Analysis of telomere length in mantle cell lymphoma.

Mantle cell lymphoma (MCL) is a well defined lymphoid neoplasm genetically characterized by the t(11;14)(q13;q32). Telomeres play an essential role in preserving chromosomal integrity and genomic stability; their shortening can lead to telomere dysfunction and chromosomal instability, a critical factor in cancer development. In this study, telomere length (TL) measured by terminal restriction fragments (TRF) assay in DNA samples of tumor cells from 20 patients with MCL was evaluated. Results were correlated with clinical, morphologic and cytogenetic characteristics. In all cases, the presence of the CCND1/IGH@ rearrangement was confirmed by fluorescence in situ hybridization and/or PCR analysis. TL in total MCL patients revealed a mean TRF value (4.51 +/- 0.79 kb) significantly shorter than those observed in controls (7.49 +/- 1.94 kb) (P < 0.001); 30% of patients had TL shorter than 4.0 kb. TRF length was not associated with patients age (P = 0.07; r = 0.17) nor with sex (females: 4.33 +/- 0.51 kb and males: 4.57 +/- 0.85 kb; P = 0.63). No significant differences were found between patients studied at diagnosis (13) (4.44 +/- 0.81 kb) respect to those analyzed at relapse (7) (4.63 +/- 0.82 kb) (P = 0.53). In addition, we compared patients with (4.84 +/- 1.09 kb) and without (4.40 +/- 0.68 kb) complex karyotypes (P = 0.45) and cases with typical morphology (4.48 +/- 0.79 kb) vs. blastoid variant (4.63 +/- 1.04 kb) (P = 0.83), and no significant differences between them were found. Although the number of cases of our series is not large, our results showed that TL reduction in MCL is independent of the clinical characteristics, morphology and karyotype.

Analysis of genomic instability in adult-onset celiac disease patients by microsatellite instability and loss of heterozygosis.

BACKGROUND AND AIMS: Malignant complications of celiac disease (CD) include carcinomas and lymphomas. The genetic basis behind cancer development in CD is not known, but acquisition of genetic abnormalities and genomic instability has been involved. The aim of this study was to explore molecular characteristics of genomic instability in CD patients by analyzing microsatellite instability (MSI) and loss of heterozygosis (LOH) with carefully selected microsatellites. METHODS: We genotyped small bowel biopsies and peripheral blood samples from 20 untreated CD patients using five microsatellites related to MMR genes (panel A), and five repeats associated with tumor suppressor genes, chromosome instability, inflammation, and cancer (panel B). RESULTS: Genomic instability was found in seven out of 20 (35%) cases at: D5S107, D18S58, GSTP, TP53 or DCC, being TP53 the most frequently affected (five out of seven cases; 71%). Microsatellite alterations were significantly found using panel B markers (P=0.04). No cases with high frequency of MSI and replication error phenotype were detected. Only one case displayed MSI-L alone. Three patients exhibited LOH and three other cases showed LOH with low level of MSI, being classified as having chromosome instability phenotype. CONCLUSION: Two novel observations were found in this study: first, the finding that non-neoplastic cells from a group of untreated CD patients present genomic instability at nucleotide level; and second, the advantage to use carefully selected microsatellites to identify celiac patients with molecular instability. Our data support the existence of chromosome instability phenotype in CD, suggesting that stable and unstable patients are genomically distinct subtypes that may follow a different evolution.

[Molecular analysis of telomere length in follicular lymphomas. Its participation in tumor progression]. / Análisis molecular de la longitud telomérica en linfomas foliculares. Su participación en la progresón tumoral.

Telomeres are essential for maintaining chromosomal integrity and stability. We studied here telomere length (TL) in bone marrow and/or lymph node from 36 patients: 29 with follicular lymphoma (FL) at diagnosis and 7 with diffuse large B cell lymphoma secondary to FL (S-DLBCL). TL was evaluated using terminal restriction fragments (TRF) assay. BCL-2 gene rearrangement was analyzed by nested and long distance PCR. Mean TRF values showed significant telomere shortening in FL (4.18 +/- 0.18 Kb) and S-DLBCL (3.31 +/- 0.25 Kb) respect to controls (8.50 +/- 0.50 Kb) (p<0.001). Differences between both histological subtypes (p=0.036) were also detected. Moreover, the samples positive for BCL-2 rearrangements showed longer TL (4.25 +/- 0.19 Kb) than the negative ones (3.39 +/- 0.30 Kb) (p=0.023). A trend to telomere shortening was observed when Major Breakpoint Region (MBR-JH), minor cluster region (mcr-JH) and BCL-2 negative patients were compared (4.35 +/- 0.21 Kb; 3.84 +/- 0.45 Kb and 3.39 +/- 0.30 Kb, respectively). Our results show a TL reduction in FL and S-DLBCL, with significant short TRFs in the last group, suggesting the participation of telomere shortening in tumor progression. Furthermore, the differences detected between BCL-2 positive and negative FL support the involvement of diverse pathogenic mechanisms.

