No evidence of association of CTLA-4 -318 C/T, 159 C/T, 3' STR and SUMO4 163 AG polymorphism with autoimmune diabetes.

Autoimmune diabetes is an organ specific and multifactorial disorder including insulin dependent diabetes mellitus (Type 1 Diabetes) and latent autoimmune diabetes in adults (LADA), which progresses to insulin dependency because of the beta cells destruction. Several polymorphisms in different genes have been associated with diabetes. The CTLA4 gene is considered a down regulator of T cell function, and the SUMO4 gene encodes a small ubiquitin-like modifier implicated in the intensity and duration of the immune response. We selected 62 LADA patients, 123 patients with Type 1 diabetes patients and 136 unrelated volunteers to study CTLA4 -318 C/T, 159 C/T, 3' STR and SUMO4 163 A/G polymorphisms by PCR. There was a statistical difference significant in the frequency of the allele 209pb for the 3'STR between LADA and Type 1 diabetes patients but not with respect the normal group, the frequencies were found to be 6.9%, 1.0% and 1.9%, respectively. However, no association with either of the polymorphisms has been found in the studied population. The knowledge of the several susceptibility loci in autoimmune diabetes will enhanced the prediction of individuals at high risk of developing the disease in order to establish the best treatment and the prevention of autoimmune diabetes.

Genotipificacion del gen HLA DQB1 en diabetes autoinmune del adulto ( LADA ) / HLA DQB1 genotyping in latent autoimmune diabetes of adults ( LADA )

La diabetes autoinmune es una enfermedad multifactorial causada por factores genéticos predisponentes y ambientales desencadenantes. Se manifiesta en la edad infantojuvenil (diabetes tipo 1, DMID) y en la edad adulta (diabetes autoinmune latente del adulto, LADA). La predisposición genética es de tipo poligénico, se ha establecido asociación con alelos polimórficos del gen DQB del sistema HLA, VNTR del gen de insulina y polimorfismos en el gen CTLA4. En el presente trabajo se analizaron las frecuencias de los alelos polimórficos del gen HLA DQB1 en 63 pacientes LADA, 70 pacientes DMID y 79 individuos normales. La tipificación de los alelos del gen DQB1 se llevó a cabo mediante el Kit SSPTM DQ Olerup. Se observó una mayor frecuencia del genotipo *0201-*0302 y *0201-*0201 en ambas poblaciones diabéticas con respecto a normales (p<0.05). La presencia del genotipo *0201-*0302 fue mayor en DMID que en LADA (p<0.05). Por otra parte, el análisis del alelo protector *0602 muestra una alta prevalencia en individuos normales con respecto a la población diabética. El alelo de susceptibilidad más frecuente en pacientes LADA y DMID de nuestro país fue el *0201. En conclusión, LADA presenta susceptibilidad genética dada por alelos del gen HLA DQB1 pero en forma menos determinante que en diabetes tipo 1. A su vez, el hallazgo del aumento en la frecuencia del alelo *0201, tanto en frecuencias alélicas como genotípicas permite caracterizar nuestra población de pacientes tanto LADA como DMID a diferencia de otras poblaciones en las que el alelo más frecuente es el *0302. (AU)

Genotipificacion del gen HLA DQB1 en diabetes autoinmune del adulto ( LADA ) / HLA DQB1 genotyping in latent autoimmune diabetes of adults ( LADA )

La diabetes autoinmune es una enfermedad multifactorial causada por factores genéticos predisponentes y ambientales desencadenantes. Se manifiesta en la edad infantojuvenil (diabetes tipo 1, DMID) y en la edad adulta (diabetes autoinmune latente del adulto, LADA). La predisposición genética es de tipo poligénico, se ha establecido asociación con alelos polimórficos del gen DQB del sistema HLA, VNTR del gen de insulina y polimorfismos en el gen CTLA4. En el presente trabajo se analizaron las frecuencias de los alelos polimórficos del gen HLA DQB1 en 63 pacientes LADA, 70 pacientes DMID y 79 individuos normales. La tipificación de los alelos del gen DQB1 se llevó a cabo mediante el Kit SSPTM DQ Olerup. Se observó una mayor frecuencia del genotipo *0201-*0302 y *0201-*0201 en ambas poblaciones diabéticas con respecto a normales (p<0.05). La presencia del genotipo *0201-*0302 fue mayor en DMID que en LADA (p<0.05). Por otra parte, el análisis del alelo protector *0602 muestra una alta prevalencia en individuos normales con respecto a la población diabética. El alelo de susceptibilidad más frecuente en pacientes LADA y DMID de nuestro país fue el *0201. En conclusión, LADA presenta susceptibilidad genética dada por alelos del gen HLA DQB1 pero en forma menos determinante que en diabetes tipo 1. A su vez, el hallazgo del aumento en la frecuencia del alelo *0201, tanto en frecuencias alélicas como genotípicas permite caracterizar nuestra población de pacientes tanto LADA como DMID a diferencia de otras poblaciones en las que el alelo más frecuente es el *0302.

