Effects of a selective cyclooxygenase-2 inhibitor on endometrial epithelial cells from patients with endometriosis.

BACKGROUND: Celecoxib, a selective cyclooxygenase (COX)-2 inhibitor, also has anti-proliferative properties and pro-apoptotic effects on different in vivo and in vitro models, two actions that may be efficacious in therapy for endometriosis. We evaluated the effects of celecoxib on apoptosis and proliferation, and vascular endothelial growth factor (VEGF) production and COX-2 expression and activity in endometrial epithelial cells (EECs). METHODS AND RESULTS: Thirty-two endometriosis and 13 control women were included in the study. EECs from eutopic endometrium and control biopsies were cultured with different doses of celecoxib. Celecoxib at 50, 75 and 100 microM (versus vehicle control) inhibited EEC proliferation in cultures from controls (P < 0.05, P < 0.01 and P < 0.01, respectively) and patients with endometriosis (P < 0.05, P < 0.01 and P < 0.01), as assessed by (3)H-thymidine uptake. Celecoxib at 50, 75 and 100 microM induced apoptosis in EEC from controls (P < 0.05, P < 0.001 and P < 0.001) and patients with endometriosis (P < 0.001, P < 0.001 and P < 0.01), as revealed by the Acridine Orange-Ethidium Bromide technique. Western blot analysis showed that celecoxib was effective at increasing COX-2 protein at 100 microM in EEC from endometriosis patients (P < 0.05). In EEC from endometriosis patients, celecoxib at 25, 50 and 100 microM was also effective in reducing COX-2 activity, reflected in the reduction of prostaglandin E(2) (PGE(2)) synthesis (P < 0.001), and VEGF secretion (P < 0.001; P < 0.05 and P < 0.001), assessed by enzyme-linked immunosorbent assay. Exogenous PGE(2) did not reverse celecoxib-induced growth inhibition. CONCLUSIONS: This study suggests a direct effect of celecoxib on reduction of endometrial growth and supports further research on selective COX-2 inhibition as a novel therapeutic modality in endometriosis.

Effect of GnRH analogues on apoptosis and expression of Bcl-2, Bax, Fas and FasL proteins in endometrial epithelial cell cultures from patients with endometriosis and controls.

BACKGROUND: Our purpose was to evaluate the effect of the GnRH agonist (GnRHa), leuprolide acetate (LA), and the GnRH antagonist (GnRHant), Antide, on apoptosis and expression of apoptosis-related proteins in endometrial epithelial cell (EEC) cultures from patients with endometriosis and controls (infertile women without endometriosis). METHODS: Biopsy specimens of eutopic endometrium were obtained from 22 patients with endometriosis and from 14 women that served as controls. Apoptosis was examined in EEC after incubation with LA and Antide. Bax, Bcl-2, Fas and FasL expression was evaluated after exposure to LA, Antide or a combination of both. The percentage of apoptotic cells (%ApC) was assessed by the acridine orange-ethidium bromide technique, and protein expression was evaluated by western blot and immunocytochemistry. RESULTS: LA 100 and 1000 ng/ml increased the %ApC in EEC from patients with endometriosis (both P < 0.05) and controls (p < 0.05 and P < 0.01, respectively). Antide 10(-5) M increased the %ApC in EEC from patients with endometriosis and controls (P < 0.01). In EEC from women with endometriosis, Bax expression increased after treatment with LA, Antide and LA + Antide (P < 0.05, P < 0.001 and P < 0.001), whereas Bcl-2 expression decreased after exposure to LA and Antide (P < 0.001 and P < 0.01). FasL expression increased after LA, Antide and LA + Antide treatments (P < 0.01, P < 0.001 and P < 0.01). No significant changes were observed on Fas expression. CONCLUSIONS: GnRH analogues enhanced apoptosis in EEC, and this was accompanied by an increase in expression of the pro-apoptotic proteins Bax and FasL and a decrease in expression of the anti-apoptotic protein Bcl-2.

Apoptosis and expression of Bcl-2 and Bax in eutopic endometrium from women with endometriosis.