Análisis molecular de la longitud telomérica en linfomas foliculares. Su participación en la progresón tumoral. / [Molecular analysis of telomere length in follicular lymphomas. Its participation in tumor progression]

Telomeres are essential for maintaining chromosomal integrity and stability. We studied here telomere length (TL) in bone marrow and/or lymph node from 36 patients: 29 with follicular lymphoma (FL) at diagnosis and 7 with diffuse large B cell lymphoma secondary to FL (S-DLBCL). TL was evaluated using terminal restriction fragments (TRF) assay. BCL-2 gene rearrangement was analyzed by nested and long distance PCR. Mean TRF values showed significant telomere shortening in FL (4.18 +/- 0.18 Kb) and S-DLBCL (3.31 +/- 0.25 Kb) respect to controls (8.50 +/- 0.50 Kb) (p<0.001). Differences between both histological subtypes (p=0.036) were also detected. Moreover, the samples positive for BCL-2 rearrangements showed longer TL (4.25 +/- 0.19 Kb) than the negative ones (3.39 +/- 0.30 Kb) (p=0.023). A trend to telomere shortening was observed when Major Breakpoint Region (MBR-JH), minor cluster region (mcr-JH) and BCL-2 negative patients were compared (4.35 +/- 0.21 Kb; 3.84 +/- 0.45 Kb and 3.39 +/- 0.30 Kb, respectively). Our results show a TL reduction in FL and S-DLBCL, with significant short TRFs in the last group, suggesting the participation of telomere shortening in tumor progression. Furthermore, the differences detected between BCL-2 positive and negative FL support the involvement of diverse pathogenic mechanisms.

Acortamiento telomérico e inestabilidad cromosómica en mieloma múltiple (MM) y gamapatía monoclonal de significado incierto(MGUS) / Telomeric shortening and multiple chromosomic instability in myeloma (MM) and monoclonal gamapathy of uncertain meaning (MGUS)

Objetivos: Los telómeros son estructuras esenciales para el mantenimiento de la integridad cromosómica y la capacidad replicativa de la célula. En este trabajo se evaluó la longitud telomérica (L T) y la presencia de asociaciones teloméricas (T As) en médula ósea (MO) de MM y MGUS. Material y métodos: Se estudiaron 31 pacientes (pts) con MM: 12 al diagnóstico (D),ll en recaída (R), 8 en remisión (RE) y 2 con MGUS. La LT se evaluó mediante el análisis de los fragmentos de restricción terminal (TRF). Resultados: En MM, la media de TRF resultó menor (5,20:t0,35Kb) que en controles (8,50:t0,50Kb) (p<0,001). Los TRF al D y en R fueron más cortos que en RE (p<0,001). Se observó una correlación negativa entre TRF y el porcentaje de células plasmáticas en MO (rK= -0,540; p=0,002). Los pacientes con anomalías cromosómicas tuvieron TRFs significativamente más cortos (p<0,05). Los MGUS no difirieron de los controles. Se observó un incremento de T As en MM (19,46:t1,98 porciento) respecto de MGUS (6,12:t1,87 porciento) y MO normal (2,00:t0,93 porciento) (p<0,001) de T As en MM (19,46:t1,98porciento) respecto de MGUS (6,12:t1,87 porciento) y MO normal (2,00:t0,93 porciento) (p<0,001) Conclusiones: Nuestros hallazgos indican que los TRFs podrían ser marcadores tumorales y sustentan que la disminuciÓn de la L T incrementa la frecuencia de T As e inestabilidad cromosómica, sugiriendo su participación en el desarrollo de MM

Acortamiento telomérico e inestabilidad cromosómica en mieloma múltiple (MM) y gamapatía monoclonal de significado incierto(MGUS) / Telomeric shortening and multiple chromosomic instability in myeloma (MM) and monoclonal gamapathy of uncertain meaning (MGUS)