Parálisis periódica asociada a hipertiroidismo / Periodic paralysis associated to hipertiroidism

Se presentan diez casos clínicos de Parálisis Periódica Hipokalémica (PPH) como complicación o primera manifestación del hipertiroidismo por enfermedad de Graves. Todos de sexo masculino, caucásicos, cursando entre la tercera y cuarta década de la vida. Se analizan los factores desencadenantes de las crisis, sus formas clínicas de presentación y la evolución tras la instauración del tratamiento. En todos los casos el ataque revirtió con la administración de cloruro de potasio endovenoso y no se reiteraron episodios de PPH, tras haber logrado el estado eutiroideo. (AU)

Parálisis periódica asociada a hipertiroidismo / Periodic paralysis associated to hipertiroidism

Se presentan diez casos clínicos de Parálisis Periódica Hipokalémica (PPH) como complicación o primera manifestación del hipertiroidismo por enfermedad de Graves. Todos de sexo masculino, caucásicos, cursando entre la tercera y cuarta década de la vida. Se analizan los factores desencadenantes de las crisis, sus formas clínicas de presentación y la evolución tras la instauración del tratamiento. En todos los casos el ataque revirtió con la administración de cloruro de potasio endovenoso y no se reiteraron episodios de PPH, tras haber logrado el estado eutiroideo.

Combined measurement of diabetes mellitus immunological markers: an assessment of its benefits in adult-onset patients.

The convenience of combining the measurement of antibodies to glutamic acid decarboxylase (GADA), protein tyrosine phosphatase (IA-2A), and autoantibodies to insulin (IAA) in diabetic patients was assessed. We analysed 71 type 1 and 115 adult-onset diabetic patients. The latter were grouped into three categories according to the time of evolution to insulin dependence. The main findings were as follows: (i) in type 1 diabetes, the combined analysis of GADA and IA-2A showed a sensitivity of 87.4% and was not appreciably improved by adding IAA; (ii) out of 31 adults who required insulin immediately or within the first two years of diagnosis, 41.9, 29.0, and 6.5% were positive for at least one, two or all three, and all three markers, respectively; GADA was the most prevalent (35.5%) and IA-2A the least represented (16.1%); (iii) 34 adult patients with slow evolution to insulin dependence showed a completely different profile: 5.9% were GADA positive and 23.5% were IAA positive and no double or triple positivity was observed as all patients were IA-2A negative; and (iv) 50 type 2 patients who had not required insulin treatment showed a low incidence of GADA (4%) as the only marker present. We conclude that a combined double-antigen test for GADA and IA-2A is a useful strategy for prospective screening of type 1 diabetes. However, in adults, the profile of individual markers discloses the course to insulin dependence. Therefore, it seems advisable to measure the markers separately, to allow a better classification of these patients, and help define their treatment.

[Gestational diabetes. Determination of relative importance of risk factors]. / Diabetes gestacional. Determinación del peso relativo de sus factores de riesgo.

The aim of this study was to determine the relative importance of gestational diabetes (GD) risk factors to identify populations at risk. A total of 400 pregnant patients were studied, 200 with confirmed GD diagnosis and 200 controls with risk factors. They regularly attended health-care units belonging to the Ministry of Health of the Province of Buenos Aires, in the context of the Program for the Prevention, Care and Treatment of People with Diabetes of the Province of Buenos Aires (PRODIABA). The following risk factors were evaluated: GD in previous pregnancies, history of diabetes in first degree relatives, age > or = 30 years, BMI > 26, history of fetal macrosomy, perinatal mortality and hypertension during pregnancy. Data analysis was performed with the Program of Statistics in Public Health Epilnfo 6. The association between GD development as a dependent variable and the presence of different risk factors (independent variables) was analyzed with a multiple logistic regression model, determining the logistic probability to develop GD. Results showed that the incidence of risk factors to develop GD is not the same; therefore, they do not have the same predictive value. Overweight or obesity played a key central role, not only for its frequency, but also for its contribution to GD development. Our findings reinforce the importance of multi causal studies as the basis to design and implement prevention strategies for diabetes.

