Desarrollo de un modelo experimental para el estudio de la toxicidad cardiaca inducida por bupivacaína, implicaciones para la anestesia en Cirugía Ambulatoria / Development of an experimental model for the study of bupivacaine induced cardiotoxicity, implications for anesthesia in Ambulatory Surger

Objetivo: Recientemente existe un renovado interés por las técnicas locorregionales, asistiendo a una gran demanda tanto por los pacientes como por los equipos quirúrgicos, especialmente en la cirugía ambulatoria. La descripción de casos clínicos graves asociados a intoxicación por bupivacaína es un evento infrecuente, sin embargo, para mejorar nuestro conocimiento y prevenir la toxicidad de los anestésicos locales es necesario el desarrollo de modelos animales. Los efectos adversos cursan con alteraciones electrocardiográficas relacionadas especialmente con la conducción ventricular y con prolongación del intervalo QRS. Poder detectar una intoxicación grave por anestésicos locales antes de que ocurra un colapso cardiovascular tendría importantes consideraciones clínicas. Nuestro objetivo fue desarrollar un modelo no letal de intoxicación aguda por bupivacaína y correlacionar los niveles del fármaco con el complejo QRS como marcador instantáneo de una intoxicación grave por anestésicos locales. Material y métodos: Se estudiaron 8 cerdos large-White premedicados con ketamina, 20 mg/kg, y anestesiados con tiopental sódico (19 ± 8 mg/kg-1) como inductor y sevoflurano 1 CAM (2,6 %) para el mantenimiento anestésico. Se canalizaron la arteria y vena femoral para la monitorización invasiva, determinaciones analíticas y de niveles de bupivacaína. Al finalizar la instrumentalización, se administró bupivacaína en dosis de 4 mg/kg-1. Se realizaron determinaciones analíticas antes y al 1, 5, 10 y 30 minutos de administración del fármaco. Se evaluó la correlación entre los niveles de bupivacaína en sangre y el intervalo QRS. Se consideró significativo una p < 0,05. Análisis estadístico: Test de correlación de Spearman. Resultados: Ningún animal falleció como resultado de la experiencia. El porcentaje medio de aumento del QRS fue de 185 ± 60 ms. Hubo una correlación estadísticamente significativa entre la duración del intervalo QRS y los niveles plasmáticos de bupivacaína, coeficiente de correlación de Spearman: 0,80; p < 0,0001. Conclusión: Nuestro modelo ha permitido el estudio de uno de los aspectos más relevantes de toxicidad de la bupivacaína. El ensanchamiento del intervalo QRS se ha relacionado positivamente con los niveles de bupivacaína. La modificación instantánea de este parámetro puede ser un marcador clínico instantáneo de gran utilidad en la práctica clínica diaria

Objective: Recently there has been an extraordinary advance in the techniques of regional anaesthesia, assisting to a great demand from the patients and the surgical team especially in day surgery. Reports of serious cardiac bupivacaine intoxication are fortunately unusual, however in order to improve our knowledge and prevention of local anaesthetic toxicity the development of animal models is needed. The adverse event comes along with important electrocardiographic alterations, especially those related to ventricular conduction such as the QRS interval widening. Detecting a severe intoxication with local anaesthetic before a cardiovascular collapse takes place involves important clinical considerations. We aimed to develop a non-lethal steady model of bupivacaine intoxication and correlate bupivacaine plasma levels with the QRS complex duration as an instantaneous marker of severe local anaesthetic intoxication. Material and methods: Eight mini-pigs were premedicated with ketamine and anesthetized with intravenous sodium thiopental 5 mg/kg. The anesthetic maintenance was performed with sevoflurane 1 CAM (2.6 %). Femoral artery and vein were canalized for invasive monitoring, analytical blood gas samples and bupivacaine levels determinations. After instrumentation and motorization, a bupivacaine bolus of 4 mg/kg-1 was administered. Electrocardiographic parameters were recorded and blood samples were taken before and 1, 5, 10 and 30 min after the drug administration. We correlated venous plasma concentration with the QRS widening observed. Statistical: Spearman rank correlation coefficient. A P-value < 0.05 was considered statistically significant. Results: No animal died as a result of the experience and hemodynamic data and blood gas analysis were maintained at physiological range. The mean maximal percent increase in QRS interval was 185 ± 60 ms. There was a statistically significant positive correlation between the QRS interval and bupivacaine plasmatic levels. (Correlation coefficient of r = 0,80 (p < 0,0001). Conclusions: This porcine model of bupivacaine intoxication has been steady, obtaining important electrocardiographic modifications and keeping alive all animals. The relevant QRS interval widening was positively correlated with bupivacaine plasmatic levels. The instantaneous modification of this electrocardiographic parameter could be a useful clinical marker of serious bupivacaine intoxication in a daily basis

Estudio comparativo de la toxicidad del metilmercurio, cadmio (II) ycromo (VI) en cultivos primarios de neuronas y astrocitos de rata / Comparative study of methylmercury, cadmium (II) and chromium (VI) toxicity in rat primary cultures of neurons and astrocytes

El presente estudio pretende comparar la concentración letal 50 (CL , dosis que causa la muerte del 50% de las células) de 50metilmercurio, cadmio (II) y cromo (VI) en cultivos primarios de corteza de rata. Se emplearon hemisferios cerebrales de rata para preparar los cultivos primarios. Los cultivos primarios de neuronas fueron realizados a partir de ratas Wistar de 14-16 días de gestación, usando el medio Eagle modificado por Dulbecco. Para los cultivos primarios de astrocitos se emplearon ratas de un día de vida y el medio de cultivo de Waymouth. Se emplearon las tinciones de azul de metileno y azul tripano para cuantificar la muerte neuronal mediante citometría. La CL para neuronas y astrocitos se calculó mediante el 50método de Reed-Muench. En cultivos de 24 horas, la CL para las 50-6 -6 neuronas fue de 5 x 10 M para el metilmercurio, 3,7 x 10 M para el-6 cadmio (II) y 5,34 x 10 M para el cromo (VI). En el caso de los-5 astrocitos, las CL en los cultivos de 24 horas fue de 1,46 x 10 M para 50-5 -5 el metilmercurio, 3,73 x 10 M para el cadmio (II) y 2,46 x 10 M para el cromo (VI). Estos resultados muestran una resistencia diez veces mayor aproximadamente de los astrocitos con respecto a las neuronas para estos tres compuestos (AU)

This study aims to compare letal concentration 50(LC , toxic dose causing death of 50% of the cells) of methylmercury, 50cadmium (II) and chromium (VI) in primary cultures of rat cortex.Cerebral hemispheres of rat were used to prepare the primarycultures. The neuronal primary cultures were performed fromembryonic Wistar rats of 14-16 days of gestation in Dulbecco'smodification of Eagle's medium. Astrocytes primary cultures were prepared with neonatal Wistar rats in Waymouth´s medium. Methylene blue and try pan blue staining were used to assess neuronal death with cytometry. LC for both neurons and astrocytes were 50calculated by means of Reed-Muench method. The main results were:-6 LC in 24-hour culture of neurons was 5 x 10 M for methylmercury, 50-6 -6 3.7 x 10 M for cadmium (II) and 5.34 x 10 M for chromium (VI).-5 LC in 24-hour cultures of astrocytes was of 1.46 x 10 M for 50-5 -5 methylmercury, 3.73 x 10 M for cadmium (II) and 2.46 x 10 M for chromium (VI). These results demonstrate that astrocytes are approximately ten times more resistant than neurons for the three toxic compounds (AU)