ABSTRACT
ABSTRACT: Cockroach control is performed by the application of chemical insecticides which exert high selective pressure on populations and introduces synthetic substances in the environment, motivating the search for other methods of control such as entomopathogenic fungi. The objectives of this study were to investigate the pathogenicity of the JAB 42 Aspergillus westerdijkiae to females and oothecae of Periplaneta americana and to demonstrate its mechanism of action on oothecae. Suspensions containing 106 to 108 conidia/ml were used to infect females and oothecae. Mortality and other variables such as scanning electron microscopy were used to demonstrate the mechanism of action of the fungus. The isolated JAB 42 A. westerdijkiae is pathogenic to oothecae of P. americana, with low capacity to kill females. Adhesion, germination, penetration and extrusion of the fungus on the cockroach oothecae were observed.
RESUMO: O controle de baratas realizado através da aplicação de inseticidas químicos exerce alta pressão seletiva sobre as populações e introduz substâncias sintéticas no ambiente, motivando a procura por outros métodos de controle, como os fungos entomopatogênicos. Os objetivos deste trabalho foram investigar a patogenicidade do isolado JAB 42 de Aspergillus westerdijkiae a fêmeas e ootecas de Periplaneta americana e demonstrar o mecanismo de ação sobre ootecas. Suspensões contendo 106 a 108 conídios/mL do isolado foram usadas para infectar fêmeas e ootecas. A ação do fungo foi analisada pela mortalidade e outras variáveis, e por microscopia eletrônica de varredura. O isolado JAB 42 de A. westerdijkiae é patogênico a ootecas de P. americana, tendo baixa capacidade de matar fêmeas. Foi observada a adesão, germinação, penetração e extrusão do fungo sobre ootecas da barata.
ABSTRACT
ABSTRACT: Cockroach control is performed by the application of chemical insecticides which exert high selective pressure on populations and introduces synthetic substances in the environment, motivating the search for other methods of control such as entomopathogenic fungi. The objectives of this study were to investigate the pathogenicity of the JAB 42 Aspergillus westerdijkiae to females and oothecae of Periplaneta americana and to demonstrate its mechanism of action on oothecae. Suspensions containing 106 to 108 conidia/ml were used to infect females and oothecae. Mortality and other variables such as scanning electron microscopy were used to demonstrate the mechanism of action of the fungus. The isolated JAB 42 A. westerdijkiae is pathogenic to oothecae of P. americana, with low capacity to kill females. Adhesion, germination, penetration and extrusion of the fungus on the cockroach oothecae were observed.
RESUMO: O controle de baratas realizado através da aplicação de inseticidas químicos exerce alta pressão seletiva sobre as populações e introduz substâncias sintéticas no ambiente, motivando a procura por outros métodos de controle, como os fungos entomopatogênicos. Os objetivos deste trabalho foram investigar a patogenicidade do isolado JAB 42 de Aspergillus westerdijkiae a fêmeas e ootecas de Periplaneta americana e demonstrar o mecanismo de ação sobre ootecas. Suspensões contendo 106 a 108 conídios/mL do isolado foram usadas para infectar fêmeas e ootecas. A ação do fungo foi analisada pela mortalidade e outras variáveis, e por microscopia eletrônica de varredura. O isolado JAB 42 de A. westerdijkiae é patogênico a ootecas de P. americana, tendo baixa capacidade de matar fêmeas. Foi observada a adesão, germinação, penetração e extrusão do fungo sobre ootecas da barata.
ABSTRACT
Bipolaris euphorbiae Muchovej & Carvalho is considered a potential bioagent for control of selvage peanuts (Euphorbia heterophylla L.) on soybean crops in Brazil. However, little is known about the nutritional characteristics of this fungus. The main objective of this research was to evaluate different sources of carbon (glucose, starch, sucrose, lactose and maltose), of nitrogen (sodium nitrate, ammonium nitrate, ammonium sulphate, bi-basic ammonium phosphate, ammonium chloride), of phosphorus (monobasic potassium phosphate, bi-basic potassium phosphate, calcium phosphate, sodium phosphate, phosphoric acid, ammonium phosphate) and addition of organic sources of macro and micronutrients as supplement in the culture medium for the growth and sporulation of B. euphorbiae. Starch was the carbon source that promoted the greater fungus growth and was considered the most favorable to sporulation. The nitrogen source sodium nitrate and the phosphorus source monobasic potassium phosphate and calcium phosphate provided the best growth and sporulation of B. euphorbiae, but the others phosphorus source analyzed, except phosphoric acid, favored the fungus sporulation. The supplementation of the culture medium with peptone and yeast extract promoted a better growth and sporulation of the fungus and the addition of vitamins favored the production of conidia.
Apesar de ser considerado um potencial bioagente de controle do amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla L.) em cultivos de soja no Brasil, pouco se conhece sobre as características nutricionais do fungo Bipolaris euphorbiae Muchovej & Carvalho. O objetivo deste trabalho foi avaliar diferentes fontes de carbono (glicose, amido, sacarose, lactose e maltose), de nitrogênio (nitrato de sódio, nitrato de amônio, sulfato de amônio, fosfato de amônio dibásico, cloreto de amônio), de fósforo (fosfato de potássio monobásico, fosfato de potássio bibásico, fosfato de cálcio, fosfato de sódio, ácido fosfórico, fosfato de amônio) e a suplementação do meio de cultivo com fontes orgânicas de macro e micronutrientes, para o crescimento e a esporulação de B. euphorbiae. O amido proporcionou o maior crescimento, sendo também considerada a fonte de carbono mais favorável para a esporulação. O melhor crescimento e esporulação de B. euphorbiae foram obtidos usando o nitrato de sódio como fonte de nitrogênio e fosfato de potássio monobásico e fosfato de cálcio como fonte de fósforo, embora as demais fontes de fósforo analisadas, exceto o ácido fosfórico, tenham igualmente favorecido a esporulação. A suplementação do meio de cultivo com peptona e extrato de levedura resultou em melhor crescimento e esporulação do fungo e a adição de vitaminas favoreceu a produção de conídios.
