ABSTRACT
Cases of human visceral leishmaniasis (HVL) were not recorded until recently in the Chaco region of northwestern Argentina. Dogs were surveyed at the sites of infection of two HVL index cases in the Chaco region of Salta province. Canine cases (CanL) were diagnosed by two parasitological methods, two molecular methods targeting mini- and maxicircle DNA, and immunochromatographic dipstick. Among 77 dogs studied, 10 (13%) were found infected with Leishmania spp. In seven dogs and two humans, the infecting species was typed as Leishmania (Leishmania) infantum. The same genotype was detected in the human and two of the CanL. Although several diagnostic methods displayed weak or moderate agreement, the concordance values for serology versus maxicircle PCR were very good (Kappa index = 0.84). Sandflies captured in the area were identified as Lutzomyia migonei and Lu. cortelezzii/Lu. sallesi (cortelezzii complex). The focal appearance of leishmaniasis in dogs and humans in a sylvatic region and its relatively low prevalence of infection suggests that L. (L.) infantum transmission to dogs and humans may, in this region, stem from sylvatic reservoirs.
Subject(s)
Dog Diseases/epidemiology , Leishmania infantum/isolation & purification , Leishmaniasis, Visceral/epidemiology , Leishmaniasis, Visceral/veterinary , Adult , Animals , Argentina/epidemiology , Cytochromes b/genetics , DNA, Protozoan/isolation & purification , Dog Diseases/parasitology , Dogs , Female , Genotype , Humans , Infant , Insect Vectors/parasitology , Leishmania infantum/genetics , Male , Polymerase Chain Reaction/veterinary , Prevalence , Psychodidae/parasitologyABSTRACT
INTRODUCCION: En la ciudad de Salta, la transmisión vectorial de la Enfermedad de Chagas se ha interrumpido desde 1970. Sin embargo, la transmisión congénita continúa debido a la presencia de mujeres infectadas en edad fértil.OBJETIVO: El estudio se propuso: a) incentivar la búsqueda de madres seropositivas, b) diagnosticar y tratar a los niños infectados, c) probar posibles marcadores precoces de curación a fin de evaluar en menor tiempo la efectividad del tratamiento.METODOS: Se trabajó en coordinación con Centro de Atención Primaria de la Salud de la ciudad de Salta. Se aplicaron métodos serológicos convencionales y no convencionales.RESULTADOS: La seroprevalencia en embarazadas en la ciudad de Salta en 2010 fue de 3,1% (61/1946). Se analizaron 57 niños y se encontraron 16 infectados con Trypanosoma cruzi, diagnosticados por microhematocrito o por serología convencional según la edad. Se aplicó tratamiento según las Normas Nacionales de Atención al Infectado Chagásico. Se evaluó la efectividad del tratamiento en 33 niños (edad promedio: 9,6 años), que habían sido tratados durante 2007-2008. El 21,2% (7/33) de esos niños fueron negativos por hemaglutinación en el postratamiento; además, se detectaron 3 antígenos recombinantes como posibles marcadores precoces de cura: Ag SAPA (p=0,0000182), Ag 13 (p=0,0026) y Ag 1 (p=0,02).CONCLUSIONES: Se recomienda el tratamiento y su seguimiento en todos los niños infectados.
INTRODUCTION: In the city of Salta, the vector transmission of Chagas disease has been interrupted since 1970. Nevertheless, congenital transmission is still a problem due to infected women in fertile age.OBJECTIVE: The aims of this study were: a) to search for seropositive mothers, b) to diagnose and to treat infected children, c) to test new antigens in order to detect early markers of treatment effectiveness.METHODS: The study was conducted in coordination with Centers of Primary Health Care in Salta. Conventional and non-conventional serological techniques were applied.RESULTS: During 2010, the Chagas disease prevalence in pregnant women was 3.1% (61/1946). Besides, 16 trypanosoma cruzi-infected children were found, out of 57 analyzed (diagnosed by microhematocrit or by conventional serology, depending on the age). Treatment was applied according to national care guidelines for Chagas disease infected patients. The efficiency of treatment was evaluated in 33 children (average: 9.6 years old), which had been treated during 2007-2008. From these, 21.2% (7/33) were negative for hemagglutination in the post-treatment; and 3 recombinant antigens were detected as possible good markers of treatment effectiveness: Ag SAPA (p=0.0000182), Ag 13 (p=0.0026) and Ag 1 (p=0.02).CONCLUSIONS: Treatment and follow-up should be performed in all infected children.
