ABSTRACT
La homeostasis de los tejidos que constituyen a los seres vivos es regulada por los procesos de proliferación y apoptosis celular. El modelo de estrés crónico intermitente por inmovilización durante la gestación puede alterar diversos mecanismos que mantienen la homeostasis del organismo, los cuales son motivo de estudios actuales. En estudios previos se comprobó variaciones significativas en el peso de las glándulas adrenales y en los niveles plasmáticos de PRL, estrógenos y CORT. Bajo la hipótesis que el estrés crónico produce modificaciones en los procesos de proliferación y apoptosis en las glándulas adrenales de ratas gestantes, los objetivos fueron cuantificar las células en proliferación y apoptosis mediante la utilización de técnicas inmunocitoquímicas en la corteza adrenal de ratas en la segunda mitad de la gestación, y comprobar las características ultraestructurales del proceso apoptótico con microscopía electrónica de transmisión. Material y Métodos: En condiciones de bioterio controladas, se estudió la glándula adrenal de ratas de 12, 17 y 21 días de gestación, controles (RC) y experimentales (RE) sometidas a un estrés crónico, intermitente, homotípico e intenso. Se usaron técnicas combinadas de inmunomarcación, análisis estereológico y cuantificación de imágenes de cortes alternados para determinar las variaciones del fenómeno apoptótico y proliferativo que presentan las diferentes poblaciones celulares de la corteza adrenal. El tratamiento estadístico se realizó con los Softwares InfoStat y el SAS 9.1. Se aplicó ANOVA de una y tres vías y la distribución de Poisson de un modelo logarítmico lineal con efecto de grupo, tiempo e interacciones. Las diferencias fueron consideradas significativas si p<0.05. Resultados Apoptosis: a. En Ratas Gestantes Controles y Estresadas: 1. El índice apoptótico disminuyó a medida que progresó la gestación(AU)
SUMMARY: Homeostasis of tissues is regulated by cellular proliferation and apoptosis processes. Intermittent chronic stress by immobilization during gestation may alter several mechanisms that maintain the organism homeostasis. Those mechanisms are object of several studies. Previous studies using the immobilization model have shown significant variations in adrenal glands weight and plasmatic levels of PRL, estrogens and CORT. Under the hypothesis that chronic stress causes changes in proliferation and apoptosis processes in adrenal glands of gestant rats, the main objectives of this study were: 1) to identify and quantify cell nuclei in proliferation and apoptosis using immunocytochemical techniques in adrenal cortex samples of rats in the second half of gestation and, 2) to check the ultraestructural haracteristics of apoptotic process by means of transmission electronic microscopy. Materials and Methods: In controlled lab conditions, the adrenal glands of control (RC) and experimental (RE) rats at 12, 17 and 21 days of gestation were studied. Experimental rats were subject to an intermittent, chronic, homotypic and intense stress in order to avoid habituation. A combination of labeling techniques, stereological analysis and image quantification of alternate sections was used to determine the changes in proliferation and apoptosis in the different cell populations of the adrenal cortex. Statistical analyses were performed with InfoStat and SAS 9.1 softwares. Data was analyzed with one and three-way ANOVAs and, a linear logarithmic model with Poisson distribution including group, time and interactions effects(AU)
Subject(s)
Animals , Rats , Apoptosis/drug effects , Rats/embryology , Cell Proliferation/drug effects , Zona FasciculataABSTRACT