ABSTRACT
Bipolaris euphorbiae Muchovej & Carvalho is considered a potential bioagent for control of selvage peanuts (Euphorbia heterophylla L.) on soybean crops in Brazil. However, little is known about the nutritional characteristics of this fungus. The main objective of this research was to evaluate different sources of carbon (glucose, starch, sucrose, lactose and maltose), of nitrogen (sodium nitrate, ammonium nitrate, ammonium sulphate, bi-basic ammonium phosphate, ammonium chloride), of phosphorus (monobasic potassium phosphate, bi-basic potassium phosphate, calcium phosphate, sodium phosphate, phosphoric acid, ammonium phosphate) and addition of organic sources of macro and micronutrients as supplement in the culture medium for the growth and sporulation of B. euphorbiae. Starch was the carbon source that promoted the greater fungus growth and was considered the most favorable to sporulation. The nitrogen source sodium nitrate and the phosphorus source monobasic potassium phosphate and calcium phosphate provided the best growth and sporulation of B. euphorbiae, but the others phosphorus source analyzed, except phosphoric acid, favored the fungus sporulation. The supplementation of the culture medium with peptone and yeast extract promoted a better growth and sporulation of the fungus and the addition of vitamins favored the production of conidia.
Apesar de ser considerado um potencial bioagente de controle do amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla L.) em cultivos de soja no Brasil, pouco se conhece sobre as características nutricionais do fungo Bipolaris euphorbiae Muchovej & Carvalho. O objetivo deste trabalho foi avaliar diferentes fontes de carbono (glicose, amido, sacarose, lactose e maltose), de nitrogênio (nitrato de sódio, nitrato de amônio, sulfato de amônio, fosfato de amônio dibásico, cloreto de amônio), de fósforo (fosfato de potássio monobásico, fosfato de potássio bibásico, fosfato de cálcio, fosfato de sódio, ácido fosfórico, fosfato de amônio) e a suplementação do meio de cultivo com fontes orgânicas de macro e micronutrientes, para o crescimento e a esporulação de B. euphorbiae. O amido proporcionou o maior crescimento, sendo também considerada a fonte de carbono mais favorável para a esporulação. O melhor crescimento e esporulação de B. euphorbiae foram obtidos usando o nitrato de sódio como fonte de nitrogênio e fosfato de potássio monobásico e fosfato de cálcio como fonte de fósforo, embora as demais fontes de fósforo analisadas, exceto o ácido fosfórico, tenham igualmente favorecido a esporulação. A suplementação do meio de cultivo com peptona e extrato de levedura resultou em melhor crescimento e esporulação do fungo e a adição de vitaminas favoreceu a produção de conídios.
ABSTRACT
This work aimed at investigatimg whether the culture medium used in viability tests affects the conidial germination of Lecanicillium lecanii, Beauveria bassiana and Paecilomyces fumosoroseus isolates. The tests were performed on microscope slides containing one of the culture media: agar-water (AW), minimal medium (MM), potato-dextrose agar (PDA), potato-dextrose-1% yeast extract agar (PDAY), Sabouraud-dextrose-yeast extract agar (SDAY), and complete medium (CM). Three areas per slide were delimited and 0.05ml of a 5.5 x 105 conidia ml-1 suspension was applied to each area. One bioassay was performed for each isolate. Germination was determined after 15 hours of incubation at 26±0.5°C. The culture media influenced the germination of the species studied, verifying within and inter specific variations. CM and PDA provided the highest germination of L. lecanii isolates and the lowest was obtained on SDAY and AW. The germination of B. bassiana isolates was favoured by CM, PDA and PDAY media, a fact not observed in AW and MM. P. fumosoroseus isolates showed the highest germination on CM and PDA media and the lowest on SDAY. However, some isolates presented high germination on nutrient-poor media (AW and MM).
O presente trabalho objetivou investigar se meios de cultura utilizados em teste de viabilidade afetam a germinação de conídios de cinco isolados de Lecanicillium lecanii, cinco de Beauveria bassiana e quatro de Paecilomyces fumosoroseus. Os testes foram realizados em lâminas de microscopia contendo um dos seguintes meios de cultura: Ágar-água (AA), Meio Mínimo (MM), Batata, dextrose e ágar (BDA), Batata, dextrose, ágar e 1% de extrato de levedura (BDAL), Sabouraud, dextrose, ágar e extrato de levedura (SDAL) e Meio Completo (MC). Delimitaram-se três áreas por lâmina e em cada uma aplicou-se 0,05mL de uma suspensão com concentração de 5,5 x 105 conídios ml-1. Para cada isolado foi realizado um bioensaio, com seis tratamentos e cinco repetições. Avaliou-se a germinação 15 horas após incubação, a 26±0,5ºC. Os meios de cultura influíram na capacidade de germinação das três espécies estudadas, ocorrendo variações inter e intraespecíficas. Verificou-se que os meios Completo e BDA proporcionaram as maiores porcentagens de germinação dos isolados de L. lecanii, sendo que e as menores foram obtidas nos meios SDAL e AA. Os meios ricos em nutrientes (BDA, BDAL e Completo) favoreceram a germinação dos isolados de B. bassiana, o que não ocorreu com os meios pobres (AA e MM). Nos meios Completo e BDA foram obtidas as maiores porcentagens de germinação dos isolados de P. fumosoroseus. As menores percentagens, por sua vez, foram obtidas no meio SDAL. Entretanto, alguns isolados apresentaram alta germinação em meios pobres em nutrientes (AA e MM).
