Biblioteca Virtual en Salud

As tetraciclinas são antibióticos ativos contra bactérias Gram positivas e negativas pela inibição da síntese proteica, utilizados na saúde humana e animal. Em animais, são utilizadas a oxitetraciclina, tetraciclina, clortetraciclina e doxiciclina para profilaxia e promoção do crescimento, sendo suplementadas às rações em pequenas doses. Sua presença em tecidos animais já foi evidenciada, assim a Agência Nacional de Vigilância Sanitária criou um programa, para avaliar a exposição do consumidor a resíduos de drogas veterinárias pela ingestão de alimentos de origem animal, principalmente tecido de frango, onde deve ser monitorado o Limite Máximo de Resíduo de 100 ng/g para cada tetraciclina. Sua análise é complexa, pois podem formar complexos com íons metálicos e se ligar a proteínas presentes nos tecidos. Assim o objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento e validação de método de análise para a identificação e quantificação de resíduos de tetraciclina, oxitetraciclina, clortetraciclina e doxiciclina presentes em tecido de frango através da Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a Espectrometria de Massas. Para extração do tecido de frango utilizou-se um tampão McIlvaine-EDTA e extração por fase sólida para promover desproteinização, concentração e limpeza da matriz. Para a validação deste método foi adaptada uma planilha cedida por pesquisadores da Holanda, dividida em quatro dias de experimentos cujos resultados deverão ser avaliados com base nos parâmetros estabelecidos pela União Européia e Codex Alimentarius. A linearidade para cada analito foi verificada pela na faixa de concentração 50 a 200 ng/g de tecido. O método foi considerado exato e repetitivo apesar da variação de alguns experimentos; foi considerado reprodutivo para a Tetraciclina e Clortetraciclina nos níveis 50, 100 e 150 ng/g, e para Oxitetraciclina em 50 ng/g e para Doxiciclina em 50 ng/g e 100 ng/g. A especificidade foi comprovada pela ausência de interferentes no tempo de retenção exato das tetraciclinas. As recuperações foram consideradas satisfatórias, sendo a média >60% em todos os níveis. Os valores para o limite de decisão (CC?) e a capacidade de detecção (CC?) do método, variaram na faixa de 102,2-126,7 e 112,8-146,5 ng/g, respectivamente. O Limite de Detecção estimado e Limite de Quantificação calculado abaixo de 50 ng/g, comprovando a sensibilidade do método. A estabilidade foi verificada a partir de análise de soluções padrões de uso frescas, armazenadas em diferentes temperaturas (-20ºC, +4ºC, +20ºC todas no escuro e +20ºC+luz) e analisadas nos tempos 0,7,14 e 31 dias após seu preparo. Após análise foi recomendada a utilização de solução padrão de uso em metanol por período de uma semana quando armazenada em câmara fria; após esse período devem ser preparadas novas soluções de uso