OBJECTIVE: To evaluate and compare spontaneous apoptosis and Bcl-2 and Bax expression in eutopic endometrium from women with and without endometriosis. DESIGN: Apoptosis and Bcl-2 and Bax expression were examined in eutopic endometrium from women with and without endometriosis. SETTING: Instituto de Biología y Medicina Experimental-CONICET, Department of Gynecology and Department of Gynecological Pathology, Clínicas University Hospital, Buenos Aires, Argentina. PATIENT(S): Women with untreated endometriosis (n = 14) and controls (n = 16). INTERVENTION(S): Collection of endometrial samples during diagnostic or therapeutic laparoscopy. MAIN OUTCOME MEASURE(S): Apoptotic cells were detected with use of the dUTP nick-end labeling (TUNEL) assay; Bcl-2 and Bax expressions were assessed with use of immunohistochemical techniques. RESULT(S): Spontaneous apoptosis was significantly lower in eutopic endometrium from patients with endometriosis, compared with healthy controls (2.26 +/- 0.53 and 9.37 +/- 1.69 apoptotic cells/field, respectively) and was independent of cycle phase. An increased expression of Bcl-2 protein was found in proliferative eutopic endometrium from patients with endometriosis. Bax expression was absent in proliferative endometrium, whereas there was an increase in its expression in secretory endometrium from both patients and controls. CONCLUSION(S): Women with endometriosis show decreased number of apoptotic cells in eutopic endometrium. The abnormal survival of endometrial cells may result in their continuing growth into ectopic locations.

Is preoperative selection of patients with cystic adnexal masses essential for laparoscopic treatment?

STUDY OBJECTIVE: To analyze indications for preoperative selection of patients with cystic adnexal masses to be treated by laparoscopic surgery. DESIGN: Retrospective analysis (Canadian Task Force classification II-2). SETTING: University and military hospitals. PATIENTS: Three hundred sixteen women with adnexal masses. INTERVENTION: Before laparoscopy, 214 patients underwent evaluation (size of adnexal mass, ultrasonographic image, CA 125, suspicious clinical diagnosis); in 102 women laparoscopies were performed without taking these factors into account. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: In the first center 99% of women were treated by laparoscopic surgery. One (0.4%) tumor of low malignant potential detected by deferred biopsy was operated on. In the second center 98% of cases were performed laparoscopically. In 3.9% of women carcinomas were detected intraoperatively and were treated by laparotomy (p = 0.04). CONCLUSION: Laparoscopy is appropriate management of cystic adnexal masses, with a very low risk of unintentionally operating an ovarian carcinoma if a thorough preoperative evaluation is conducted. Only in centers where surgeons have enough training to cope with ovarian cancer may this evaluation be deferred, since conversion to laparotomy should be considered a second therapeutic step, and not an incorrect indication for laparoscopy. In centers where surgeons have no such training, strict preoperative selection of patients is mandatory

Apoptosis y expresión de Bcl-2 y Bax en el endometrio eutópico de pacientes con endometriosis / Apoptosis and Bcl-2 and Bax in normal endometrium of patients with endometriosis

El objetivo de este trabajo es investigar una posible predisposición de las células endometriales de pacientes con endometriosis (EDT), a ser resistentes a la muerte celular programada. Se evaluó apoptosis y expresión de las proteínas Bcl-2 y Bax en 30 cortes de tejido de endometrio eutópico, 14 de mujeres con EDT y 16 de controles (C). Para la determinación de apoptosis, se utilizó el kit Apoptag-Plus basado en la localización y tinción de los extremos 3-OH de los fragmentos de ADN. Los resultados se expresan como nº de células apoptóticas (CA)/campo a 630x de aumento. Se detectaron CA sólo en el epitelio glandular. Se observó menor cantidad de CA en tejido endometrial proveniente de pacientes con EDT: 2,26 ñ 0,53 vs 9,37 ñ 1,69 en los C (p<0,001). Esta disminución s

Apoptosis y expresión de Bcl-2 y Bax en el endometrio eutópico de pacientes con endometriosis / Apoptosis and Bcl-2 and Bax in normal endometrium of patients with endometriosis