ABSTRACT
This work aimed at investigatimg whether the culture medium used in viability tests affects the conidial germination of Lecanicillium lecanii, Beauveria bassiana and Paecilomyces fumosoroseus isolates. The tests were performed on microscope slides containing one of the culture media: agar-water (AW), minimal medium (MM), potato-dextrose agar (PDA), potato-dextrose-1% yeast extract agar (PDAY), Sabouraud-dextrose-yeast extract agar (SDAY), and complete medium (CM). Three areas per slide were delimited and 0.05ml of a 5.5 x 105 conidia ml-1 suspension was applied to each area. One bioassay was performed for each isolate. Germination was determined after 15 hours of incubation at 26±0.5°C. The culture media influenced the germination of the species studied, verifying within and inter specific variations. CM and PDA provided the highest germination of L. lecanii isolates and the lowest was obtained on SDAY and AW. The germination of B. bassiana isolates was favoured by CM, PDA and PDAY media, a fact not observed in AW and MM. P. fumosoroseus isolates showed the highest germination on CM and PDA media and the lowest on SDAY. However, some isolates presented high germination on nutrient-poor media (AW and MM).
O presente trabalho objetivou investigar se meios de cultura utilizados em teste de viabilidade afetam a germinação de conídios de cinco isolados de Lecanicillium lecanii, cinco de Beauveria bassiana e quatro de Paecilomyces fumosoroseus. Os testes foram realizados em lâminas de microscopia contendo um dos seguintes meios de cultura: Ágar-água (AA), Meio Mínimo (MM), Batata, dextrose e ágar (BDA), Batata, dextrose, ágar e 1% de extrato de levedura (BDAL), Sabouraud, dextrose, ágar e extrato de levedura (SDAL) e Meio Completo (MC). Delimitaram-se três áreas por lâmina e em cada uma aplicou-se 0,05mL de uma suspensão com concentração de 5,5 x 105 conídios ml-1. Para cada isolado foi realizado um bioensaio, com seis tratamentos e cinco repetições. Avaliou-se a germinação 15 horas após incubação, a 26±0,5ºC. Os meios de cultura influíram na capacidade de germinação das três espécies estudadas, ocorrendo variações inter e intraespecíficas. Verificou-se que os meios Completo e BDA proporcionaram as maiores porcentagens de germinação dos isolados de L. lecanii, sendo que e as menores foram obtidas nos meios SDAL e AA. Os meios ricos em nutrientes (BDA, BDAL e Completo) favoreceram a germinação dos isolados de B. bassiana, o que não ocorreu com os meios pobres (AA e MM). Nos meios Completo e BDA foram obtidas as maiores porcentagens de germinação dos isolados de P. fumosoroseus. As menores percentagens, por sua vez, foram obtidas no meio SDAL. Entretanto, alguns isolados apresentaram alta germinação em meios pobres em nutrientes (AA e MM).
ABSTRACT
The present work aimed to verify the penetration pattern of the Metarhizium anisopliae fungus into Rhipicephalus sanguineus tick eggs, as well as the lesions occurred inside the egg. The fungus adherence and penetration were studied by scanning electron microscopy and the action of fungus in the internal tissues was evaluated through conventional histological sessions. For the observation of these events, experimental infections were performed in 11 groups of R. sanguineus eggs containing 25 mg each. The eggs were bathed during 3 minutes under manual shaking in a 10(8) conidia/mL suspension. The bath was performed only in the suspension vehicle for the control groups. The eggs were processed for histopathological analysis and scanning electron microscopy at the following times after infection: 1 and 18h and one, two, three, four, five, six, seven, nine and eleven days. Relevant conidial germination was observed in 67% of eggs 18h after inoculation and fungus penetrated in 92.6% of eggs 5 days after the infection. The pathogen extrusion occurred in 87% of eggs 7 days after infection, reaching 100% at the 9th day. In the histopathological analysis, no lesions worthy of record was observed, however, it should be emphasized that significant reduction (53.9%) of hatching from infected eggs was observed.
O presente trabalho teve como objetivo verificar a forma de penetração do fungo Metarhizium anisopliae em ovos do carrapato Rhipicephalus sanguineus, assim como as lesões infringidas no interior do ovo. A aderência e penetração do fungo foram estudadas por meio da microscopia eletrônica de varredura e a ação do fungo nos tecidos internos avaliada em secções histológicas convencionais. Para observação destes eventos, realizaram-se infecções experimentais em 11 grupos de ovos do R. sanguineus contendo 25 mg cada. Os ovos foram banhados durante 3 minutos, sob agitação manual, em suspensão com concentração de 10(8) conídios/mL. Nos grupos controle o banho foi realizado apenas no veículo da suspensão. Os ovos foram processados para análise histopatológica e microscopia eletrônica de varredura nos seguintes tempos após a infecção: 1 e 18h, e um, dois, três, quatro, cinco, seis, sete, nove e onze dias. Observou-se grande germinação de conídios em 67% dos ovos 18h após a inoculação e o fungo penetrou em 92,6% dos ovos 5 dias após a infecção. A extrusão do patógeno ocorreu em 87% dos ovos 7 dias após a infecção, chegando a 100% no 9º dia. Nas análises histopatológicas não foram observadas lesões dignas de nota, porem deve-se ressaltar que houve significativa redução (53,9%) na eclosão a partir dos ovos infectados.
