ABSTRACT
Two hundred and thirty-three blood samples of water buffalo were collected on four farms in Veracruz state and Tabasco state, Mexico, to detect and confirm the identities of Babesia and Anaplasma spp. sequences. Nested PCR assays were used for the amplification of specific genes encoding B. bovis rhoptry-associated protein (RAP-1), B. bigemina SpeI-AvaI restriction fragment, and Anaplasma marginale major surface protein 5 (MSP5). Using DNA sequencing and BLASTn analysis for DNA homology hemoparasite identification, the identities of the hemoparasites were established by comparing the nucleotide sequences obtained in this study with those available in the GenBank database at the National Center for Biotechnology Information (NCBI). Water buffalo infection with at least one of the hemoparasites under study was detected in 45% (105/233) of the blood samples, while a mixed infection with B. bovis and B. bigemina was detected in 6.4% (15/233) of samples. For this cross-sectional study, mixed infections with the three hemoparasites were not detected. BLASTn analysis revealed that the nucleotide sequences of the water buffalo isolates shared sequence identity values ranging from 88 to 100% with previously published gene sequences of B. bovis, B. bigemina, and A. marginale. The current results confirm that water buffalo, as cattle, are also carriers of hemoparasite infections that are tick-transmitted, and suggest that they probably have an important role in the epidemiology of bovine babesiosis in Mexico.
ABSTRACT
El objetivo del trabajo fue evaluar la inocuidad y la capacidad inmunoprotectora de un inmunógeno combinado de Babesia bigemina y Babesia bovis a una dosis de 108 y 109, respectivamente, bajo un desafío controlado. En el primer experimento (inocuidad) se utilizaron 16 bovinos Holstein provenientes de una zona libre de garrapatas y negativos a anticuerpos contra Babesia spp, mediante la prueba de inmunofluorescencia indirecta (IFI), los cuales fueron inoculados, vía intramuscular, con 1 X 109 eritrocitos infectados (EI) con una cepa atenuada de B. bigemina y 108 EI de una clona irradiada de B. bovis, ambas derivadas de cultivo in vitro. Se observaron cambios en las constantes fisiológicas a partir del día 7 y hasta el día 14 posinoculación (PI) en los animales sin verse éstos físicamente afectados. El porcentaje de eritrocitos parasitados (PEP) fue <0.01 por ciento. El segundo experimento (inmunogenicidad), se realizó tres meses PI y consistió en el desafío de 8 de los animales del experimento 1 con cepas virulentas de ambas especies del protozoario a una dosis de 108 EI de cada una. Cuatro animales adicionales sirvieron como grupo testigo. El grupo inmunizado presentó ligera disminución en el volumen celular aglomerado (VCA) con temperatura rectal (TR) sin cambios y PEP de 0.06 y <0.01 para B. bigemina y B. bovis, respectivamente. El grupo testigo presentó TR mayor a 400C, disminución del VCA (29 por ciento) y el PEP fue de 0.5 para B. bigemina y 0.03 para B. bovis; estos animales requirieron tratamiento para evitar su muerte. Se concluye que el inmunógeno combinado de B. bigemina y B. bovis a dosis altas no provoca reacciones clínicas severas en animales susceptibles y proporciona una sólida protección al desafío controlado con cepas virulentas
