Nematostatic activity of isoprenylated guanidine alkaloids from Pterogyne nitens and their interaction with acetylcholinesterase.

Although new nematicides have appeared, the demand for new products less toxic and more efficient for the control of plant-parasitic nematodes are still high. Consequently, studies on natural secondary metabolites from plants, to develop new nematicides, have increased. In this work, nineteen extracts from eleven Brazilian plant species were screened for activity against Meloidogyne incognita. Among them, the extracts of Piterogyne nitens showed a potent nematostatic activity. The alkaloid fraction obtained from the ethanol extract of leaves of P. nitens was more active than the coming extract. Due to the promising activity from the alkaloid fraction, three isoprenylated guanidine alkaloids isolated from this fraction, galegine (1), pterogynidine (2), and pterogynine (3) were tested, showing similar activity to the alkaloid fraction, which was comparable to that of the positive control Temik at 250 µg/mL. At lower concentrations (125-50 µg/mL), compound 2 showed to be the most active one. As several nematicides act through inhibition of acetylcholinesterase (AChE), the guanidine alkaloids were also employed in two in vitro AChE assays. In both cases, compound 2 was more active than compounds 1 and 3. Its activity was considered moderated compared to the control (physostigmine). Compound 2 was selected for an in silico study with the electric eel (Electrophorus electricus) AChE, showing to bind mostly to the same site of physostigmine in the AChEs, pointing out that this could be the mechanism of action for this compound. These results suggested that the guanidine alkaloids 1,2 and 3 from P. nitens are promising for the development of new products to control M. incognita, especially guanidine 2, and encourage new investigations to confirm the mechanism of action, as well as to determine the structure-activity relationship of the guanidine alkaloids.

Alkaloids from stems of Esenbeckia leiocarpa Engl. (Rutaceae) as potential treatment for Alzheimer disease.

Esenbeckia leiocarpa Engl. (Rutaceae), popularly known as guarantã, goiabeira, is a native tree from Brazil. Bioactivity-guided fractionation of the ethanol stems extract afforded the isolation of six alkaloids: leiokinine A, leptomerine, kokusaginine, skimmianine, maculine and flindersiamine. All isolated compounds were tested for acetyl cholinesterase inhibition, in vitro and displayed anticholinesterasic activity. The alkaloid leptomerine showed the highest activity (IC50 = 2.5 mM), similar to that of the reference compound galanthamine (IC50 = 1.7 mM). The results showed for the first time the presence of alkaloids leptomerine and skimmianine in E. leiocarpa (Engl.) with potent anticholinesterasic activity.

Screening for antifungal, DNA-damaging and anticholinesterasic activities of Brazilian plants from the Atlantic Rainforest: Ilha do Cardoso State Park / Avaliação das atividades antifúngica, no reparo do DNA e anticolinesterásica de plantas brasileiras da Mata Atlântica: Parque Estadual da Ilha do Cardoso

Crude extracts from 17 plant species collected from an Atlantic Forest regionin the State of São Paulo (Brazil) have been screened for antifungal, DNA-damaging and acetylcholinesterase inhibiting activities. Of the 34 extracts obtained from leaves and stems ofplants assayed for antifungal activity with Cladosporium sphaerospermum and C. cladosporioides 26.5% were active. However, only the extract of leaves of Cabralea canjerana showed a stronginhibition of both fungi. The DNA-damaging assay with mutant strains of Saccharomyces cerevisiae resulted in 11.7 % of the extracts being active whereas 100% of them showedselectivity for the DNA-repair mechanism of topoisomerase II. Of the 17 species analysed, 12 showed anticholinesterasic activity in TLC assay. However, only extracts from Tetrastylidium grandifolium (stems) and Sloanea guianensis (leaves and stems) inhibited acetylcholinesterase activity more than 50% in quantitative assay.

Extratos brutos de 17 espécies de plantas coletadas em região de Mata Atlântica no Estado de São Paulo (Brasil)foram avaliadas para as atividades: antifúngica, no reparo do DNA e inibição da acetilcolinesterase. Dos 34 extratos obtidos de folhas e galhos das plantas analisadas para a atividade antifúngicacom Cladosporium sphaerospermum e C. cladosporioides, 26,5% foram ativos. Todavia, apenas o extrato das folhas de Cabralea canjerana inibiu fortemente o crescimento dos dois fungos. No ensaio de reparo do DNA com linhagens mutantes de Saccharomyces cerevisiae, 11,7% dos extratos foram ativos, sendo que, 100% destes foram seletivos para o mecanismo de reparo do DNA envolvendo topoisomerase II. Das 17 espécies analisadas, 12 demonstraram atividade anticolinesterásica no ensaio qualitativo sobre cromatografi a de camada delgada (CCD). No entanto, apenas os extratos de Tetrastylidium grandifolium (galhos) e Sloanea guianensis (folhas e galhos) apresentaram atividade anticolinesterásica maior que 50% no ensaio quantitativo.

Ação de alcalóides da Acosmium subelegans (Mohlenbr) Yakovlev no influxo e na mobilização de íons de Ca2+ em culturas primárias de músculos esqueléticos e cardíaco / Action of alkaloids of Acosmium subelegans (Mohlenbr) Yakovlev in Ca2+ influx and mobilization in primary cultures of skeletal and cardiac muscles

A Acosmium subelegans (MohlenbrJ Yakovlev, conhecida popularmente como perobinha do campo, é utilizada na medicina popular principalmente como antiespasmódica, sedativa febrífuga na epilepsia, nos acessos da asma e não coqueluche. Esta espécie foi considerada prioritária no 1° Projeto de Plantas Medicinais (CEME-MS) na busca de medicamentos autóctones a partir de produtos naturais de uso popular. Estudos anteriores de nosso laboratório mostraram que o extrato aquoso (EA) e a fração alcaloídica (FALK) da A. subelegans potenciam a contração dos músculo diafragma estimulado diretamente na presença de d-tubocurarina. Na dependência da concentração do extrato ou da fração, e do tempo de incubação, a i potenciação foi seguida de inibição das contrações. As frações semi-purificadas da FALK, F-1, F-3 e F-5 mantiveram a atividade potenciadora das contrações no músculo esquelético (Cardoso 1998). Estes resultados sugeriram uma provável interferência do EA e frações da A. subelegans na homeostasia intracelular de cálcio. Esta tese teve por objetivo aprofundar os estudos dos mecanismos de ação das frações semi-purificadas e das substâncias isoladas da A. subelegans no influxo e na mobilização de cálcio em culturas de músculos esquelético e cardíaco. Os resultados obtidos são apresentados a seguir: 1. A FALK da A. subelegans apresentou atividade inotrópica positiva e/ou negativa em átrio esquerdo de rato estimulado eletricamente. Concentrações menres de FALK(30 e 100 g/mL) aumentaram a concentração atrial basal. Este efeito inotrópico positivo não foi bloqueado por propanolol. Já, concentrações maiores de FALK (300 e 600 g/mL) diminuíram as concentrações e induziram falhas na concentração atrial. Estes resultados descartaram a participação dos receptores -adrenérgicos no efeito inotrópico positivo da fração e indicaram uma possível ação intracelular dos alcalóides. 2. A FALK(30 a 300 g/mL) prolongou de forma concentração- e tempo- dependente o período refratária efetivo atrial (PRE). 3. A FALK foi purificada em CLEAR, originando 5 frações semi-purificadas identificadas de F-1 a F-5...