ABSTRACT
RESUMEN Las arbovirosis son enfermedades virales transmitidas por artrópodos (arthropod-borne virus). Dengue, zica y chikungunya se destacan entre los arbovirus emergentes y reemergentes en los últimos años en todo el mundo. La similitud de los síntomas de estas infecciones hace que el diagnóstico clínico sea ineficaz, dificultando las medidas profilácticas y preventivas para nuevos brotes. El diagnóstico molecular mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real es una de las formas de diagnosticar esas enfermedades. En este estudio se recopiló y evaluó la literatura sobre el diagnóstico de arbovirosis. Nuestro objetivo era responder a una pregunta orientadora: ¿la metodología de PCR en tiempo real es eficaz para diagnosticar arbovirosis? Se buscaron artículos científicos de acceso abierto en las bases de datos Pubmed (50 artículos) y Scielo (107 artículos), entre 2014 y 2019. La selección se realizó utilizando los criterios de inclusión y exclusión, quedando solo 20 artículos. Entre estos, el 85% fueron estudios transversales, el 10% fueron revisiones sistemáticas y el 5% fueron estudios de casos. El período de publicaciones fue del 50% en 2017; 35% en 2016; y 5% en 2014, 2015 y 2019, cada. En cuanto a los virus tratados en los artículos, el 25% de los estudios investigaron sobre el dengue; el 25% el chikungunya y el 20% el virus del Zica. La efectividad del diagnóstico molecular se publicó en el 21% de los artículos (sensibilidad y especificidad); el 53% destacó el límite de detección; 70%, ausencia de reacciones cruzadas; y el 80%, la diferenciación entre virus.
ABSTRACT
Dendritic cells (DCs) are potent antigen presenting cells and possess a direct anti-tumor cytotoxic ability. Nevertheless, the mechanism of anti-tumor cytotoxicity by DCs and the methods for its evaluation are not fully elucidated. In order to clarify this mechanism of cytotoxicity, we examined the ability of DCs 1) to suppress [3H] thymidine (3H-TdR) uptake by tumor cells; 2) to induce cytolysis on 51Cr-labeled tumor cells; 3) and to induce DNA fragmentation on 3H-TdR labeled tumor cells (JAM test). Cytolysis and DNA fragmentation are markers of necrotic and apoptotic mechanisms of cytotoxicity in vitro, respectively. DCs inhibited approximately 38.6% to 54.8% of the growth of B4D6, NB4, U937, and Daudi cells as evaluated by the uptake of 3H-TdR. However no cytolysis was verified by 51Cr-release assay. On the other hand, cytotoxicity rates found using the JAM test ranged from 3 to 81% depending on the cell line and the effector to target cell ratio. The discrepancy of cytotoxicity between 51Cr-release assay and the JAM test may be due to the phagocytosis of apoptotic tumor cells or the absorption of released 51Cr by DCs surrounding the target cells. In conclusion, the JAM test was more sensitive than the 4-h and the 10-h 51Cr-release assay to investigate cytotoxicity mediated by DCs toward hematopoietic tumor cell lines in vitro.
