[Diagnostic performance of the rapid fasciorap test based on the immunochromatography or lateral flow technique for the detection of antibodies in patients with human fasciolosis]. / Rendimiento diagnóstico de la prueba rápida fasciorap basada en la técnica de inmunocromatografía o flujo lateral para la detección de anticuerpos en pacientes con Fasciolosis humana.

OBJECTIVE: To determine the diagnostic performance of the immunochromatography technique or lateral flow for the detection of antibodies in patients with human fasciolosis. MATERIALS AND METHODS: Observational, prospective and cross-sectional study. We have developed a lateral flow test (Fasciorap) for the serological diagnosis of fasciolosis due to F. hepatica, composed of excretion-secretion antigens of adult forms conjugated with orocolloid of 40 nm and a protein A and IgG of rabbit anti F. hepatica as detector reagents in the test and control line, flanked by pads in a cassette. 240 sera were evaluated, 120 positive, 50 sera from patients with other parasites, 20 from patients with infectious diseases and 50 sera from non-parasitized people, the interpretation of results was performed by visual inspection 15 minutes after applying the samples. RESULTS: The test detected the presence of antibodies in the serum of patients with fasciolosis, reaching a sensitivity of 92.5%, a specificity of 94.17%, a positive predictive value of 94.07% and a negative predictive value of 92.62%; with 100% agreement on repeatability and reproducibility. CONCLUSIONS: Fasciorap detects cases of fascioliasis, therefore, it is a potential diagnostic test in endemic areas where point-of-care testing is required.

Rendimiento diagnóstico de la prueba rápida fasciorap basada en la técnica de inmunocromatografía o flujo lateral para la detección de anticuerpos en pacientes con Fasciolosis humana

Objetivo : Determinar el rendimiento diagnóstico de la técnica de inmnunocromatografía o flujo lateral para la detección de anticuerpos en pacientes con Fasciolosis humana. Materiales y métodos : Estudio observacional, prospectivo y de corte transversal. Hemos desarrollado una prueba de flujo lateral (Fasciorap) para el diagnóstico serológico de las Fasciolosis humana por Fasciola hepatica, compuesta por antígenos de excreción-secreción de formas adultas conjugadas con orocoloidal de 40 nm y una proteína A e IgG de conejo anti Fasciola hepatica como reactivos detectores en la línea de prueba y control, flanqueados por almohadillas en un cassette. Se evaluaron 240 sueros, 120 positivos, 50 sueros de pacientes con otras parasitosis, 20 de pacientes con enfermedades infecciosas y 50 sueros de personas no parasitadas, la interpretación de resultados se realizó por inspección visual a los 15 minutos de aplicada las muestras. Resultados : La prueba detectó la presencia de anticuerpos en el suero de pacientes con fasciolosis, alcanzando una sensibilidad de 92,5%, una especificidad de 94,17%, un valor predictivo positivo de 94,07% y negativo de 92,62%; con 100% de concordancia en la repetibilidad y reproducibilidad. Conclusiones : Fasciorap detecta casos de fasciolosis, por lo tanto, es una potencial prueba diagnóstica en zonas endémicas donde se requiere pruebas de punto de atención

Objective : To determine the diagnostic performance of the immunochromatography technique or lateral flow for the detection of antibodies in patients with human fasciolosis. Materials and methods : Observational, prospective and cross-sectional study. We have developed a lateral flow test (Fasciorap) for the serological diagnosis of fasciolosis due to F. hepatica, composed of excretion-secretion antigens of adult forms conjugated with orocolloid of 40 nm and a protein A and IgG of rabbit anti F. hepatica as detector reagents in the test and control line, flanked by pads in a cassette. 240 sera were evaluated, 120 positive, 50 sera from patients with other parasites, 20 from patients with infectious diseases and 50 sera from non-parasitized people, the interpretation of results was performed by visual inspection 15 minutes after applying the samples. Results : The test detected the presence of antibodies in the serum of patients with fasciolosis, reaching a sensitivity of 92.5%, a specificity of 94.17%, a positive predictive value of 94.07% and a negative predictive value of 92.62%; with 100% agreement on repeatability and reproducibility. Conclusions : Fasciorap detects cases of fascioliasis, therefore, it is a potential diagnostic test in endemic areas where point-of-care testing is required

Efecto protector de oncósferas homólogas en la infección por Hymenolepis nana var. Nana / The protector effect of homologous oncospheres to infection of Hymenolepis nana var. nana

