ABSTRACT
BACKGROUND: Pyruvate kinase deficiency (PKD) is a rare recessive congenital hemolytic anemia caused by mutations in the PKLR gene. The disease shows a marked variability in clinical expression. We studied the molecular features of nine unrelated Argentinian patients with congenital hemolytic anemia associated with erythrocyte pyruvate kinase deficiency. DESIGN AND METHODS: Routine hematologic investigations were performed to rule out other causes of chronic hemolytic anemia. Sanger sequencing and in-sílico analysis were carried out to identify and characterize the genetics variants. RESULTS: Six different novel missense variants were detected among the 18 studied alleles: c.661 G > C (Asp221His), c.956 G > T (Gly319Val), c.1595 G > C (Arg532Pro), c.347 G > A (Arg116Gln), c.1232 G > T (Gly411Val), c.1021G > A (Gly341Ser). Structural implications of amino-acid substitutions were correlated with the clinical phenotypes seen in the probands. CONCLUSIONS: This is the first comprehensive report on molecular characterization of pyruvate kinase deficiency in Argentina and the second from South America that would contribute to our knowledge on the distribution and frequency of PKLR variants in our population but also offer new insights into the interpretation of the effect of PKLR variants and phenotype.
Subject(s)
Alleles , Anemia, Hemolytic, Congenital Nonspherocytic/genetics , Mutation, Missense , Pyruvate Kinase/deficiency , Pyruvate Metabolism, Inborn Errors/genetics , Adolescent , Adult , Amino Acid Substitution , Argentina , Child , Child, Preschool , Female , Humans , Infant , Male , Pyruvate Kinase/geneticsSubject(s)
Anemia, Hemolytic/pathology , Erythrocytes/pathology , Glucosephosphate Dehydrogenase Deficiency/pathology , Glucosephosphate Dehydrogenase/genetics , Protein Isoforms/genetics , Anemia, Hemolytic/genetics , Chronic Disease , Erythrocytes/metabolism , Glucosephosphate Dehydrogenase Deficiency/genetics , Humans , Infant , MaleABSTRACT
INTRODUCCIÓN Los fallos medulares hereditarios (FMH) son desórdenes genéticos caracterizados por citopenias uni o multilinaje en sangre periférica secundarias a la disminución en la producción medular. Se ha observado la presencia de telómeros anormalmente cortos en pacientes (pts) con FMH. OBJETIVO Realizar la caracterización fenotípica, genotípica y de la longitud telomérica (LT) en pts con sospecha de FMH. MÉTODOS Se estudiaron 87 pts pediátricos con sospecha de FMH que consultaron al Servicio de Hematología y Oncología del Hospital de Pediatría S.A.M.I.C. Prof. Dr. Juan P. Garrahan entre los años 2013 y 2017 (mujeres, 54; Varones, 33; Mediana Edad; 8.58 años (0.03-18.98)). La LT se evaluó por la técnica MMQPCR y la presencia de mutaciones en los genes TERT, TERC, TINF2, DKC1, SBDS y ELANE por PCR Secuenciación-Sanger. RESULTADOS Treinta y dos pts presentaron pancitopenia, 5 bicitopenia y 50 citopenia unilinaje (3 anemias, 12 trombocitopenia y 35 neutropenia). La LT se determinó en 83 pts de los cuales 15 presentaron LT ≤ percentilo (pc) 10 por lo que se les realizó el estudio molecular completo. De los 87 pts en estudio, 35 ingresaron con neutropenia y se les secuenció el gen ELANE. Se encontraron alteraciones en 10/35 pts, todos ellos con freno madurativo de la serie mieloide y LT > pc 10. Se secuenció el gen SBDS en 2 pts con fenotipo característico de Síndrome de Shwachman-Diamond (SDS) y se detectaron 2 mutaciones en cada uno de ellos que confirmaron el diagnóstico (dx). DISCUSIÓN El estudio permitió la caracterización fenotípica de los pts pediátricos con fallo medular estudiados. La secuenciación de los genes ELANE y SBDS confirmó el dx de Neutropenia severa congénita, Neutropenia cíclica y SDS en 4, 1 y 2 pts respectivamente. La alta variabilidad genotípica y el tiempo que requiere el estudio por PCR secuenciación-Sanger sugerirían que sólo las nuevas tecnologías de secuenciación masiva permitirían un rápido dx molecular de los FMH