Objetivos: Los telómeros son estructuras esenciales para el mantenimiento de la integridad cromosómica y la capacidad replicativa de la célula. En este trabajo se evaluó la longitud telomérica (L T) y la presencia de asociaciones teloméricas (T As) en médula ósea (MO) de MM y MGUS. Material y métodos: Se estudiaron 31 pacientes (pts) con MM: 12 al diagnóstico (D),ll en recaída (R), 8 en remisión (RE) y 2 con MGUS. La LT se evaluó mediante el análisis de los fragmentos de restricción terminal (TRF). Resultados: En MM, la media de TRF resultó menor (5,20:t0,35Kb) que en controles (8,50:t0,50Kb) (p<0,001). Los TRF al D y en R fueron más cortos que en RE (p<0,001). Se observó una correlación negativa entre TRF y el porcentaje de células plasmáticas en MO (rK= -0,540; p=0,002). Los pacientes con anomalías cromosómicas tuvieron TRFs significativamente más cortos (p<0,05). Los MGUS no difirieron de los controles. Se observó un incremento de T As en MM (19,46:t1,98 porciento) respecto de MGUS (6,12:t1,87 porciento) y MO normal (2,00:t0,93 porciento) (p<0,001) de T As en MM (19,46:t1,98porciento) respecto de MGUS (6,12:t1,87 porciento) y MO normal (2,00:t0,93 porciento) (p<0,001) Conclusiones: Nuestros hallazgos indican que los TRFs podrían ser marcadores tumorales y sustentan que la disminuciOn de la L T incrementa la frecuencia de T As e inestabilidad cromosómica, sugiriendo su participación en el desarrollo de MM(AU)

Telomeros y actividad de Telomerasa: su paraticipación en el envejecimiento y el desarrollo neoplasico / Telomeres and telomerase activity: their role in aging and in neoplastic development

Los telómeros son regiones de ADN no codificante ubicadas en los extremos de los cromosomas eucarióticos. Están constituídos por secuencias de ADN altamente conservadas, repetidas en tandem (TTAGGG)n y proteínas asociadas, y presentan una estructura especial que previene la fusión y degradación telomérica. Cuando los telómeros alcanzan un tamaño crítico tienen dificultades para separarse durante la mitosis, generando asociaciones teloméricas (tas) e inestabilidad cromosómica. Dicha instabilidad cromosómica estaría relacionada a un aumento en la probabilidad de producir errores capaces de generar cambios genéticos de importancia para el proceso de desarrollo neoplásico, tales como amplificación génica y pérdida de heterocigosidad. Los mecanismos que producen las tas son aún desconocidos pero podrían estar asociados a fallas de la actividad de la enzima telomerasa, ribonucleoproteína que sintetiza las secuencias repetitivas de los telómeros, estabilizando así la longitud de los mismos. Se ha observado una reducción progresiva del número de repeticiones teloméricas in vitro, asi como en función del envejecimiento celular, in vivo. Recientes estudios mostraron una asociación entre la presencia de tas y el acortamiento telomérico, asi como una correlación entre la reducción telómerica y el aumento de los niveles de telomerasa en diferentes tumores sólidos y neoplasias hematológicas. El hecho de que la mayoría de las neoplasias humanas presenten actividad de telomerasa podría indicar a dicha enzima como un marcador tumoral específico y prevalente, constituyendo un muy buen blanco para realizar terapia anti-cáncer utilizando inhibidores de la misma.

Telomeros y actividad de Telomerasa: su paraticipación en el envejecimiento y el desarrollo neoplasico / Telomeres and telomerase activity: their role in aging and in neoplastic development

Los telómeros son regiones de ADN no codificante ubicadas en los extremos de los cromosomas eucarióticos. Están constituídos por secuencias de ADN altamente conservadas, repetidas en tandem (TTAGGG)n y proteínas asociadas, y presentan una estructura especial que previene la fusión y degradación telomérica. Cuando los telómeros alcanzan un tamaño crítico tienen dificultades para separarse durante la mitosis, generando asociaciones teloméricas (tas) e inestabilidad cromosómica. Dicha instabilidad cromosómica estaría relacionada a un aumento en la probabilidad de producir errores capaces de generar cambios genéticos de importancia para el proceso de desarrollo neoplásico, tales como amplificación génica y pérdida de heterocigosidad. Los mecanismos que producen las tas son aún desconocidos pero podrían estar asociados a fallas de la actividad de la enzima telomerasa, ribonucleoproteína que sintetiza las secuencias repetitivas de los telómeros, estabilizando así la longitud de los mismos. Se ha observado una reducción progresiva del número de repeticiones teloméricas in vitro, asi como en función del envejecimiento celular, in vivo. Recientes estudios mostraron una asociación entre la presencia de tas y el acortamiento telomérico, asi como una correlación entre la reducción telómerica y el aumento de los niveles de telomerasa en diferentes tumores sólidos y neoplasias hematológicas. El hecho de que la mayoría de las neoplasias humanas presenten actividad de telomerasa podría indicar a dicha enzima como un marcador tumoral específico y prevalente, constituyendo un muy buen blanco para realizar terapia anti-cáncer utilizando inhibidores de la misma. (Au)