ABSTRACT
The aim of the present study was to determine the action of isolates JAB 07, CB 7 and AM 9 of the fungus Beauveria bassiana on eggs, larvae and engorged nymphs of Rhipicephalus sanguineus tick. A concentration of 109 conidia mL-1 was standardized for each isolate and suspensions containing 10(8) and 10(7) conidia mL-1 were obtained by serial dilution. A bioassay was prepared for each phase of the life cycle of the tick. Each assay comprised 10 treatment groups, consisting of one fungal isolate and one conidial concentration, and one control group containing only the vehicle of suspensions. For the eggs infection 0.1g (about 270 eggs) were placed at 1ml of suspension at different concentrations, each engorged larvae group (n=250) and engorged nymphs (n=50) received 2ml of one conidial suspension. Thereafter, eggs, larvae and nymphs were placed in on incubator at 27 ± 1°C and at a humidity above 80%. The fungal isolates applied at different spore concentrations caused a reduction in percent hatching of larvae derived from infected eggs (0.7 to 12.1% of hatching) and in percent ecdysis of larvae (4.7 to 33.7% of ecdysis) and nymphs (0 to 16.7% of ecdysis). No difference in the infection of eggs was observed between isolates (P>0.05), but the application of 109 conidia/ml of JAB 07 and AM 9 significantly reduced the hatching of larvae compared to the concentrations of 10(7) conidia mL-1. The isolate CB 7 was more efficient in reducing the number of larval ecdysis. The isolates and concentrations tested didnt differ (P>0.05) in their ability to reduce percent ecdysis of nymphs, but an intense pathogenic activity of the fungus was observed.
O presente trabalho objetivou avaliar a ação dos isolados JAB 07, CB 7 e AM 9 do fungo Beauveria bassiana para ovos, larvas e ninfas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus. Padronizou-se a concentração de 109 conídios mL-1 para cada isolado e por meio de diluições seriadas, obtiveram-se as suspensões com concentrações de 10(8) e 10(7)con. mL-1. Preparou-se um bioensaio para cada fase do ciclo de vida do carrapato. Cada ensaio foi composto por 10 grupos tratamentos, formados por um isolado do fungo e uma concentração de conídios, e um grupo controle contendo apenas o veículo das suspensões. Os isolados do fungo, aplicados nas diferentes concentrações de esporos, causaram redução no percentual de eclosão de larvas oriundas de ovos infectados (0,7 a 12,1% de eclosão) e no percentual de ecdise de larvas (4,7 a 33,7% de ecdise) e ninfas (0 a 16,7% de ecdise). Não houve diferença entre os isolados (P>0,05) quanto à infecção de ovos, mas a aplicação de 109 con./mL de JAB 07 e AM 9 promoveu redução significativa da eclosão de larvas, em relação à concentração de 10(7)con. mL-1. O isolado CB 7 foi o mais eficaz na redução do número de ecdises de larvas. Os isolados e as concentrações de conídios não diferiram (P>0,05) quanto à capacidade de redução do percentual de ecdise de ninfas, mas evidenciou-se intensa atividade patogênica do fungo.
ABSTRACT
The aim of the present study was to determine the action of isolates JAB 07, CB 7 and AM 9 of the fungus Beauveria bassiana on eggs, larvae and engorged nymphs of Rhipicephalus sanguineus tick. A concentration of 109 conidia mL-1 was standardized for each isolate and suspensions containing 10(8) and 10(7) conidia mL-1 were obtained by serial dilution. A bioassay was prepared for each phase of the life cycle of the tick. Each assay comprised 10 treatment groups, consisting of one fungal isolate and one conidial concentration, and one control group containing only the vehicle of suspensions. For the eggs infection 0.1g (about 270 eggs) were placed at 1ml of suspension at different concentrations, each engorged larvae group (n=250) and engorged nymphs (n=50) received 2ml of one conidial suspension. Thereafter, eggs, larvae and nymphs were placed in on incubator at 27 ± 1°C and at a humidity above 80%. The fungal isolates applied at different spore concentrations caused a reduction in percent hatching of larvae derived from infected eggs (0.7 to 12.1% of hatching) and in percent ecdysis of larvae (4.7 to 33.7% of ecdysis) and nymphs (0 to 16.7% of ecdysis). No difference in the infection of eggs was observed between isolates (P>0.05), but the application of 109 conidia/ml of JAB 07 and AM 9 significantly reduced the hatching of larvae compared to the concentrations of 10(7) conidia mL-1. The isolate CB 7 was more efficient in reducing the number of larval ecdysis. The isolates and concentrations tested didnt differ (P>0.05) in their ability to reduce percent ecdysis of nymphs, but an intense pathogenic activity of the fungus was observed.