El efecto protector de oncósferas homólogas fue evaluado en Mus musculus infectados por Hymenolepis nana var. nana. El estudio se realizó en 20 ejemplares hembras de Mus musculus de dos meses de edad y libres de infección por helmintos, los cuáles fueron seleccionados al azar en dos grupos (experimental y control) de 10 ratones cada uno. Cada animal del grupo experimental recibió una dosis única del inmunógeno vía subcutánea, constituido por la mezcla de 0,05 mL de PBS con 15—24 oncósferas y 0,05 mL de Adyuvante Completo de Freund’s para inducir la respuesta inmune. El grupo control recibió por igual vía la misma dosis, pero sin oncósferas. La evaluación del efecto protector de las oncósferas se realizó después de 25 días de la inmunización, para lo cuál 200 huevos viables de H. nana var. nana fueron administrados por vía oral a cada uno de los 20 ratones, los que fueron mantenidos durante 15 días más antes de ser sacrificados para obtener los parásitos intestinales y comprobar la eficiencia de la inmunización. Las formas adultas de Hymenolepis nana var. nana fueron encontrados en dos ratones del grupo experimental y en 5 ratones del grupo control; siendo la eficiencia de la inmunización del 60 por ciento, observandose diferencia significativa entre el grupo control y el grupo experimental.

The protector effect of homologous oncospheres was evaluated in Mus musculus infected with Hymenolepis nana var. nana. Twenty female of Mus musculus of two months old, free infection by helminths, were random-selected into two groups, experimental and control, of 10 mouses each one. Each animal from the experimental group received a single subcutaneous dose of immunogen constituted by 0,05 mL of PBS with 15—24 oncospheres and 0,05 mL of complete Freund’s Adjuvant to induce the immune response. The control group received a similar dose, but without oncospheres. The protector effect of the oncospheres was evaluated after 25 days of the immunization, 200 viable eggs of H. nana var. nana were inoculated by oral route to each one of the 20 mouses, and they were kept alive for 15 days before to be sacrificed to get intestinal parasites and prove the immunization efficiency. Adult forms of H. nana var. nana were found in two mice of experimental group and 5 mouses from control group; being immunization efficiency of 60 per cent, showing significative differences between control group and experimental group.

Evaluación de la técnica Western blot para la detección de antígenos de Hymenolepis nana / Evaluation of Western blot technique for detection of antigens of Hymenolepis nana

Este trabajo tuvo como objetivo evaluar la técnica de inmunoelectrotransferencia (Western Blot) para detectar los antígenos específicos de excreción/secreción de Hymenolepis nana en sueros de pacientes con himenolepiosis y con otras helmintiosis confirmadas. Se utilizó a Mesocricetus auratus "hamster" para obtener ejemplares adultos de H. nana. Los antígenos de excreción/secreción fueron obtenidos en el medio MEM (Minimum Essential Medium Eagle), y enfrentados con un grupo de sueros de pacientes con himenolepiosis confirmada para evaluar su calidad inmunológica y con sueros individuales de pacientes con himenolepiosis y con otras helmintiosis confirmadas para detectar mediante la técnica de "Western Blot", los antígenos específicos de este cestode. El grupo de sueros de pacientes con himenolepiosis confirmada reconoció las bandas antigénicas de 50,1; 42,6; 38,9; 32,9; 26,3; 22,4 y 18,6 kDa; sin embargo, los sueros individuales reconocieron diferente número de bandas, siendo la de 50,1 KDa la que fue reconocida por todos ellos. Los sueros de pacientes con helmintiosis confirmadas no reconocieron la banda de 50,1 kDa; sin embargo, dieron reacción cruzada con algunas de las demás bandas, a excepción de los sueros de pacientes con cisticercosis que no reconocieron a ninguna de las bandas de estos antígenos. Se concluye que el antígeno de excreción/secreción de H. nana de 50,1 kDa es específico de este cestode por ser reconocido por todos los sueros de pacientes con himenolepiosis confirmada y no por sueros de pacientes con otras helmintiosis utilizando la técnica de "Western Blot".

Enzyme-linked immunoelectrotransfer blot assay or "Western blot" was evaluated to detect specific excretory/secretory antigens from Hymenolepis nana using sera from patient with hymenolepiosis and other confirmed helminthiosis. Hymenolepis nana adults were obtained from experimentally infected golden hamster, the parasits were cultured in Minimum Essential Medium Eagle to get excretory/secretory antigens which were faced to a pool of sera from patients with confirmed hymenolepiosis to evaluate its immunological quality and with individual sera from patients with hymenolepiosis and other confirmed helminthiosis to detect by mean "Western blot" technique, this parasite specific antigens. The pool of sera from patients with confirmed hymenolepiosis recognized seven antigenic bands; 50,1; 42,6; 38.9; 26,3; 22,4; and 18,6 kDa; however, the individual sera recognized different number of bands being 50,1 kDa band the most recognized by all of them. The sera from patients with confirmed helminthiosis did not recognized 50,1 KDa band; however they gave cross reaction with some of the other bands, except the sera from patients with cysticercosis which did not recognized any of this antigen bands. Consequently 50,1 kDa antigen is specific because is recognized by all the sera from patients with confirmed hymenolepiosis and is not recognized by sera from patients with other helminthiosis using "Western blot" technique.