La homeostasis de los tejidos que constituyen a los seres vivos es regulada por los procesos de proliferación y apoptosis celular. El modelo de estrés crónico intermitente por inmovilización durante la gestación puede alterar diversos mecanismos que mantienen la homeostasis del organismo, los cuales son motivo de estudios actuales. En estudios previos se comprobó variaciones significativas en el peso de las glándulas adrenales y en los niveles plasmáticos de PRL, estrógenos y CORT. Bajo la hipótesis que el estrés crónico produce modificaciones en los procesos de proliferación y apoptosis en las glándulas adrenales de ratas gestantes, los objetivos fueron cuantificar las células en proliferación y apoptosis mediante la utilización de técnicas inmunocitoquímicas en la corteza adrenal de ratas en la segunda mitad de la gestación, y comprobar las características ultraestructurales del proceso apoptótico con microscopía electrónica de transmisión. Material y Métodos: En condiciones de bioterio controladas, se estudió la glándula adrenal de ratas de 12, 17 y 21 días de gestación, controles (RC) y experimentales (RE) sometidas a un estrés crónico, intermitente, homotípico e intenso. Se usaron técnicas combinadas de inmunomarcación, análisis estereológico y cuantificación de imágenes de cortes alternados para determinar las variaciones del fenómeno apoptótico y proliferativo que presentan las diferentes poblaciones celulares de la corteza adrenal. El tratamiento estadístico se realizó con los Softwares InfoStat y el SAS 9.1. Se aplicó ANOVA de una y tres vías y la distribución de Poisson de un modelo logarítmico lineal con efecto de grupo, tiempo e interacciones. Las diferencias fueron consideradas significativas si p<0.05. Resultados Apoptosis: a. En Ratas Gestantes Controles y Estresadas: 1. El índice apoptótico disminuyó a medida que progresó la gestación
SUMMARY: Homeostasis of tissues is regulated by cellular proliferation and apoptosis processes. Intermittent chronic stress by immobilization during gestation may alter several mechanisms that maintain the organism homeostasis. Those mechanisms are object of several studies. Previous studies using the immobilization model have shown significant variations in adrenal glands weight and plasmatic levels of PRL, estrogens and CORT. Under the hypothesis that chronic stress causes changes in proliferation and apoptosis processes in adrenal glands of gestant rats, the main objectives of this study were: 1) to identify and quantify cell nuclei in proliferation and apoptosis using immunocytochemical techniques in adrenal cortex samples of rats in the second half of gestation and, 2) to check the ultraestructural haracteristics of apoptotic process by means of transmission electronic microscopy. Materials and Methods: In controlled lab conditions, the adrenal glands of control (RC) and experimental (RE) rats at 12, 17 and 21 days of gestation were studied. Experimental rats were subject to an intermittent, chronic, homotypic and intense stress in order to avoid habituation. A combination of labeling techniques, stereological analysis and image quantification of alternate sections was used to determine the changes in proliferation and apoptosis in the different cell populations of the adrenal cortex. Statistical analyses were performed with InfoStat and SAS 9.1 softwares. Data was analyzed with one and three-way ANOVAs and, a linear logarithmic model with Poisson distribution including group, time and interactions effects
Subject(s)
Animals , Rats , Apoptosis , Cell Proliferation , Rats/embryology , Zona FasciculataABSTRACT
Chronic stress by immobilization during pregnancy may cause alterations in mechanisms maintaining homeostasis in the adrenal gland. The objective of this study was to quantify cellular proliferation index in the adrenal cortex during pregnancy second half and assess the effects of chronic stress on it. Adrenal cortex proliferation index in stressed rats showed a significant decrease at 12 and 17 days of gestation, while at day 21 it did not show differences with the control treatments. Moreover, proliferation index of reticular zones in control and experimental rats, exhibited a significant reduction in comparison to glomerular and fascicular zones of adrenal cortex during the three gestation days studied. In conclusion, chronic stress by immobilization produces a decrease in cellular proliferation index at 12 and 17 gestation days, which may be related to changes in plasmatic concentrations of corticosterone and prolactin and, to the reduction of specific growth factors. Furthermore, the observed proliferation diminishment in reticular zone regarding the other cortical zones would be consistent with the migration theory of adrenal cells.