Subject(s)
Child , Health Centers , Chagas Disease , Chagas Disease/diagnosis , Chagas Disease/prevention & control , Child , Infectious Disease Transmission, Vertical , Trypanosoma cruzi , Argentina , Public HealthABSTRACT
INTRODUCCION: En la ciudad de Salta, la transmisión vectorial de la Enfermedad de Chagas se ha interrumpido desde 1970. Sin embargo, la transmisión congénita continúa debido a la presencia de mujeres infectadas en edad fértil.OBJETIVO: El estudio se propuso: a) incentivar la búsqueda de madres seropositivas, b) diagnosticar y tratar a los niños infectados, c) probar posibles marcadores precoces de curación a fin de evaluar en menor tiempo la efectividad del tratamiento.METODOS: Se trabajó en coordinación con Centro de Atención Primaria de la Salud de la ciudad de Salta. Se aplicaron métodos serológicos convencionales y no convencionales.RESULTADOS: La seroprevalencia en embarazadas en la ciudad de Salta en 2010 fue de 3,1% (61/1946). Se analizaron 57 niños y se encontraron 16 infectados con Trypanosoma cruzi, diagnosticados por microhematocrito o por serología convencional según la edad. Se aplicó tratamiento según las Normas Nacionales de Atención al Infectado Chagásico. Se evaluó la efectividad del tratamiento en 33 niños (edad promedio: 9,6 años), que habían sido tratados durante 2007-2008. El 21,2% (7/33) de esos niños fueron negativos por hemaglutinación en el postratamiento; además, se detectaron 3 antígenos recombinantes como posibles marcadores precoces de cura: Ag SAPA (p=0,0000182), Ag 13 (p=0,0026) y Ag 1 (p=0,02).CONCLUSIONES: Se recomienda el tratamiento y su seguimiento en todos los niños infectados.
INTRODUCTION: In the city of Salta, the vector transmission of Chagas disease has been interrupted since 1970. Nevertheless, congenital transmission is still a problem due to infected women in fertile age.OBJECTIVE: The aims of this study were: a) to search for seropositive mothers, b) to diagnose and to treat infected children, c) to test new antigens in order to detect early markers of treatment effectiveness.METHODS: The study was conducted in coordination with Centers of Primary Health Care in Salta. Conventional and non-conventional serological techniques were applied.RESULTS: During 2010, the Chagas disease prevalence in pregnant women was 3.1% (61/1946). Besides, 16 trypanosoma cruzi-infected children were found, out of 57 analyzed (diagnosed by microhematocrit or by conventional serology, depending on the age). Treatment was applied according to national care guidelines for Chagas disease infected patients. The efficiency of treatment was evaluated in 33 children (average: 9.6 years old), which had been treated during 2007-2008. From these, 21.2% (7/33) were negative for hemagglutination in the post-treatment; and 3 recombinant antigens were detected as possible good markers of treatment effectiveness: Ag SAPA (p=0.0000182), Ag 13 (p=0.0026) and Ag 1 (p=0.02).CONCLUSIONS: Treatment and follow-up should be performed in all infected children.
