ABSTRACT
La mayoría de los estudios sobre cepas aisladas de pacientes, involucran técnicas de co-cultivo de los linfocitos de los pacientes con líneas celulares alogeneicas permisivas o agentes estimulantes exógenamente agregados. También se ha utilizado IL-2 como estímulo para establecer sistemas in vitro para la replicación de VIH en células normales que imiten el medio en que sucede in vivo la multiplicación viral, pero en general se considera que es díficil lograr la replicación viral en cultivos primarios de leucocitos mononucleares periféricos (LMP) que no reciben estímulos exógenos. Recientemente desarrollamos un sistema de cultivo prolongado que permite la interacción celular de linfocitos y monocitos/macrófagos (M/M) en ausencia de estímulos exógenos. Utilizando este modelo, en este trabajo demostramos replicación de VIH y liberación de partículas infectivas en cultivos prolongados primarios de LMP de pacientes hemofílicos VIH+. La infección de los cultivos con VIH se determinó midiendo la carga viral por RT-PCR y la concentración del antígeno p24 del "core" viral por ELISA; la infección de las distintas células componentes del cultivo se determinó por inmunofluorescencia de las células permeabilizadas teñidas con el anticuerpo monoclonal KC57 marcado con isotiocianato de fluoresceína o bien analizando los cultivos por citometría de flujo... (TRUNCADO)
Subject(s)
Male , Female , Humans , HIV , Viral Load , Flow Cytometry , Cell Communication , Hemophilia A , HIV Infections/therapy , Leukocytes, Mononuclear/cytology , Virus Replication , Cell Culture TechniquesABSTRACT
La mayoría de los estudios sobre cepas aisladas de pacientes, involucran técnicas de co-cultivo de los linfocitos de los pacientes con líneas celulares alogeneicas permisivas o agentes estimulantes exógenamente agregados. También se ha utilizado IL-2 como estímulo para establecer sistemas in vitro para la replicación de VIH en células normales que imiten el medio en que sucede in vivo la multiplicación viral, pero en general se considera que es díficil lograr la replicación viral en cultivos primarios de leucocitos mononucleares periféricos (LMP) que no reciben estímulos exógenos. Recientemente desarrollamos un sistema de cultivo prolongado que permite la interacción celular de linfocitos y monocitos/macrófagos (M/M) en ausencia de estímulos exógenos. Utilizando este modelo, en este trabajo demostramos replicación de VIH y liberación de partículas infectivas en cultivos prolongados primarios de LMP de pacientes hemofílicos VIH+. La infección de los cultivos con VIH se determinó midiendo la carga viral por RT-PCR y la concentración del antígeno p24 del "core" viral por ELISA; la infección de las distintas células componentes del cultivo se determinó por inmunofluorescencia de las células permeabilizadas teñidas con el anticuerpo monoclonal KC57 marcado con isotiocianato de fluoresceína o bien analizando los cultivos por citometría de flujo... (TRUNCADO)(AU)
Subject(s)
Humans , Male , Female , Virus Replication , HIV , Hemophilia A , Leukocytes, Mononuclear/cytology , Cell Culture Techniques , HIV Infections/therapy , Cell Communication , HIV Core Protein p24 , Flow Cytometry , Viral LoadABSTRACT
La caracterización del inmunofenotipo de las células leucémicas es esencial para el diagnóstico de las leucemias agudas. El objetivo del presente trabajo fue analizar el inmunofenotipo de los blastos de pacientes que ingresaron al IIHEMA con el diagnóstico de leucemia aguda en el período 12/94 a 12/96. Para tal fin, estudiamos el patrón inmunofenotípico de 128 casos de leucemia aguda (58 casos de LMA, 27 casos de LLA-B, 7 casos de LLA-T, 16 casos de LLA-My, 3 casos de LMA-Ly, 16 casos de leucemias de linaje mixto y 1 caso de leucemia indiferenciada) utilizando como método la citometría de flujo. Esta técnica es bastante reciente en el país (hay sólo 22 citómetros). El servicio de citometría de flujo del IIHEMA, que comenzó a funcionar en noviembre de 1994, es uno de los centros con mayor experiencia en el diagnóstico oncohematológico, debido al gran número de pacientes referidos. De los 58 casos de LMA, en 13 la expresión del antígeno HLA-DR, resultó negativa... (TRUNCADO)
Subject(s)
Humans , Leukocyte Common Antigens , Flow Cytometry , Heavy Chain Disease , Hematopoiesis , Immunophenotyping , Leukemia, Biphenotypic, Acute/diagnosis , Leukemia, Myeloid, Acute/diagnosis , Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma/classification , Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma/diagnosis , Neprilysin , Receptors, Antigen, T-Cell , Hematopoietic SystemABSTRACT
La caracterización del inmunofenotipo de las células leucémicas es esencial para el diagnóstico de las leucemias agudas. El objetivo del presente trabajo fue analizar el inmunofenotipo de los blastos de pacientes que ingresaron al IIHEMA con el diagnóstico de leucemia aguda en el período 12/94 a 12/96. Para tal fin, estudiamos el patrón inmunofenotípico de 128 casos de leucemia aguda (58 casos de LMA, 27 casos de LLA-B, 7 casos de LLA-T, 16 casos de LLA-My, 3 casos de LMA-Ly, 16 casos de leucemias de linaje mixto y 1 caso de leucemia indiferenciada) utilizando como método la citometría de flujo. Esta técnica es bastante reciente en el país (hay sólo 22 citómetros). El servicio de citometría de flujo del IIHEMA, que comenzó a funcionar en noviembre de 1994, es uno de los centros con mayor experiencia en el diagnóstico oncohematológico, debido al gran número de pacientes referidos. De los 58 casos de LMA, en 13 la expresión del antígeno HLA-DR, resultó negativa... (TRUNCADO)(AU)
