ABSTRACT
In vitro embryo production and embryo transfer (ET) in buffaloes has been developed for decades. However, most studies are focused on the donor or laboratory improvements, and there is a lack of reports regarding the recipients. Therefore, our aim was to investigate factors associated to pregnancy (P/ET), pregnancy loss (PL), and calving rates in buffalo recipients. The studied factors were season, recipient parity, the synchronization protocol, the CL diameter, asynchrony between the embryo and the recipient, the day of the recipient estrous cycle, the embryo (fresh vs. vitrified), the day of embryo development, and the embryo stage. These retrospective data, from a program of in vitro produced embryos, were analyzed by logistic regression, and the odds ratio was also estimated. Two factors were related to P/ET and the calving rate: (1) progesterone associated to estradiol plus eCG protocol for fixed time ET tended to affect positively P/ET on day 30 (41.9 vs. 36.1%, respectively; P = 0.07; AOR = 1.28) and P/ET on day 60 (37.8 vs. 36.1%, respectively; P = 0.09; AOR = 1.08) compared to the Ovsynch protocol; and (2) the CL diameter (≥14.5 mm) at transfer increased P/ET on day 30 (47.4 vs. 32.5%; P < 0.01; AOR = 1.87) and on day 60 (45.3 vs. 27.7%; P < 0.01; AOR = 2.16), and also the calving rate (37.9 vs. 21.7%; P < 0.01; AOR = 2.20). PL was greater when ET was done in the nonbreeding season compared to the breeding season (PL 30-60: 12.8 vs. 0.0%, P = 0.01; AOR > 999.99; PL 60-calving: 26.8 vs. 3.6%, P = 0.03; AOR = 9.90; and PL 30-calving: 36.2 vs. 3.6%, P = 0.01; AOR = 15.30). In conclusion, the data of our study indicated that the synchronization protocol, the CL diameter, and ET during the breeding season impacted the reproductive efficiency of buffalo recipients.
ABSTRACT
O conhecimento da ultra-estrutura de embriöes bovinos, dentro das diferentes sub-espécies permite estabelecer características inerentes a cada uma delas, possibilitando o desenvolvimento de métodos eficientes para estocagem e conservaçäo desses embriöes. Diante disso,17 embriöes bovinos, da raça Nelore, foram preparados para análise ultra-estrutural, sob microscopia eletrônica. O processamento dos embriöes foi realizado no Departamento de Reproduçäo Animal da UNESP-Jaboticabal. Para tanto, os embriöes foram lavados sucessivas vezes para remoçäo do SFB, utilizado no meio de transporte, fixados em soluçäo de glutaraldeído a 1 por cento em tampäo cacodilato de sódio 0,15M e pH 7,6, desidratados em soluçöes com concentraçöes crescentes de álcool etílico, pré-incluídos, incluídos em cápsulas BEEM (Better equipment for electron microscopy), contendo resina EPON-812, submetidos em estufa à temperatura de 60§C por 72 horas, para polimerizaçäo, e seccionados. Devido às pequenas dimensöes, os embriöes inicialmente foram submetidos a secçöes semifinas(0,5µm), para que a linha de corte propiciasse visualizaçäo do trofoblasto(TF) e massa celular interna(MCI). Após a triagem dos cortes, realizaram-se secçöes ultrafinas (60-70nm), que foram colhidas em grades de cobre, coradas com acetato de uranila e citrato de chumbo e observadas ao microscópio eletrônico. Dos embriöes processados 64,71 por cento foram selecionados para análise ultra-estrutural. Observou-se que as células dos embriöes analisados apresentavam-se semelhantes às descriçöes para blastocistos de bovinos Bos taurus indicus. O trofoblasto era formado por células alongadas que constituíam duas partes distintas; o trofoblasto mural, que delimitava a blastocele, e o trofoblasto polar, que recobria as células da massa celular interna. Suas células estavam intimamente ligadas por complexos juncionais, seguidos por desmossomos. As superfícies externas dessas células eram cobertas por microvilosidades proeminentes, com filamentos axiais, enquanto suas superfícies internas apresentavam-se lisas, com junçöes comunicantes (do tipo gap) com as células da MCI. Possuíam organelas usuais como mitocôndrias, lisossomos, ribossomos e poliribossomos, retículo endoplasmático liso e rugoso e complexo de Golgi com forma e número variados. Observam-se também gotas lipídicas e numerosas vesículas. As células da MCI eram cubiformes, ligadas umas as outras por junçöes desmossômicas, apresentando coloraçäo...
