Detection of HIV-1 DNA in microglia/macrophages, astrocytes and neurons isolated from brain tissue with HIV-1 encephalitis by laser capture microdissection.

In HIV-1 encephalitis, HIV-1 replicates predominantly in macrophages and microglia. Astrocytes also carry HIV-1, but the infection of oligodendrocytes and neurons is debated. In this study we examined the presence of HIV-1 DNA in different brain cell types in 6 paraffin embedded, archival post-mortem pediatric and adult brain tissues with HIV-1 encephalitis by Laser Capture Microdissection (LCM). Sections from frontal cortex and basal ganglia were stained by immunohistochemistry for CD68 (microglia), GFAP (astrocytes), MAP2 (neurons), and p24 (HIV-1 positive cells) and different cell types were microdissected by LCM. Individual cells or pools of same type of cells were lysed, the cell lysates were subjected to PCR using HIV-1 gag SK38/SK39 primers, and presence of HIV-1 DNA was confirmed by Southern blotting. HIV-1 gag DNA was consistently detected by this procedure in the frontal cortex and basal ganglia in 1 to 20 p24 HIV-1 capsid positive cells, and in pools of 50 to 100 microglia/macrophage cells, 100 to 200 astrocytes, and 100 to 200 neurons in HIV-1 positive cases but not in HIV-1 negative controls. These findings suggest that in addition to microglia, the infection of astrocytes and neurons by HIV-1 may contribute to the development of HIV-1 disease in the brain.

Intradermo-reaçäo cervical para diagnóstico de infecçöes por Eurytrema sp em bovinos / Cervical, intradermal reaction for diagnosis of Eurytrema sp infection in cattle

Foram realizadas intradermo-reaçöes (IDR) cervicais em 101 bovinos, machos e fêmeas, que receberam, simultaneamente e ao acaso, em sete áreas adjacentes, 0,1ml de salina e igual volume de um extrato antigênico de Eurytrema sp, nas seguintes concentraçöes de proteína: 25ug/ml, 50ug/ml, 100ug/ml, 250ug/ml, 500ug/ml e 1mg/ml. Feitas todas as injeçöes intradérmicas e, ao final de 30min, com auxílio de uma régua milimetrada, de cada pápula produzida foram medidos os dois diâmetros maiores, extraídas as médias (diâmetros inicial, Di e final,Df) e calculada a diferença Df-Di. No dia seguinte acompanhava-se o abate de cada animal a fim de se verificar, por meio de exames macroscópicos dos respectivos pâncreas, se eram ou näo parasitados por Eurytrema sp. Concluiu-se, entäo, que o extrato salino bruto do trematódeo, utilizado como antígeno, deverá conter, no momento de sua utilizaçäo, concentraçäo de proteínas equivalente a 250ug/ml e, respectivamente, serem consideradas positivas e negativas as IDR que apresentarem Df-Di>2,5mm e Df-Di<2,5mm

Alteraçöes pancreáticas em bovinos naturalmente infectados por Eurytrema spp e sua associaçäo com a carga parasitária e o número de ovos por grama de fezes (OPG) / Gradation of microscopic lesions in pacreas of Eurytrema spp naturally infected cattle and its relationship with the parasite load and number of eggs per gram of faeces (EPG)

Foram examinados, ao microscópio óptico, fragmentos de 41 pâncreas de bovinos naturalmente infectados por Eurytrema spp e as lesöes encontradas foram classificadas em quatro graus, de acordo com sua extensäo desde o epitélio dos ductos. Em seguida, tomando-se os valores das cargas parasitárias (CP) e o número de ovos por grama de fezes (OPG) dos animais, em cada grau de lesäo estabelecido, comprovou-se que os valores de OPG e, principalmente, da CP podem ser utilizados para caracterizar, de maneira satisfatória, a extensäo das lesöes pancreáticas

Curso natural da eliminaçäo de ovos de Eurytrema sp Loss, 1907 nas fezes de bezerros / The elimination pattern of eggs of Eurytrema sp Loss, 1907 in the faeces of taurine and zebuine crossbred calves

Treze bezerros 3/4 holandês x 1/4 zebu, nascidos em diferentes estaçöes do ano de 1989 e criados intensivamente, foram transferidos para pastagens de capim gordura (Melinis minutiflora) entre 7 meses e 1 ano de idade, no final do período chuvoso (março de 1990), a fim de ser acompanhado o curso natural da eliminaçäo de ovos de Eurytrema sp por grama de fezes (OPG). De 15 em 15 dias, foram feitas as colheitas de fezes para obter as contagens de OPG durante 18 meses. Os primeiros animais que apresentaram exames positivos (a partir de agosto de 1990) foram os que tiveram as maiores contagens de OPG durante o período experimental. Os demais apresentaram os primeiros exames positivos em diferentes ocasiöes e as contagens de OPG destes foram baixas e oscilantes. Três animais apresentaram exames negativos. Provavelmente, a maioria dos bovinos criados em regime de pastejo desta regiäo deveräo apresentar infecçäo parasitária por Eurytrema sp em alguma fase de suas vidas

Distribution of the number of Eurytrema sp. eggs per gram of feces in naturally infected cattle.