El estrés crónico por inmovilización durante la gestación puede provocar alteraciones de los mecanismos que mantienen la homeostasis en la glándula adrenal. El objetivo de este trabajo fue cuantificar el índice de proliferación en la corteza adrenal durante la segunda mitad de la gestación y comprobar los efectos que produce el estrés crónico sobre el mismo. El índice de proliferación en la corteza adrenal de ratas estresadas presentó una disminución significativa a los 12 y 17 días de gestación, mientras que en el día 21 no presentó modificaciones con respecto a sus controles. Por otro lado, el índice de proliferación de la zona reticular en ratas controles y experimentales, presentó una disminución significativa con respecto a las zonas glomerular y fascicular de la corteza adrenal en los tres días de la gestación estudiados. Se puede concluir que el estrés crónico por inmovilización produce disminución del índice de proliferación celular a los 12 y 17 días de la gestación que podría estar en relación con las variaciones de las concentraciones plasmáticas de corticosterona, prolactina, y con la disminución de factores de crecimiento específicos. Asimismo, la disminución de la proliferación en la zona reticular en relación con las otras zonas corticales estaría en concordancia con la teoría de la migración celular adrenal.
Subject(s)
Animals , Female , Pregnancy , Rats , Adrenal Cortex/metabolism , Pregnancy, Animal , Cell Proliferation , Stress, Physiological , Immobilization , Immunohistochemistry , Rats, Wistar , Time FactorsABSTRACT
The aim of this work was to determine the chronical stress effects on the encephalic NPY neurons population during the fetal Central nervous system development. Immunocytochemical techniques were used for this purpose: NPY neurons presented a similar morphology during the gestation days studied but their distribution varied in the anterior, medium and posterior brain. Statistical Highly significant differences in number of NPY positive neurons (p<0.01) among anterior, medium and posterior brain of stressed fetus (SF) were determined depending on the gestation period and the brain area. The NPY neurons were increased in ARC (Arcuate Hypothalamic Nucleus), PH (Posterior Hypothalamic Area) and DM (Dorsomedial Hypothalamic Nucleus) in stressed fetuses (SF) of 17 days, and in ARC of 19 days SF (p< 0.01) were detected in the different brain nucleus. The NPY population increased in PnO (Pontine Reticular Nu, Oral Part) and RITg (Reticulotegmental Nu of the Pons) of 17 days SF, while they were detected in posterior brain at Pyx (Pyramidal Decussation), Rob (Raphe Obscurus Nucleus) and RPA (Raphe Pallidus Nucleus) in SF of 19 days. They also increased in number (p<0.05) in DPGI (Dorsal Paragigantocellular Nu), CGPn (Central Gray of Pons) and PrH (Prepositus Hypoglossal Nucleus) of 17 days SF. Finally, any statistical differences were found among CF and SF in the following nuclei: anterior brain, AH (Anterior Hypothalamic Nucleus), DM (Dorsomedia L Hypothalamic Nucleus) of 17 days; ME (Median Eminence)., VMH (Ventromedial Hypothalamic Nucleus) of 19 days; medium brain in CG (Central Periaqueductal Gray), DR (Dorsal Raphe Nucleus) of 17 days and posterior brain in PnC (Pontine Reticular Nu, Caudal Part), PrH (Prepositus Hypoglossal Nucleus), RMgG (Raphe Magnus Nucleus), IO (Inferior Olive) of 17 days. The increase number of NPY neurons found in the stressed rat fetuses in all periods studied would indicate the participation of the NPY System in...
