean number of living sperm that could maintain their fertilizing ability on the frozen-thawed semen sa
A criopreservação do sêmen resulta em danos não letais ao esperma devido a deterioração da membrana e aumento no número dos espermatozóides que apresentam reação acrossômica, e estes danos resultam em redução na fertilidade. O objetivo deste estudo foi comparar dois métodos de coloração para avaliação da viabilidade de espermatozóides de bovinos após criopreservação. Uma amostra de sêmen fresco e criopreservado de oito touros da raça Holandesa foi obtida para determinação da viabilidade espermática e estado do acrossomo. As amostras de sêmen fresco e criopreservado foram coradas com eosina-nigrosina (EoNig) e pela técnica de tripla coloração (TriSt) e avaliados por microscopia óptica. Os resultados revelaram uma redução significante (P 0,05) no número de células viáveis após a criopreservação com ambas as técnicas. Uma diferença significante (P 0,05) na viabilidade do sêmen fresco e criopresercado foi observada pela comparação das duas técnicas. Diferenças na viabilidade entre touros usando as duas técnicas de coloração foram encontradas nas amostras frescas, enquanto no sêmen criopreservado nenhuma diferença foi observada com TriSt (P 0,05). Uma marcada redução (41, 4 ± 11 D.P., P 0.001) no número médio de acrossomos intactos em espermatozóides vivos foi observada com TriSt. Por outro lado, a técnica EoNig superestimou o número médio de espermatozóides vivo