Diabetes gestacional. Determinación del peso relativo de sus factores de riesgo. / [Gestational diabetes. Determination of relative importance of risk factors]

The aim of this study was to determine the relative importance of gestational diabetes (GD) risk factors to identify populations at risk. A total of 400 pregnant patients were studied, 200 with confirmed GD diagnosis and 200 controls with risk factors. They regularly attended health-care units belonging to the Ministry of Health of the Province of Buenos Aires, in the context of the Program for the Prevention, Care and Treatment of People with Diabetes of the Province of Buenos Aires (PRODIABA). The following risk factors were evaluated: GD in previous pregnancies, history of diabetes in first degree relatives, age > or = 30 years, BMI > 26, history of fetal macrosomy, perinatal mortality and hypertension during pregnancy. Data analysis was performed with the Program of Statistics in Public Health Epilnfo 6. The association between GD development as a dependent variable and the presence of different risk factors (independent variables) was analyzed with a multiple logistic regression model, determining the logistic probability to develop GD. Results showed that the incidence of risk factors to develop GD is not the same; therefore, they do not have the same predictive value. Overweight or obesity played a key central role, not only for its frequency, but also for its contribution to GD development. Our findings reinforce the importance of multi causal studies as the basis to design and implement prevention strategies for diabetes.

Relationship between non-enzymatic glycosylation and changes in serum insulin-like growth factor-1 (IGF-1) and IGF-binding protein-3 levels in patients with type 2 diabetes mellitus.

The possible occurrence of increased non-enzymatic glycosylation of serum insulin-like growth factor binding protein-3 (IGFBP-3) in vivo and the changes that would simultaneously occur in serum levels of IGFBP-3 and insulin-like growth factor-1 (IGF-I) were investigated. We measured levels of IGF-I and IGFBP-3 and the degree of glycation of total serum protein and IGFBP-3, in serum samples obtained from patients with poorly controlled non-insulin-dependent diabetes (type 2) and from age-matched non-diabetic controls. Type 2 diabetic patients had significantly higher glycated serum protein (GlyP) levels. GlyP significantly correlated with age in the control (r = 0.315, P<0.05) but not in the type 2 diabetes group. Control and diabetic subjects had comparable serum IGF-I levels and in both groups IGF-I levels tended to decrease with age (r = -0.567, P<0.001 and r = -0.465, P<0.05 for control and type 2 diabetic subjects, respectively). In the type 2 diabetes group, IGF-I levels showed a negative correlation with serum GlyP values (r = -0.476, P<0.05). Type 2 diabetic and control patients had comparable serum IGFBP-3 levels, which were significantly higher in diabetic patients in the older age subgroups. A negative correlation was found between IGFBP-3 levels and age in the control (r = -0.705, P<0.001) and in the type 2 diabetes groups (r = -0.463, P<0.05). A significant negative correlation was found between IGFBP-3 levels and GlyP in control (r = -0.449, P<0.002) but not in type 2 diabetic subjects. The mean glycated IGFBP-3 (GlyIGFBP-3) levels were higher in the oldest type 2 diabetic patients. In these patients, GlyIGFBP-3 was negatively associated with IGF-I levels (r = -0.447, P<0.05). The IGF-I/IGFBP-3 molar ratio was significantly reduced in the 46-60-year-old type 2 diabetic group, whereas the IGF-I/IGFBP-3 ratio was positively and significantly correlated with GlyP levels only in the control group (r = 0.489, P<0.01). Our results show that: a) increased non-enzymatic glycosylation of IGFBP-3 occurs in vivo; and b) this effect is accompanied by an increase in IGFBP-3 levels. These results suggest that the IGF-I/IGFBP-3 system is another target for the metabolic derangements of type 2 diabetes. Its alterations might play a role in diabetic complications.

Evaluación de la presencia de autoanticuerpos anti-insulina en población general y otra con alta incidencia de los haplotipos HLA DR4 y DQW3 / Evaluation of the presence of anti-insulin autoantibodies in the general population and in a population with high incidence of haplotypes HLA DR4 y DQW3

