ABSTRACT
Protein quinary interactions organize the cellular interior and its metabolism. Although the interactions stabilizing secondary, tertiary, and quaternary protein structure are well defined, details about the protein-matrix contacts that comprise quinary structure remain elusive. This gap exists because proteins function in the crowded cellular environment, but are traditionally studied in simple buffered solutions. We use NMR-detected H/D exchange to quantify quinary interactions between the B1 domain of protein G and the cytosol of Escherichia coli. We demonstrate that a surface mutation in this protein is 10-fold more destabilizing in cells than in buffer, a surprising result that firmly establishes the significance of quinary interactions. Remarkably, the energy involved in these interactions can be as large as the energies that stabilize specific protein complexes. These results will drive the critical task of implementing quinary structure into models for understanding the proteome.
Subject(s)
Models, Molecular , Protein Conformation , Protein Stability , Receptors, GABA-B/chemistry , DNA Primers/genetics , Deuterium Exchange Measurement , Escherichia coli , Nitrogen Isotopes , Nuclear Magnetic Resonance, Biomolecular , Plasmids/genetics , Protein Isoforms/chemistry , Protein Isoforms/isolation & purification , Receptors, GABA-B/isolation & purification , ThermodynamicsABSTRACT
El presente documento ha sido preparado como instrumento didáctico para el programa de capacitación del usuario, considerando el nivel funcional en que se encuentra dentro de la organización del sistema de vigilancia epidemiológica de las infecciones intra hospitalarias. El contenido integral se encuentra organizado en cinco secciones, de los cuales tres son módulos didácticos; asimismo, incluye pautas a seguir antes de poner en operación el sistema de VEIH y un glosario de términos(AU)
Subject(s)
Medical Informatics Applications , Public Health Informatics , Epidemiological Monitoring , PeruABSTRACT
El presente documento ha sido preparado como instrumento didáctico para el programa de capacitación del usuario, considerando el nivel funcional en que se encuentra dentro de la organización del sistema de vigilancia epidemiológica de las infecciones intra hospitalarias. El contenido integral se encuentra organizado en cinco secciones, de los cuales tres son módulos didácticos; asimismo, incluye pautas a seguir antes de poner en operación el sistema de VEIH y un glosario de términos