Subject(s)
Child , Trypanosoma cruzi , Chagas Disease , Chagas Disease/prevention & control , Chagas Disease/diagnosis , Infectious Disease Transmission, Vertical , Child , Health Centers , Argentina , Public HealthABSTRACT
Trypanosoma cruzi infection of host cells is a complex process in which many proteins participate but only a few of these proteins have been identified experimentally. One parasite factor likely to be involved is the protein product of LYT1, a single-copy gene cloned, sequenced, and characterized by Manning-Cela et al. (Infect. Immun. 69:3916-3923, 2001). This gene was potentially associated with infectivity, since the deletion of both LYT1 alleles in the CL Brenner strain (the wild type [WT]) resulted in a null mutant T. cruzi clone (L16) that shows an attenuated phenotype in cell culture models. The aim of this work was to characterize the infective behavior of L16 in the insect vector and murine models. The infection of adult Swiss mice with 10(3) trypomastigotes of both clones revealed a significant reduction in infective behavior of L16, as shown by direct parasitemia, spleen index, and quantitation of tissue parasite burden, suggesting the loss of virulence in the null mutant clone. Although L16 blood counts were almost undetectable, blood-based PCRs indicated the presence of latent and persistent infection during all of the study period and epimastigotes were reisolated from hemocultures until 12 months postinfection. Nevertheless, virulence was not restored in L16 by serial passages in mice, and reisolated parasites lacking the LYT1 gene and bearing the antibiotic resistance genes revealed the stability of the genetic manipulation. Histopathological studies showed a strong diminution in the muscle inflammatory response triggered by L16 compared to that triggered by the WT group, consistent with a lower tissue parasite load. A strong protection against a virulent challenge in both L16- and WT-infected mice was observed; however, the immunizing infection by the genetically modified parasite was highly attenuated.
Subject(s)
Chagas Disease/parasitology , Protozoan Proteins/genetics , Protozoan Proteins/immunology , Trypanosoma cruzi/genetics , Trypanosoma cruzi/immunology , Animals , Chagas Disease/prevention & control , Feces/parasitology , Gene Deletion , Heart/parasitology , Insect Vectors/parasitology , Male , Mice , Muscle, Skeletal/parasitology , Muscle, Skeletal/pathology , Mutation/genetics , Myocardium/pathology , Polymerase Chain Reaction , Triatoma/parasitology , Trypanosoma cruzi/pathogenicity , VirulenceABSTRACT
Calmodulin-ubiquitin (cub) is a single-copy gene of Trypanosoma cruzi, which encodes a 208 aminoacid polypeptide of unknown function, containing putative calcium-binding domains. After targeted deletion, a clone (TulCub8) was derived where one of the two alleles was disrupted. This clone displayed a sharp and stable loss of virulence for mice. Parasitemias after inoculation of 10(6) trypomastigotes of the mutant, as compared to wild-type parasites were 68-fold lower (p=0.018) in adult Swiss mice and 27-fold lower (p=0.002) in newborn Balb/c mice. Epimastigote inocula of the mutant were strongly protective against infection by wild-type parasites. Virulence was not restored by serial passage in mice, showing that the attenuated phenotype is stable and gene-conversion from the intact cub allele does not occur at an appreciable rate. Retransfection of the missing cub allele restored virulence. Complementation experiments showed that the intact cub gene is necessary for full expression of virulence.