O presente trabalho objetivou avaliar a ação dos isolados JAB 07, CB 7 e AM 9 do fungo Beauveria bassiana para ovos, larvas e ninfas ingurgitadas de Rhipicephalus sanguineus. Padronizou-se a concentração de 109 conídios mL-1 para cada isolado e por meio de diluições seriadas, obtiveram-se as suspensões com concentrações de 10(8) e 10(7)con. mL-1. Preparou-se um bioensaio para cada fase do ciclo de vida do carrapato. Cada ensaio foi composto por 10 grupos tratamentos, formados por um isolado do fungo e uma concentração de conídios, e um grupo controle contendo apenas o veículo das suspensões. Os isolados do fungo, aplicados nas diferentes concentrações de esporos, causaram redução no percentual de eclosão de larvas oriundas de ovos infectados (0,7 a 12,1% de eclosão) e no percentual de ecdise de larvas (4,7 a 33,7% de ecdise) e ninfas (0 a 16,7% de ecdise). Não houve diferença entre os isolados (P>0,05) quanto à infecção de ovos, mas a aplicação de 109 con./mL de JAB 07 e AM 9 promoveu redução significativa da eclosão de larvas, em relação à concentração de 10(7)con. mL-1. O isolado CB 7 foi o mais eficaz na redução do número de ecdises de larvas. Os isolados e as concentrações de conídios não diferiram (P>0,05) quanto à capacidade de redução do percentual de ecdise de ninfas, mas evidenciou-se intensa atividade patogênica do fungo.
ABSTRACT
The aim of this work was to investigate the effect of different soil types and compactness on Metarhizium anisopliae survival. The fungus survivorship was determined in four soil types: Red Latosol with clay texture, Red Latosol with medium texture, Red Yellow Podzolic with medium sand texture and Red Yellow Podzolic with sand-clay texture, with higher amount of organic material. To determine the effect of compactness on fungus survival the first three soil types were used with the following densities, respectively: 1.12, 1.32, 1.50g cm-3; 1.22, 1.44, 1.65g cm-3; 1.30, 1.50, 1.70g cm-3. The fungus survivorship was evaluated at zero, 20, 40, 60, 80, 100, 120 days of incubation at 27 ± 1ºC, through colony forming units (CFU), in Petri dishes. There was significant effect of the soil type and compactness on the survival of the fungus. Survival was greater in the soil with sand-clay texture and high number of CFU was observed in sandy soil compared with medium texture and clay soil. A significant effect of compactness was verified for the soil type, but not for the medium sand texture soil. Despite the soil type, the fungus survivorship was greater when the soil compactness was at the medium density values. The effect of compactness was most effective in the medium texture soil, in which the fungus survival was lower in all densities.
Este trabalho objetivou investigar a influência do tipo e compactação do solo na sobrevivência do fungo Metarhizium anisopliae. A sobrevivência do fungo foi determinada em quatro tipos de solos: Latossolo Vermelho textura argilosa, Latossolo Vermelho textura média, Argissolo Vermelho Amarelo textura arenosa média e Argissolo Vermelho Amarelo textura areno-argilosa, com maior teor de matéria orgânica. Para determinar o efeito da compactação na sobrevivência do fungo usaram-se os três primeiros tipos de solos nas densidades de 1,12, 1,32, 1,50g cm-3; 1,22, 1,44, 1,65g cm-3; 1,30, 1,50, 1,70g cm-3, respectivamente. Por meio da contagem de unidades formadoras de colônias (UFC) em placas de Petri, fizeram-se avaliações da sobrevivência do fungo, após zero, 20, 40, 60, 80, 100 e 120 dias de incubação a 27 ± 1ºC. Houve influência significativa do tipo de solo e do grau de compactação na sobrevivência do fungo, obtendo-se maior quantidade de UFC no solo textura areno-argilosa. Entre os demais solos, a maior sobrevivência ocorreu no solo textura arenosa e a menor no solo textura argilosa. O efeito da compactação foi significativo para o tipo de solo, exceto no solo textura arenosa. Independentemente do tipo de solo, a maior sobrevivência foi observada nos valores médios de densidade. A compactação teve maior impacto no solo textura média, onde ocorreu queda mais acentuada na quantidade de UFC em todas as densidades.
ABSTRACT
The association of vegetable extracts with entomopathogenic fungi can increase the efficiency of biological control of pests, to reduce costs and environmental impacts. The present work aimed to evaluate, through minimal inibitory concentration, the effect of the neem oil (NIM-I-GO) on the growth, esporulation and viability of Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana and Paecilomyces farinosus. For this purpose the PDA medium was used containing different concentrations of neem oil (C1: 5% of neem oil, and successively concentrations ½ of the previous concentration, until the concentration C11:0,0048% of neen oil). The neen oil reduced the growth of B. bassiana and P. farinosus, which didnt differ significantly of the control at the concentration C11. Similar effect was observed for M. anisopliae with 0,039% of neem oil (C8). The esporulation was also significantly reduced by the neem oil, except at the concentration C11 for B. bassiana; however, no oil effect was observed on the viability of the fungi spores.
A associação de extratos de origem vegetal com fungos entomopatogênicos pode aumentar a eficiência do controle biológico de pragas, reduzir custos e impactos ambientais. No presente trabalho, avaliou-se, através da concentração inibitória mínima, o efeito do óleo de nim (NIM-I-GO) sobre o crescimento, esporulação e viabilidade de Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana e Paecilomyces farinosus. Utilizou-se o meio BDA, contendo diferentes concentrações de óleo de nim (C1: 5% de óleo de nim, e sucessivamente concentrações iguais a ½ da concentração anterior, até C11: 0,0048% de óleo de nim). O óleo de nim reduziu o crescimento de colônias de B. bassiana e P. farinosus, que não diferiram significativamente do controle apenas na concentração C11, mas para M. anisopliae o mesmo efeito foi observado com 0,039% de óleo de nim (C8). A esporulação também foi significativamente reduzida pelo óleo de nim, exceto na concentração C11 para B. bassiana; contudo, não se verificou efeito do óleo na viabilidade de esporos dos fungos.