La diabetes mellitus tipo 1 (insulinodependiente) es una enfermedad autoinmune en la cual, previo a sus manifestaciones clínicas, suelen detectarse marcadores tales como autoanticuerpos anti-insulina (IAA), anti-islote pancreático (ICA) y contra la enzima glutámico decarboxilasa (anti GAD) de las células insulares. Además, existen factores predisponentes para su padecimiento como ciertos haplotipos HLA. En este trabajo se determinó un valor de corte para los valores de IAA a partir del cual se consideró como positiva su presencia, evalúandose luego una población de personas no diabéticas, no obesas y sin antecedentes de diabetes. Paralelamente se estudiaron muestras de sangre obtenidas de dos poblaciones diferentes: una de 678 personas provenientes de la población general y otra formada por 196 personas procedentes de diferentes tribus de la Provincia de Formosa. También se determinó la correlación entre los IAA y el serotipo HLA. Los resultados indican que el 1.8 de la población presentó valores superiores a los obtenidos en la población control, porcentaje que se elevó al 7.11 en la población indígena, la cual posee una elevada frecuencia de los haplotipos HLA DR4 y DQW3. Además se observó que en la población general los valores menores de IAA correspondieron a los haplotipos DR1, DQW1, DR4 y DQW3, mientras que los mayores lo hicieron a los haplotipos DR4, DQW3 y DR7. Estos resultados, que conforman la mayor casuística argentina de IAA, permiten definir valores de corte útiles para su diagnóstico en nuestro medio y confirman en nuestra población la correlación descripta en otros países y poblaciones entre IAA (AU)

Evaluación de la presencia de autoanticuerpos anti-insulina en población general y otra con alta incidencia de los haplotipos HLA DR4 y DQW3 / Evaluation of the presence of anti-insulin autoantibodies in the general population and in a population with high incidence of haplotypes HLA DR4 y DQW3

La diabetes mellitus tipo 1 (insulinodependiente) es una enfermedad autoinmune en la cual, previo a sus manifestaciones clínicas, suelen detectarse marcadores tales como autoanticuerpos anti-insulina (IAA), anti-islote pancreático (ICA) y contra la enzima glutámico decarboxilasa (anti GAD) de las células insulares. Además, existen factores predisponentes para su padecimiento como ciertos haplotipos HLA. En este trabajo se determinó un valor de corte para los valores de IAA a partir del cual se consideró como positiva su presencia, evalúandose luego una población de personas no diabéticas, no obesas y sin antecedentes de diabetes. Paralelamente se estudiaron muestras de sangre obtenidas de dos poblaciones diferentes: una de 678 personas provenientes de la población general y otra formada por 196 personas procedentes de diferentes tribus de la Provincia de Formosa. También se determinó la correlación entre los IAA y el serotipo HLA. Los resultados indican que el 1.8 de la población presentó valores superiores a los obtenidos en la población control, porcentaje que se elevó al 7.11 en la población indígena, la cual posee una elevada frecuencia de los haplotipos HLA DR4 y DQW3. Además se observó que en la población general los valores menores de IAA correspondieron a los haplotipos DR1, DQW1, DR4 y DQW3, mientras que los mayores lo hicieron a los haplotipos DR4, DQW3 y DR7. Estos resultados, que conforman la mayor casuística argentina de IAA, permiten definir valores de corte útiles para su diagnóstico en nuestro medio y confirman en nuestra población la correlación descripta en otros países y poblaciones entre IAA

Microalbuminuria: estudio comparativo de métodos de valoración semicuantitativo y cuantitativo / Microalbuminuria: a comparative study of semiquantitative and quantitative methods

Se valoró microalbuminuria (MA), simultáneamente con una tira reactiva (TR), semicuantitativa, un método inmunoturbidimétrico (IT), cuantitativo y el readioinmunoanálisis (RIA). El objetivo fue validar los métodos ensayados y verificar la influencia del tiempo y forma de recolección de la muestra. TR mostró buena concordancia para ocho observadores en 11 muestras de concentración entre 5-100 mg/L. Los CV intra e interensayo fueron: IT=4,7 y 4,9 ; RIA=6,6 y 9. Se hallaron los siguientes coeficientes de correlación (n=130):r=0.83,p<10-6(TA vs RIA y TR vs IT) y r=0.93, p<1-6(IT vs RIA). TR sería adecuado para la determinación semicuantitativa rápida de MA. Permitiría seleccionar con relativa especificidad y buena sensibilidad (falsos positivos 23 y falsos negativos 2, pacientes que luego podrían estudiarse con técnicas cuantitativas de mayor exactitud. IT tiene alta precisión y exactitud y su correlación con RIA es altamente significativa. En relación con la muestra de orina, la más conveniente sería la de 24 h, especialmente para los diabéticos. Ni la temperatura ni el recipiente de recolección afectan el resultado (AU)

Microalbuminuria: estudio comparativo de métodos de valoración semicuantitativo y cuantitativo / Microalbuminuria: a comparative study of semiquantitative and quantitative methods