Eurytrema sp. egg counts (epg) in the feces of naturally infected cattle were performed and the technique employed showed 94.2% probability of detecting positive cases of the infection with a single examination independently of the host parasite burden. It was also demonstrated that the epg of Eurytrema sp. follows a negative binomial distribution model and is characterized by its small magnitude.

Efeito Anti-helmíntico do albendazole sobre a contagem e ovos de Eurytrema sp (Trematoda) em fezes de bovinos / Effect of anti-helmintic treatment with Albendazole on the egg counts per gram of faeces of Eurytrema sp (Trematoda) in cattle

Utilizaram-se 30 vacas mestiças Holandês x Zebu de diversas idades e naturalmente infectadas com Eurytrema sp, divididas em três grupos de 10 animais, os quais receberam os seguintes tratamentos com Albendazole por via oral: grupo A, 12,5 mg/kg PV; grupo B, 15,0 mg/kg PV e grupo C, 17,5 mg/kg PV. Realizaram-se colheitas de fezes no momento do tratamento e no 7§. 14§ e 21§ dia após. As fezes colhidas foram utilizadas para determinar a contagem de ovos de Eurytrema sp por grama de fezes (OPG). Os resultados foram convertidos para log x + 1. Näo houve diferença (P>0,05) entre as médias de OPG dos animais nos diversos grupos no dia do tratamento e nos dias subsequentes, assim como entre os grupos. A utilizaçäo do Albendazole em áreas endêmicas de Eurytrema sp é limitada, já que altas dosagens do produto, como 17,5 mg/kg PV, podem se tornar economicamente inviáveis ou mesmo ineficazes, pela limitada açäo do Albendazole sobre todas as formas evolutivas do Eurytrema sp em bovinos

Estimativa da carga parasitária (Eurytrema sp) de um bovino em funçäo do número de ovos por grama de fezes (OPG) / Estimation of parasite load as a function of number of eggs per gram of faeces (EPG) in Eurytrema sp infected cattle

Foram utilizados os dados de 39 bovinos oriundos de cidades da mesorregiäo do Sudoeste Paulista referentes à carga parasitária (CP) e correspondente número de ovos de Eurytrema sp por grama de fezes (OPG) para se pesquisar, por meio de estudos de regressäo, um modelo matemático capaz de estimar a primeira a partir da segunda variável. Näo obstante o fato da CP e OPG relacionarem-se gracilmente (R ao quadrado = 38,2 por cento), verificou-se que o objetivo referido pode ser alcançado empregando-se a seguinte relaçäo matemática: CP=63,1050 (OPG+1) elevado a 0,5616. Nestas condiçöes, pode-se prever que os casos falsos negativos (OPG=0) devem albergar, nos pâncreas, um média de 63,1 parasitos e os casos positivos (OPG>=1) média igual ou superior a 93,2 parasitos

Intensidade de parasitismo por Eurytrema sp em bovinos da mesoregiäo do Sudoeste paulista / Parasite load in Eurytrema sp infected cattle from Southwestern localities of the Sso Paulo

Após exames macroscópicos de 485 pâncreas de bovinos procedentes da mesorregiäo do Sudoeste Paulista, obtiveram-se 41 casos de parasitismo por Eurytrema sp e, a seguir, foram contados os espécimes albergados. Verificou-se que a intensidade de parasitismo é baixa e que a proporçäo de animais infectados, independentemente da carga parasitária, situa-se entre 7,2 por cento e 9,8 por cento

Adaptaçäo da técnica de Dennis, Stone & Swanson para diagnóstico copro-parasitológico de infecçäo natural por Eurytrema sp em bovinos / Adaptation of the Dennis, Stone & Swanson's technique for parasitologic diagnostic of Eurytrema sp infection in cattle

Foram efetuadas contagens de ovos de Eurytrema sp em fezes de bovinos naturalmente infectados e os resultados indicaram que o método de exame copro-parasitológico empregado, independentemente da carga parasitária do hospedeiro, tem 94,2 por cento de probabilidade de diagnosticar casos de infecçäo, quando se efetua um único exame. Ademais, ficou comprovado que o número de ovos de Eurytrema sp por grama de fezes obedece a um modelo de distribuiçäo binominal negativa e se caracteriza pela sua pequena magnitude

Reavaliaçäo da prova do filme como método de diagnóstico presuntivo de infecçäo por Eurytrema sp em bovinos / Revaluation of the film test as a screening test for Eurytrema sp infection in cattle

Amostras fecais de bovinos comprovadamente parasitados e outras de animais possuidores de pâncreas macroscopicamente normais (controle) foram submetidos à prova do filme. Os resultados mostraram que tanto os animais parasitados quanto aqueles do grupo controle comportaram-se de modo semelhante à prova do filme. Com isto, concluiu-se que o referido teste deve ser desconhecido para os fins propostos de diagnóstico presuntivo de infecçöes por Eurytrema sp em bovinos