ABSTRACT
The objective of this work was to verify the penetration of the fungus Metarhizium anisopliae [METSCH. (SOROKIN, 1883)], in to the Rhipicephalus sanguineus ticks (LATREILLE, 1806), as well as the lesions caused in the tissues of the acarus. The form of adherence and penetration of the fungus in the deep tissue was studied through scanning microscopy and the fungus action on the internal tissues was evaluated in conventional hystological sections. In order to evaluate these events, experimental infestations were conducted in 11 engorged females groups of the tick R. sanguineus, containing 12 engorged females in each. Aiming this goal the engorged females were submited to a bath in a conidial suspension in a concentration of 108 conidia/mL during three minutes under manual agitation. In case of control groups the bath was done only in the suspension vehicle. Ticks were processed for histological and scanning microscopy surveys at different intervals after the infection: 1 and 18h and one, two, three, four, five, six, seven, eight, nine and eleven days. It has been observed that the major part of the conidians have germinated within 18h after the inoculation and that the fungus the penetrated the acarus body, trough it´s tegument 48h after the infection. After the penetration the fungus colonized the ticks body in a diffuse manner, without any preference for a specific tissue. Among the lesions caused by the fungus, rupture of the ticks intestinal wall and the dispersion of the fluid into the hemocel were the most outstanding features. Death of the host occurred 96h pos-infection and the sporulation of the pathogen over the dead acarus began 120 to 144h pos-infection. This work aims to contribute to the establishement of techniques for biological control of the ticks by fungus as an ecological alternative for acaricides.
O presente trabalho teve como objetivo verificar a forma de penetração do fungo Metarhizium anisopliae [METSCH. (SOROKIN, 1883)] em carrapatos da espécie Rhipicephalus sanguineus (LATREILLE, 1806), assim como as lesões infringidas nos tecidos internos do ácaro. A forma de aderência e penetração do fungo foi estudada através da microscopia eletrônica de varredura e a ação do fungo nos tecidos internos avaliada em secções histológicas convencionais. Para observação destes eventos, realizaram-se infecções experimentais em 11 grupos de fêmeas ingurgitadas do carrapato R. sanguineus contendo 12 fêmeas ingurgitadas cada. Para tal, as fêmeas ingurgitadas foram banhadas durante 3 minutos, sob agitação manual, em suspensão com concentração 108 conídios/mL. No caso dos grupos controle o banho foi realizado apenas no veículo da suspensão. Os carrapatos foram processados para histopatologia e microscopia eletrônica em diversos tempos após a infecção, a saber: 1 e 18h, e um, dois, três, quatro, cinco, seis, sete, nove e onze dias. Observou-se que a maior parte dos conídios germinou em até 18h após a inoculação e que o fungo penetrou no ácaro através do tegumento 48h após a infecção. Após a penetração, o fungo invadiu o corpo do hospedeiro promovendo uma colonização difusa, sem preferência aparente por tecidos específicos. Dentre as lesões nos tecidos internos do ácaro, ressalta-se o rompimento da parede intestinal e vazamento do conteúdo para a hemocele. A morte do hospedeiro ocorreu entre 96 e 120h pós-infecção, e a esporulação do patógeno sobre o cadáver do ácaro iniciou-se em torno de 120 a 144h pós-infecção. Espera-se, com este trabalho, contribuir para o desenvolvimento e viabilização de técnicas de controle biológico dos carrapatos por fungos como alternativa ao uso de acaricidas.
ABSTRACT
The objective of this work was to verify the penetration of the fungus Metarhizium anisopliae [METSCH. (SOROKIN, 1883)], in to the Rhipicephalus sanguineus ticks (LATREILLE, 1806), as well as the lesions caused in the tissues of the acarus. The form of adherence and penetration of the fungus in the deep tissue was studied through scanning microscopy and the fungus action on the internal tissues was evaluated in conventional hystological sections. In order to evaluate these events, experimental infestations were conducted in 11 engorged females groups of the tick R. sanguineus, containing 12 engorged females in each. Aiming this goal the engorged females were submited to a bath in a conidial suspension in a concentration of 108 conidia/mL during three minutes under manual agitation. In case of control groups the bath was done only in the suspension vehicle. Ticks were processed for histological and scanning microscopy surveys at different intervals after the infection: 1 and 18h and one, two, three, four, five, six, seven, eight, nine and eleven days. It has been observed that the major part of the conidians have germinated within 18h after the inoculation and that the fungus the penetrated the acarus body, trough it´s tegument 48h after the infection. After the penetration the fungus colonized the ticks body in a diffuse manner, without any preference for a specific tissue. Among the lesions caused by the fungus, rupture of the ticks intestinal wall and the dispersion of the fluid into the hemocel were the most outstanding features. Death of the host occurred 96h pos-infection and the sporulation of the pathogen over the dead acarus began 120 to 144h pos-infection. This work aims to contribute to the establishement of techniques for biological control of the ticks by fungus as an ecological alternative for acaricides.
