Sequenciamento do mRNA da hepcidina e sua expressão gênica em equinos submetidos à inflamação experimental
Filho, José Paes de Oliveira.
Botucatu; s.n; 12/08/2010. 189 p.
Tesis
en Portugués
| VETTESES | ID: vtt-9561
A hipoferremia observada durante a inflamação sistêmica e mediada pela hepcidina, um peptideo sintetizado principalmente no fígado de mamiferos. 0 aumento da hepcidina e particularmente util durante a inflamação aguda, restringindo a disponibilidade do ferro necessario para o crescimento de microorganismos. Os objetivos deste estudo foram clonar e sequenciar 0 RNAm da hepcidina equina, descrever a sua expressao em tecidos de cavalos saudaveis; e entao, analisar a influencia da inflamação induzida em cavalos na expressao do RNAm da hepcidina no figado e medula 6ssea e a concentração plasmatica de terra. 0 RNAm da hepcidina foi c1onado e sequenciado a partir de amostras de figado colhidas após o óbito de seis cavalos. A expressão basal da hepcidina de diferentes tecidos de quatro equinos coletados assepticamente após o abate comercial foi realizada por RT-PCR em tempo real (qRT-PCR). A inflamação foi induzida em seis cavalos saudaveis com duas injec;oes de 5 mL de adjuvante completo de Freund (FCA) no musculo do pescoço as 0 e 12 horas e em outros seis cavalos saudaveis pela infusao intravenosa de 30 ng/kg de PV de lipopolissacarideos de Escherichia coli (LPS) as 0 h. A concentração plasmatica de ferro foi mensurada em momentos entre 0 e 240 horas após a primeira administração de FCA ou LPS. Para expressão do RNAm da hepcidina determinada par qRT-PCR usou-se amostras de biópsias de figado e medula óssea colhidas imediatamente antes (controle) e as 6 e 18 horas após a administração de FCA ou LPS. 0 RNAm da hepcidina equina tem 354 pb, incluindo 19 pb na regiao nao traduzida 5' (UTR), 261 pb na janela aberta de leitura e 74 pb na UTR 3'. Analises relativas revelaram que a hepcidina e altamente expressa no figado de cavalos saudaveis, embora uma pequena expressao ocorra tambem em outros tecidos. Durante a inflamação experimental um pico de hipoferremia foi observado 30 h após a
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