El objetivo de este trabajo es investigar una posible predisposición de las células endometriales de pacientes con endometriosis (EDT), a ser resistentes a la muerte celular programada. Se evaluó apoptosis y expresión de las proteínas Bcl-2 y Bax en 30 cortes de tejido de endometrio eutópico, 14 de mujeres con EDT y 16 de controles (C). Para la determinación de apoptosis, se utilizó el kit Apoptag-Plus basado en la localización y tinción de los extremos 3'-OH de los fragmentos de ADN. Los resultados se expresan como nº de células apoptóticas (CA)/campo a 630x de aumento. Se detectaron CA sólo en el epitelio glandular. Se observó menor cantidad de CA en tejido endometrial proveniente de pacientes con EDT: 2,26 ñ 0,53 vs 9,37 ñ 1,69 en los C (p<0,001). Esta disminución se conservó a lo largo del ciclo menstrual. En la fase proliferativa tardía, los resultados fueron de: 7,08 ñ 0,92 vs 1,9 ñ 0,73 (p<0,05), para las muestras provenientes de mujeres C y pacientes con EDT respectivamente; mientras que en el endometrio secretorio los niveles de apoptosis detectados fueron de 11,6 ñ 1,74 en los C vs 2,7 ñ 0,82 en EDT (p<0,001). No se observaron diferencias significativas de apoptosis en endometrio de acuerdo al grado de la enfermedad. La evolución de los productos de protooncógenes, bcl-2 y bax se realizó utilizando metodologías de inmunohistoquímica. Se halló incrementada la expresión de la proteína antiapoptótica Bcl-2 en el endometrio proliferativo proveniente de pacientes con EDT comparado con el C. La expresión del antagonista de Bcl-2, Bax, aumentó durante la fase secretoria tanto en muestras provenientes de pacientes como de C, y se halló ausente durante la fase proliferativa. De los resultados se desprende que las células endometriales de pacientes con EDT poseen características apoptóticas alteradas que las harían más susceptibles a crecer en un sitio ectópico. Estas no se ven modificadas a lo largo del ciclo menstrual. La proteína Bcl-2 estaría implicada en la protección de la apoptosis de las células endometriales eutópicas de pacientes con EDT durante la fase proliferativa del ciclo menstrual. La proteína Bax estaría involucrada en la regulación de la muerte celular programada que se produce en el endometrio eutópico previo a la menstruación. La resistencia a la muerte celular programada que posee el endometrio eutópico de pacientes con EDT, estaría relacionada con la etiología y/o fisiopatología de la enfermedad

Rol actual de la laparoscopia ginecológica como método diagnóstico y terapéutico en adolescentes / Actual rol of the gynecologic laparoscopic as diagnostic and therapeutic method in adolescents

Objetivo: evaluar la experiencia de la sección endoscopia y ginecología infanto juvenil en el diagnóstico y tratamiento laparoscópico de las afecciones infanto juveniles. Procedimiento: análisis retrospectivo de las historias clínicas de las pacientes menores de 18 años sometidas a una laparoscopia entre 1987 y 1994. Lugar de realización: Hospital de Clínicas José de San Martín, Servicio de Ginecología, secciones cirugía laparoscópica y ginecología infanto juvenil. Resultados: El 72,5 por ciento de la patología se dividió entre amenorreas 1º y algias pelvianas. El resto se repartió en tumores de ovario 12,5 por ciento, abdomen agudo 7,5 por ciento, amenorreas 2º 5 por ciento, búsqueda de tumor primitivo en un caso 2,5 por ciento. Se efectuó cirugía laparoscópica en el 32,5 por ciento de las

Rol actual de la laparoscopia ginecológica como método diagnóstico y terapéutico en adolescentes / Actual rol of the gynecologic laparoscopic as diagnostic and therapeutic method in adolescents

Objetivo: evaluar la experiencia de la sección endoscopia y ginecología infanto juvenil en el diagnóstico y tratamiento laparoscópico de las afecciones infanto juveniles. Procedimiento: análisis retrospectivo de las historias clínicas de las pacientes menores de 18 años sometidas a una laparoscopia entre 1987 y 1994. Lugar de realización: Hospital de Clínicas José de San Martín, Servicio de Ginecología, secciones cirugía laparoscópica y ginecología infanto juvenil. Resultados: El 72,5 por ciento de la patología se dividió entre amenorreas 1º y algias pelvianas. El resto se repartió en tumores de ovario 12,5 por ciento, abdomen agudo 7,5 por ciento, amenorreas 2º 5 por ciento, búsqueda de tumor primitivo en un caso 2,5 por ciento. Se efectuó cirugía laparoscópica en el 32,5 por ciento de las patologías encontradas. Estas fueron: 4 gonadectomías, 2 tratamientos laparoscópicos de endometriosis, 1 hemihisterectomia en un útero doble, 1 omentectomía y 2 quistectomías. Los 3 abdómenes agudos hallados, también fueron resueltos por esta vía. Conclusión: Consideramos que la laparoscopia cumple actualmente un importante rol en el diagnóstico y tratamiento en la patología infanto juvenil, y que sus indicaciones se han incrementado, y seguirán incrementándose con el perfeccionamiento de esta técnica

Melanoma of the vulva. The experience at Buenos Aires University.