O presente trabalho teve como objetivo verificar a forma de penetração do fungo Metarhizium anisopliae [METSCH. (SOROKIN, 1883)] em carrapatos da espécie Rhipicephalus sanguineus (LATREILLE, 1806), assim como as lesões infringidas nos tecidos internos do ácaro. A forma de aderência e penetração do fungo foi estudada através da microscopia eletrônica de varredura e a ação do fungo nos tecidos internos avaliada em secções histológicas convencionais. Para observação destes eventos, realizaram-se infecções experimentais em 11 grupos de fêmeas ingurgitadas do carrapato R. sanguineus contendo 12 fêmeas ingurgitadas cada. Para tal, as fêmeas ingurgitadas foram banhadas durante 3 minutos, sob agitação manual, em suspensão com concentração 108 conídios/mL. No caso dos grupos controle o banho foi realizado apenas no veículo da suspensão. Os carrapatos foram processados para histopatologia e microscopia eletrônica em diversos tempos após a infecção, a saber: 1 e 18h, e um, dois, três, quatro, cinco, seis, sete, nove e onze dias. Observou-se que a maior parte dos conídios germinou em até 18h após a inoculação e que o fungo penetrou no ácaro através do tegumento 48h após a infecção. Após a penetração, o fungo invadiu o corpo do hospedeiro promovendo uma colonização difusa, sem preferência aparente por tecidos específicos. Dentre as lesões nos tecidos internos do ácaro, ressalta-se o rompimento da parede intestinal e vazamento do conteúdo para a hemocele. A morte do hospedeiro ocorreu entre 96 e 120h pós-infecção, e a esporulação do patógeno sobre o cadáver do ácaro iniciou-se em torno de 120 a 144h pós-infecção. Espera-se, com este trabalho, contribuir para o desenvolvimento e viabilização de técnicas de controle biológico dos carrapatos por fungos como alternativa ao uso de acaricidas.
ABSTRACT
The association of vegetable extracts with entomopathogenic fungi can increase the efficiency of biological control of pests, to reduce costs and environmental impacts. The present work aimed to evaluate, through minimal inibitory concentration, the effect of the neem oil (NIM-I-GO) on the growth, esporulation and viability of Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana and Paecilomyces farinosus. For this purpose the PDA medium was used containing different concentrations of neem oil (C1: 5% of neem oil, and successively concentrations ½ of the previous concentration, until the concentration C11:0,0048% of neen oil). The neen oil reduced the growth of B. bassiana and P. farinosus, which didnt differ significantly of the control at the concentration C11. Similar effect was observed for M. anisopliae with 0,039% of neem oil (C8). The esporulation was also significantly reduced by the neem oil, except at the concentration C11 for B. bassiana; however, no oil effect was observed on the viability of the fungi spores.
A associação de extratos de origem vegetal com fungos entomopatogênicos pode aumentar a eficiência do controle biológico de pragas, reduzir custos e impactos ambientais. No presente trabalho, avaliou-se, através da concentração inibitória mínima, o efeito do óleo de nim (NIM-I-GO) sobre o crescimento, esporulação e viabilidade de Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana e Paecilomyces farinosus. Utilizou-se o meio BDA, contendo diferentes concentrações de óleo de nim (C1: 5% de óleo de nim, e sucessivamente concentrações iguais a ½ da concentração anterior, até C11: 0,0048% de óleo de nim). O óleo de nim reduziu o crescimento de colônias de B. bassiana e P. farinosus, que não diferiram significativamente do controle apenas na concentração C11, mas para M. anisopliae o mesmo efeito foi observado com 0,039% de óleo de nim (C8). A esporulação também foi significativamente reduzida pelo óleo de nim, exceto na concentração C11 para B. bassiana; contudo, não se verificou efeito do óleo na viabilidade de esporos dos fungos.
ABSTRACT
The aim of this work was to investigate the effect of different soil types and compactness on Metarhizium anisopliae survival. The fungus survivorship was determined in four soil types: Red Latosol with clay texture, Red Latosol with medium texture, Red Yellow Podzolic with medium sand texture and Red Yellow Podzolic with sand-clay texture, with higher amount of organic material. To determine the effect of compactness on fungus survival the first three soil types were used with the following densities, respectively: 1.12, 1.32, 1.50g cm-3; 1.22, 1.44, 1.65g cm-3; 1.30, 1.50, 1.70g cm-3. The fungus survivorship was evaluated at zero, 20, 40, 60, 80, 100, 120 days of incubation at 27 ± 1ºC, through colony forming units (CFU), in Petri dishes. There was significant effect of the soil type and compactness on the survival of the fungus. Survival was greater in the soil with sand-clay texture and high number of CFU was observed in sandy soil compared with medium texture and clay soil. A significant effect of compactness was verified for the soil type, but not for the medium sand texture soil. Despite the soil type, the fungus survivorship was greater when the soil compactness was at the medium density values. The effect of compactness was most effective in the medium texture soil, in which the fungus survival was lower in all densities.
Este trabalho objetivou investigar a influência do tipo e compactação do solo na sobrevivência do fungo Metarhizium anisopliae. A sobrevivência do fungo foi determinada em quatro tipos de solos: Latossolo Vermelho textura argilosa, Latossolo Vermelho textura média, Argissolo Vermelho Amarelo textura arenosa média e Argissolo Vermelho Amarelo textura areno-argilosa, com maior teor de matéria orgânica. Para determinar o efeito da compactação na sobrevivência do fungo usaram-se os três primeiros tipos de solos nas densidades de 1,12, 1,32, 1,50g cm-3; 1,22, 1,44, 1,65g cm-3; 1,30, 1,50, 1,70g cm-3, respectivamente. Por meio da contagem de unidades formadoras de colônias (UFC) em placas de Petri, fizeram-se avaliações da sobrevivência do fungo, após zero, 20, 40, 60, 80, 100 e 120 dias de incubação a 27 ± 1ºC. Houve influência significativa do tipo de solo e do grau de compactação na sobrevivência do fungo, obtendo-se maior quantidade de UFC no solo textura areno-argilosa. Entre os demais solos, a maior sobrevivência ocorreu no solo textura arenosa e a menor no solo textura argilosa. O efeito da compactação foi significativo para o tipo de solo, exceto no solo textura arenosa. Independentemente do tipo de solo, a maior sobrevivência foi observada nos valores médios de densidade. A compactação teve maior impacto no solo textura média, onde ocorreu queda mais acentuada na quantidade de UFC em todas as densidades.