La inmunocromatografía para el diagnóstico de la infección por taenia solium en mesocricetus auratus mediante la detección de coproantígenos / Inumonocromatography for diagnosis of taenia solium infection in mesocricetus auratus by coproantigen detection

Objetivo: Evaluar la técnica de inmunocromatografía para el diagnóstico de la infección por Taenia solium en Mesocricetus auratus "hámsters" mediante la detección de coproantígenos. Materiales y métodos: Se produjo en Oryctolagus cunniculus "conejo" IgG anti-antígenos de excreción/secreción (ES) de T. solium en Cabra hircus "cabra" IgG anti-IgG de conejo. Parte de las IgG anti-antígenos ES de T. solium fue conjugado con oro coloidal. La inmunocromatografía se llevó a cabo utilizando tiras de nitrocelulosa en las cuales se fijó dos bandas con anticuerpos de captura; en la primera, las IgG anti-antígenos Es de T. solium (banda de prueba), y en la segunda las IgG anti-IgG de conejo (banda control). La técnica fue evaluada con un "pool" de tres muestras de medio de cultivo con antígenos ES de T. solium, Hymenolepis nana, Dyphillobotrium pacificum y de larvas de Anisakis simplex, así como con un "pool" de tres muestras fecales de hámsters parasitados por T. solium. Resultados: La inmunocromatografía permitió detectar antígenos de T. solium en muestras de medio de cultivo con antígenos ES específicas y en heces de hámsters parasitados por T. solium mediante la coloración de la banda de prueba, siendo negativo cuando se utilizó medios con ES de otros helmintos y sin antígenos, así como con muestras de heces de hámsters infectados por otros parásitos y de no parasitados. En todas las tiras usadas se observó coloración de la banda control. Conclusión: La técnica de inmunocromatografía es capaz de detectar antígenos de T. solium, tanto en medio de cultivo como en heces de hámsters, faltando evaluar la sensibilidad y la especificidad con muestras fecales humanas para el diagnóstico de la teniasis mediante la detección de coproantígenos.

Objective: To assess the immunochromatography assay for the diagnosis of Taenia solium infection in hamsters (Mesocricetus auratus) by coproantigen detection. Materials and methods: IgG anti-T. solium excretory/secretory (E/S) antigens were produced in rabbits and IgG anti-rabbit IgG, in Capra hircus "goat". A portion of the anti-T. solium E/S IgG antigens was conjugated with colloidal gold. Immunochromatography was performed in nitrocellulose paper strips in which two transversal bands with capture antibodies were fixed. The first band had rabbit anti-T. solium E/S IgG antigens (test band), and the second band had goat IgG anti-rabbit IgG (control band). The assay was assessed using a pool of three culture media samples with E/S antigens from T. solium, Hymenolepis nana, Dyphillobotrium pacificum and of Anisakis simplex larvae, as well a by a pool of three faecal samples from non-infected hamsters, from hamsters infected with H. nana, and from a pool comprising seven hamsters infected with T. solium. Results: Immunochromatography detected T. solium antigens in media samples with T. solium E/S antigens and in stool samples from hamsters infected with T. solium by staining of the test band. Negative results were obtained with culture media samples with E/S antigens from other helminths and in pooled stool samples from hamsters infected with H. nana as well as from non-infected animals. In all strips used the control band got stained. Conclusions: The immunocromatography assay is able to detect T. solium antigens, both in culture media and in stools from infected hamsters, but its sensitivity and specificity should be tested in human fecal samples for diagnosing Tenia infections through coproantigen detection.

Una especie nueva y nuevos registros de playthelmintos parásitos de peces marinos peruanos / A new species and new records of playthelmintos parasites of peruvian salt-water fishes

The authors present a new contribution to our knowledege o fish parasites found in the Peruvian ocean. A newly discovered species is Cynscionicola intermedia, found in the gills of the "chitita" (Xenisus peruanus H.). Other species of parasites found n the gills of one fish and another in the gills of "tollo", not recorded previously in Peruvian waters, are registered here for the first time.

Los autores presentan una nueva contribución en el conocimiento de los playhelmintos parásitos de peces de mar peruano. Esta vez se trata de trematodos monogeneos. Una especie nueva para la ciencia es Cynoscionicola intermedia encontrado en las branquias de la "chitita" Xenistius peruanus H.). Otras especies de parásitos en branquias de peces óseos y una en branquias del tollo, que no se habian encontrado antes en peces peruanos, se registran por primera vez.