Se valoró microalbuminuria (MA), simultáneamente con una tira reactiva (TR), semicuantitativa, un método inmunoturbidimétrico (IT), cuantitativo y el readioinmunoanálisis (RIA). El objetivo fue validar los métodos ensayados y verificar la influencia del tiempo y forma de recolección de la muestra. TR mostró buena concordancia para ocho observadores en 11 muestras de concentración entre 5-100 mg/L. Los CV intra e interensayo fueron: IT=4,7 y 4,9 ; RIA=6,6 y 9. Se hallaron los siguientes coeficientes de correlación (n=130):r=0.83,p<10-6(TA vs RIA y TR vs IT) y r=0.93, p<1-6(IT vs RIA). TR sería adecuado para la determinación semicuantitativa rápida de MA. Permitiría seleccionar con relativa especificidad y buena sensibilidad (falsos positivos 23 y falsos negativos 2, pacientes que luego podrían estudiarse con técnicas cuantitativas de mayor exactitud. IT tiene alta precisión y exactitud y su correlación con RIA es altamente significativa. En relación con la muestra de orina, la más conveniente sería la de 24 h, especialmente para los diabéticos. Ni la temperatura ni el recipiente de recolección afectan el resultado

Decreased Ca2(+)-ATPase activity after glycosylation of erythrocyte membranes in vivo and in vitro.

Erythrocyte membranes drawn from diabetic patients with poor metabolic control have increased protein glycosylation and decreased Ca2(+)-ATPase activity. A significant relationship was found between these two parameters. Similar results were obtained when protein glycosylation and Ca2(+)-ATPase activity were measured in membranes from normal erythrocytes preincubated with glucose. In this condition, both parameters showed a clear time and dose dependence. Incubation of erythrocyte membranes instead of intact erythrocytes with glucose and glucose-6-phosphate strongly suggests that only the glycosylation of the membrane inner-surface proteins can affect Ca2(+)-ATPase activity. The simultaneous presence of 10 mM glucose and 5 mM ATP in the incubation medium did not affect the degree of erythrocyte membrane protein glycosylation but significantly blocked the inhibitory effect of glucose on Ca2(+)-ATPase activity. However, 5 mM ATP only partially blocked the inhibitory effect of 100 mM glucose, suggesting a competitive mechanism of glucose and ATP for the enzyme active site. Our results show that glycosylation of erythrocyte membrane proteins significantly inhibits Ca2(+)-ATPase activity. This effect could contribute to the development of the capillary closure process observed in diabetic patients. Furthermore, it could represent an index of a general impairment of enzyme function arising in cells chronically exposed to high glucose levels.

Dimensiones moleculares de los complejos inmunes insulina-antiinsulina presentes en el suero de pacientes diabéticos / Molecular size of circulating immune insulinantiinsulin complex in diabetic patients

El tamaño de los complejos inmunes insulina: antiinsulina (CII:A) presentes en el suero de pacientes diabéticos tratados con insulina, se estudió mediante su marcación con mono 125I-insulina y separación cromatográfica en columna de Sepharose CL-6B. Dicho tamaño se comparó con el título de anticuerpos antiinsulina y con la concentración total de insulina de esos sueros. Se identificaron dos tipos de CII:A cuyos tamaños, expresados como Kav, fueron de 0,41 ñ 0,002 y 0,32 ñ 0,01 (equivalentes a PMs de 170 y 300 Kd, rspectivamente), los que indicarían asociaciones anticuerpos: insulina del tipo 1:1 (1:2) y 2:1, respectivamente. Los complejos del tipo 2:1 se encontraron en sueros de bajo títulos de anticuerpos, mientras que a los 1:1 (o1:2) se los halló en sueros con títulos medianos y altos.

Dimensiones moleculares de los complejos inmunes insulina-antiinsulina presentes en el suero de pacientes diabéticos / Molecular size of circulating immune insulinantiinsulin complex in diabetic patients

El tamaño de los complejos inmunes insulina: antiinsulina (CII:A) presentes en el suero de pacientes diabéticos tratados con insulina, se estudió mediante su marcación con mono 125I-insulina y separación cromatográfica en columna de Sepharose CL-6B. Dicho tamaño se comparó con el título de anticuerpos antiinsulina y con la concentración total de insulina de esos sueros. Se identificaron dos tipos de CII:A cuyos tamaños, expresados como Kav, fueron de 0,41 ñ 0,002 y 0,32 ñ 0,01 (equivalentes a PMs de 170 y 300 Kd, rspectivamente), los que indicarían asociaciones anticuerpos: insulina del tipo 1:1 (1:2) y 2:1, respectivamente. Los complejos del tipo 2:1 se encontraron en sueros de bajo títulos de anticuerpos, mientras que a los 1:1 (o1:2) se los halló en sueros con títulos medianos y altos.