ABSTRACT
This investigation was performed to evaluate the biological efficiency (BE), mean mushroom weight (MMW), mean number of mushroom (MNM) and mushroom quality of Shiitake [ Lentinula edodes (Berk.) Pegler] when grown on a sterilized substrate composed by sugarcane bagasse enriched with rice bran and sugarcane molasses. The proportions of rice bran were 0, 15, 20, 25 and 30% (dry weight/dry weight of bagasse); and the concentrations of sugarcane molasses were 0, 30 and 60 g/kg (dry weight/dry weight of bagasse plus rice bran). Four flushes were obtained during the production cycle, providing 3 accumulated productions which were used for production analysis. The substrate supplemented with 25 and 30% rice bran yielded the highest BE (98.42 and 99.84%, respectively, about 230 days after spawning) and MNM and initially produced a lower MMW than the substrates supplemented with 15 and 20% rice bran. Any amount of rice bran added to the sugarcane bagasse improved mushroom quality, with the best production of marketable mushrooms obtained by the addition of 15% rice bran. The largest amount of sugarcane molasses (60 g/kg) increased BE (90.3 and 23.6%, on first and second accumulated productions, respectively) and MNM and no quantity affected mushroom quality.
Este trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar a eficiência biológica (EB), o peso e número médio (PMC e NMC) e a qualidade dos cogumelos de Shiitake [ Lentinula edodes (Berk.) Peger] cultivado em substrato esterilizado, elaborado à base de bagaço de cana-de-açúcar, enriquecido com farelo de arroz e melaço de cana-de-açúcar. As proporções de farelo de arroz usadas foram 0, 15, 20, 25 e 30% (peso seco/peso seco de bagaço) e as concentrações de melaço de cana-de-açúcar utilizadas foram 0, 30 e 60 g/kg(peso seco/peso seco de bagaço mais farelo de arroz). Obteve-se quatro colheitas, constituindo três produções acumuladas que foram usadas para as análises de produção. Os substratos contendo 25 e 30% de farelo de arroz produziram os maiores valores de EB (98,42 e 99,4%, respectivamente, cerca de 230 dias após a inoculação) e PMC, e inicialmente, produziram um NMC menor que os substratos contendo 15 e 20% de farelo de arroz. Qualquer quantidade de farelo de arroz adicionado ao bagaço de cana-de-açúcar melhorou a qualidade dos cogumelos e a melhor produção de cogumelos comercializáveis foi obtida com a adição de 15% de farelo de arroz. A maior quantidade de melaço de cana-de-açúcar (60 g/kg) aumentou a EB (90,3 e 23,6%, na primeira e segunda produções acumuladas, respectivamente) e PMC, e nenhuma quantidade adicionada influenciou a qualidade dos cogumelos.
ABSTRACT
The purpose of this study was to assess the myceliation rate, mycelial vigor and "estimated biomass" of Lentinula edodes (Berk.) Pegler, grown on a sugarcane bagasse substrate enriched with rice bran and sugarcane molasses for spawn production. The proportions of rice bran used were 0, 10, 15, 20, 25, 30 and 40% (dry weight/dry weight of bagasse) and the sugarcane molasses concentrations tested were 0, 10, 20, 30, 40, 50 and 60 g/kg (dry weight/dry weight of bagasse plus rice bran). The myceliation rate was decreased by the addition of the higher quantities of rice bran. The 25 and 30% rice bran proportions induced the highest stimulation of mycelial vigor. The addition of sugarcane molasses did not change myceliation rate or mycelial vigor. The "estimated biomass" values were similar when intermediate rice bran proportions were used and for all sugarcane molasses concentrations. Based on response surface obtained for the "estimated biomass" data, higher values were obtained with substrates containing 20 to 25% rice bran combined with 10 to 30 g sugarcane molasses, although the latter supplement was not considered to stimulate L. edodes growth.
O objetivo deste trabalho foi avaliar a velocidade de miceliação, o vigor do micélio e a "biomassa estimada" de Lentinula edodes (Berk.) Pegler cultivado em substrato à base de bagaço de cana-de-açúcar, suplementado com farelo de arroz e melaço de cana-de-açúcar, para a produção de "semente" do fungo. As proporções de farelo de arroz usadas foram 0, 10, 15, 20, 25, 30 e 40% (peso seco/peso seco de bagaço) e as concentrações de melaço de cana-de-açúcar empregadas foram 0, 10, 20, 30, 40, 50 e 60g/kg (peso seco/peso seco de bagaço mais farelo de arroz). A velocidade de miceliação diminuiu quando se adicionou as maiores quantidades de farelo de arroz. As suplementações com 25 e 30% de farelo de arroz proporcionaram maior estimulação do vigor micelial. A adição de melaço de cana-de-açúcar não estimulou tanto a velocidade de miceliação como o vigor micelial. Os valores de "biomassa estimada" foram similares quando se usou as proporções intermediárias de farelo de arroz e para todas as concentrações de melaço de cana-de-açúcar. Através da superfície de resposta obtida com os dados da "biomassa estimada" verificou-se que os valores mais altos foram observados quando os substratos continham 20 a 25% de farelo de arroz combinado com 10 a 30g de melaço de cana-de-acúçar, embora o último suplemento não tenha, isoladamente, estimulado o crescimento de L. edodes.