Subject(s)
Calmodulin/genetics , Trypanosoma cruzi/pathogenicity , Ubiquitin/genetics , Alleles , Animals , Animals, Newborn , Blotting, Southern , Electroporation , Female , Gene Deletion , Genetic Complementation Test , Mice , Mice, Inbred BALB C , Multigene Family , Transfection , Trypanosoma cruzi/genetics , Trypanosoma cruzi/immunology , Virulence/geneticsABSTRACT
El diagnóstico parasitológico en la Enfermedad de Chagas se ve dificultado por la escasez de parásitos en el material diagnóstico y por los inconvenientes que surgen al emplear las técnicas serológicas para descubrir casos agudos, casos de enfermedad congénita o bolsas de transfusión contaminadas. La Reacción en Cadena de Polimerasas (PCR) ha superado la sensibilidad de las técnicas convencionales de diagnóstico parasitológico porque no sólo es capaz de detectar indirectamente a los parásitos como unidad, sino también a segmentos específicos de ADN que están representados centenares de veces en cada parásito. Presentamos aquí las experiencias que hemos podido realizar hasta ahora para detectar al Trypanosoma cruzi en bolsas de transfusión y en sangre de neonatos de madres chagásicas. En 52 bolsas de transfusión analizadas por 2 métodos serológicos y por PCR encontramos que esta técnica (como así también el hemocultivo y el xerodiagnóstico) tiene poca concordancia (52 por ciento) con la serología. La técnica PCR confirmó 12 de 14 muestras seronegativas (85,7 por ciento es especificidad), pero sólo 15 de 38 seropositivas (39,5 por ciento), lo que indicaría que las pruebas serológicas no señalan, necesariamente, aquellas bolsas que contienen parásitos. La detección precoz del Trypanosoma cruzi en la sangre del recién nacido de madre chagásica es esencial para diagnosticar y tratar la Enfermedad de Chagas congénita, pero con frecuencia los métodos empleados fallan por falta de sensibilidad. Hemos aplicado la técnica PCR y el hemocultivo en forma sistemática a 34 hijos de madres chagásicas, detectando hasta ahora 2 casos congénitos que no habían sido diagnosticados por el método usual de microstrout. El alto costo del método PCR lo hace muy poco recomendable para el tamizaje de los bancos de sangre. Sin embargo, para el diagnóstico de Chagas congénito, esta técnica sería económicamente rentable si se usa como complemento de otros métodos en los centros de diagnóstico perinatal de las zonas endémicas.
Subject(s)
Humans , Male , Female , Infant, Newborn , Mice , Animals , Chagas Disease/diagnosis , Fetal Blood , Molecular Biology , Polymerase Chain Reaction/statistics & numerical data , Serologic Tests , Blood Transfusion , Diagnosis , Hematologic TestsABSTRACT
El diagnóstico parasitológico en la Enfermedad de Chagas se ve dificultado por la escasez de parásitos en el material diagnóstico y por los inconvenientes que surgen al emplear las técnicas serológicas para descubrir casos agudos, casos de enfermedad congénita o bolsas de transfusión contaminadas. La Reacción en Cadena de Polimerasas (PCR) ha superado la sensibilidad de las técnicas convencionales de diagnóstico parasitológico porque no sólo es capaz de detectar indirectamente a los parásitos como unidad, sino también a segmentos específicos de ADN que están representados centenares de veces en cada parásito. Presentamos aquí las experiencias que hemos podido realizar hasta ahora para detectar al Trypanosoma cruzi en bolsas de transfusión y en sangre de neonatos de madres chagásicas. En 52 bolsas de transfusión analizadas por 2 métodos serológicos y por PCR encontramos que esta técnica (como así también el hemocultivo y el xerodiagnóstico) tiene poca concordancia (52 por ciento) con la serología. La técnica PCR confirmó 12 de 14 muestras seronegativas (85,7 por ciento es especificidad), pero sólo 15 de 38 seropositivas (39,5 por ciento), lo que indicaría que las pruebas serológicas no señalan, necesariamente, aquellas bolsas que contienen parásitos. La detección precoz del Trypanosoma cruzi en la sangre del recién nacido de madre chagásica es esencial para diagnosticar y tratar la Enfermedad de Chagas congénita, pero con frecuencia los métodos empleados fallan por falta de sensibilidad. Hemos aplicado la técnica PCR y el hemocultivo en forma sistemática a 34 hijos de madres chagásicas, detectando hasta ahora 2 casos congénitos que no habían sido diagnosticados por el método usual de microstrout. El alto costo del método PCR lo hace muy poco recomendable para el tamizaje de los bancos de sangre. Sin embargo, para el diagnóstico de Chagas congénito, esta técnica sería económicamente rentable si se usa como complemento de otros métodos en los centros de diagnóstico perinatal de las zonas endémicas. (AU)