El propósito del presente estudio fue determinar los efectos del estrés crónico en la población de neuronas NPY encefálicas durante el desarrollo del S.N.C. fetal mediante técnicas inmunocitoquímicas. Se demostró que las neuronas NPY presentan un morfología similar en los días de gestación estudiados, pero su distribución varía en el cerebro anterior, medio y posterior. Se comprobaron diferencias altamente significativas entre el cerebro anterior, medio y posterior (p<0,01) de fetos estresados (FE), variando dicha significación dependiendo del día de la gestación y del área estudiada. En los diferentes núcleos cerebrales del cerebro anterior se detectaron aumentos en ARC (Arcuate Hypothalamic Nucleus), PH (Posterior Hypothalamic Area) de 17 días y DM (Dorsomedia L Hypothalamic Nucleus) y en ARC (Arcuate Hypothalamic Nucleus) de 19días (p<0,01) de F.E. En el cerebro medio se detectaron aumentos en DR (Dorsal Raphe Nucleus) (p<0,01) y PN (Pontine Nucleus) (p<0,05) de 19 F.E. En el cerebro posterior se detectaron aumentos en PnO (Pontine Reticular Nu, Oral Part) y RITg (Reticulotegmental Nu of the Pons) de 17 F. E. y Pyx, (Pyramidal Decussation), Rob (Raphe Obscurus Nucleus) y RPA (Raphe Pallidus Nucleus) de 19 F.E. Asimismo se comprobaron aumentos (p<0,05) en DPGI (Dorsal Paragigantocellular Nu.) de 17 F.E, CGPn (Central Gray of Pons) y PrH (Prepositus Hypoglossal Nucleus), de 19 F.E. Finalmente, no se comprobaron diferencias entre F. C. (fetos controles) y F. E. en los siguientes núcleos del cerebro anterior: AH (Anterior Hypothalamic Nucleus), DM (Dorsomedia L Hypothalamic Nucleus), de 17 días; y EM, (Median Eminence), VMH (Ventromedial Hypothalamic Nucleus) de 19 días. En el cerebro medio CG, (Central Periaqueductal Gray), DR (Dorsal Raphe Nucleus) de 17 días. En el cerebro posterior el PnC, (Pontine Reticular Nu, Caudal Part), PrH (Prepositus Hypoglossal Nucleus), RMgG (Raphe Magnus Nucleus), IO (Inferior Olive) de 17 días del cerebro posterior...
Subject(s)
Animals , Female , Pregnancy , Infant, Newborn , Infant , Mice , Neurons/cytology , Neurons , Neurons/physiology , Neurons/chemistry , Neurons/ultrastructure , Stress, Physiological , Maternal Exposure , Rats, Wistar/anatomy & histology , Rats, Wistar/embryology , Central Nervous System/anatomy & histology , Central Nervous System/embryology , Central Nervous System/ultrastructureABSTRACT
Exposure to physical or psychological stress causes brain damage ranging from minimal behavioural alterations to different neurodegeneration degrees implying the overproduction of oxidative-nitrosative compounds, apoptosis and cell proliferation. In the present investigation, we have analysed the effect of the chronic stress by immobilisation applied to pregnant rats over the forebrain development of the embryos. The morphometric analyses showed an accelerated evagination of the telencephalic vesicles in 12 days old fetus from stressed mothers. The forebrain perimeter and the thickness showed significative differences in relation to age-matched controls. This stress effect seemed reversible during subsequent gestational stages. This is the first work showing a transient acceleration in the development induced by the gestational stress. Our model provides a new tool for studying the effect of the stress on the development.
La exposición a diferentes estresantes físicos y/o psicológicos causa daño cerebral, que se manifiesta en alteraciones comportamentales mínimas hasta diferentes grados de neurodegeneración, y que implican la sobreproducción de compuestos nitrosativos-oxidativos, apoptosis y proliferación celular. En el presente trabajo hemos analizado el efecto del estrés crónico por inmovilización, sobre el desarrollo embriológico del cerebro anterior en fetos de ratas preñadas. El análisis morfométrico estereológico demostró que en los fetos de 12 días de gestación de madres estresadas muestran un aumento del tamaño de la vesícula telencefálica. El perímetro y el espesor del cerebro anterior demostraron diferencias significativas en relación a los controles de la misma edad gestacional, pero, no fue así con su forma. Este efecto provocado por el estrés crónico se podría considerar reversible en los estadíos gestacionales subsecuentes. Es el primer trabajo que demuestra una considerable aceleración del desarrollo del sistema nervioso central inducido por el estrés gestacional. Nuestro modelo provee una nueva herramienta para los estudios de los efectos del estrés durante el desarrollo embriológico.