Nine cases of vulvar melanoma were studied: the histologic variants, depth of invasion and prognostic significance of these factors and of node involvement were analyzed. The histologic types were in situ melanoma (one case), superficial spreading melanoma (two cases) and nodular melanoma (six cases). The mean age of the patients was 64.9 years. Eight patients were treated with radical surgery and one with chemotherapy only. We found a good prognosis for in situ melanoma with free margins; a tendency for superficial spreading melanoma to recur, though it has a good prognosis when it does not exceed Clark level II; and an ominous prognosis for nodular melanoma, probably because of its late diagnosis.

Carcinoma de mama estadio III (T3): experiencia de 105 casos / Stage III (T3) carcinoma of the breast: experience of 105 cases

Desde 1953 a 1982 fueron tratados 105 pacientes estadío III de la clasificación internacional clínica (TNM). Se observó una coincidencia entre la edad de nuestras pacientes y un grupo testigo de 1700 carcinomas. Al relacionarse la clínica de los ganglios axilares con la anatomía patológica de los mismos hubo una concordancia entre el 70 y el 100% según el estadío ganglionar. Cuando los ganglios axilares fueron NO-N1a y en los casos N1b el porcentaje de metástasis a distancia fue del 37,7%. Pero cuando se los reclasificó según su anatomía patológica (PN) observamos que en los PNO el % de metástasis a distancia fue del 25%; en los PN1b del 48%. En relación al tiempo de aparición de la metástasis el 45,23% se presentó en un período menor a 1 año y en el 85,7% en los primeros 5 años. La sobrevida sin enfermedad (SSE) con más de 5 años de seguimiento es del 30,58%. El porcentage global fue del 48,23% La sobrevida sin enfermedad (SSE) con más de 10 años de seguimiento fue del 15,62%. Concluimos que: 1) El tamaño tumoral (T3) no descarta la indicación de un tratamiento quirúrgico radical. 2) El pronóstico basado en el tamaño tumoral indica que el compromiso de los ganglios es el factor determinante de la sobrevida y si bien la gran mayoría de las metástasis aparecen dentro de los primeros 5 años 1 de cada 5 lo hace en un período mayor. 3) El tratamiento quirúrgico radical sería indicación de elección de los tumores T3 NO -N1a-b, acompañado de cobaltoterapia post-operatoria más quimioterapia adyuvante. Irradiación integral en los casos T3 N2 y quimioterapia complementaria. La hormonoterapia sería indicación para aquellos tumores con receptores para estrógenos y progesterona (AU)

Carcinoma de mama estadio III (T3): experiencia de 105 casos / Stage III (T3) carcinoma of the breast: experience of 105 cases

Desde 1953 a 1982 fueron tratados 105 pacientes estadío III de la clasificación internacional clínica (TNM). Se observó una coincidencia entre la edad de nuestras pacientes y un grupo testigo de 1700 carcinomas. Al relacionarse la clínica de los ganglios axilares con la anatomía patológica de los mismos hubo una concordancia entre el 70 y el 100% según el estadío ganglionar. Cuando los ganglios axilares fueron NO-N1a y en los casos N1b el porcentaje de metástasis a distancia fue del 37,7%. Pero cuando se los reclasificó según su anatomía patológica (PN) observamos que en los PNO el % de metástasis a distancia fue del 25%; en los PN1b del 48%. En relación al tiempo de aparición de la metástasis el 45,23% se presentó en un período menor a 1 año y en el 85,7% en los primeros 5 años. La sobrevida sin enfermedad (SSE) con más de 5 años de seguimiento es del 30,58%. El porcentage global fue del 48,23% La sobrevida sin enfermedad (SSE) con más de 10 años de seguimiento fue del 15,62%. Concluimos que: 1) El tamaño tumoral (T3) no descarta la indicación de un tratamiento quirúrgico radical. 2) El pronóstico basado en el tamaño tumoral indica que el compromiso de los ganglios es el factor determinante de la sobrevida y si bien la gran mayoría de las metástasis aparecen dentro de los primeros 5 años 1 de cada 5 lo hace en un período mayor. 3) El tratamiento quirúrgico radical sería indicación de elección de los tumores T3 NO -N1a-b, acompañado de cobaltoterapia post-operatoria más quimioterapia adyuvante. Irradiación integral en los casos T3 N2 y quimioterapia complementaria. La hormonoterapia sería indicación para aquellos tumores con receptores para estrógenos y progesterona