Susceptibilidad antifúngica de aislados vaginales de Candida spp / Antifungal susceptibility of Candida spp. vaginal isolates

Introducción: la vulvovaginitis constituye una de las principales afecciones ginecológicas, y su causa más frecuente es la candidiasis. Candida albicans se considera el agente etiológico más importante de esta entidad; sin embargo, estudios recientes revelan un incremento en la incidencia de otras especies del género. Algunas de estas tienen la particularidad de presentar resistencia a los tratamientos usuales con antimicóticos. Objetivo: evaluar la susceptibilidad antifúngica de aislados vaginales de pacientes cubanas con sospecha de candidiasis vulvovaginal que se obtuvieron en el 2015. Métodos: a 28 aislados pertenecientes al género Candida, se les realizó las pruebas de susceptibilidad in vitro con la galería ATBTM Fungus 3 frente a diferentes antifúngicos (5-fluorocitosina, anfotericina B, fluconazol, itraconazol y voriconazol). Resultados: todos los aislados fueron sensibles a la anfotericina B y uno de C. albicans se informó resistente a los azoles estudiados. Todas las especies diferentes de C. albicans fueron susceptibles al voriconazol (CMI≤ 1 mg/L). Conclusiones: el estudio de patrones de susceptibilidad en aislados de Candida provenientes de mujeres con vulvovaginitis permite profundizar en cómo abordar la terapéutica de esta afección; el fluconazol resultó el tratamiento de elección. Los resultados alertan sobre la emergencia de C. glabrata, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. inconspicua y C. lusitaniae como agentes causales de la candidiasis vulvovaginal(AU)

Introduction: vulvovaginitis is one of the main gynecological diseases frequently caused by candidiasis. Candida albicans is considered as the most important etiological agent for the disease; however, recent students have revealed an increased incidence of other species of the genus. Some of them may show particular resistence to usual antimycotic treatments. Objective: to evaluate the antifungal susceptibility of vaginal isolates from Cuban female patients suspected of vulvovaginal candidiasis in 2015. Methods: twenty eight Candida genus isolates underwent in vitro susceptibility tests with ATBTM Fungus 3 using several antifungal agents (5 fluorocytosine, anphotericin B, fluconazole, itraconazole and vorixonazole). Results: all isolates were susceptible to B anphotericin and one C. albicans isolate was reported as resistant to the studied azoles. All the species other thanC. albicans were susceptible to voriconazole (CMI≤ 1mg/L). Conclusions: the study of susceptibility patterns in Candida isolates from women with vulvovaginitis allow delving into the different ways of approaching the therapeutics of this disease; fluconazole was the treatment of choice. The results show emergence of C. glabrata,C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. inconspicua and C. lusitaniae as causative agents of vulvovaginal candidiasis(AU)

Neurocriptococosis en el contexto de la infección con el VIH en Guayaquil, Ecuador / Neurocryptococcosis in the context of HIV infection in Guayaquil, Ecuador

Introducción: la neurocriptococosis resulta de la inhalación de levaduras del complejo de especies Cryptococcus neoformans y afecta principalmente a pacientes inmunocomprometidos, provocando altas tasas de mortalidad. Objetivo: describir la infección por Cryptococcus spp. en pacientes con VIH/sida de Guayaquil, Ecuador. Métodos: estudio descriptivo, transversal y prospectivo, entre diciembre/2013-enero/2015. Se recopilaron 82 muestras de líquido cefalorraquídeo así como los datos demográficos, clínicos y de laboratorio de igual cantidad de pacientes seropositivos al VIH ingresados en el Hospital de Infectología Dr. José Daniel Rodríguez Maridueña. La infección criptococósica se confirmó mediante examen microscópico directo del líquido cefalorraquídeo con tinta china, cultivo en agar Sabouraud y pruebas bioquímicas convencionales. El estudio cumplió con los requerimientos éticos establecidos. Resultados: el 89,02 por ciento de los pacientes incluidos en el estudio fueron de género masculino y el 45,12 por ciento del grupo etario de 20-30 años. El 33 por ciento de los pacientes presentaron la infección por C. neoformans, y sus características clínicas más frecuentes fueron: impresión diagnóstica de neuroinfección (41 por ciento), cefalea (78 por ciento; 21/27), vómitos (85 por ciento; 23/27) y pérdida de peso (89 por ciento; 24/27); niveles de CD4 < 200/uL (26 por ciento; 7/27), leucocitos 5 000-10 000 cél/mm3 (63 por ciento; 17/27), hemoglobina 11-15 g/dL (44 por ciento; 12/27) y hematócrito < 35 por ciento (78 por ciento; 21/27). Se demostró además, la existencia de una asociación entre la infección y la presencia de vómitos, pérdida de peso y adenopatías (razón de prevalencias > 1). Conclusiones: La infección criptococósica es una importante micosis oportunista en pacientes VIH-SIDA, que puede ser asociada a determinadas características, lo que permite definir mecanismos de control y prevención(AU)

Introduction: neurocryptococcosis results from inhalation of yeasts from the Cryptococcus neoformans species complex. The disease mainly affects immunocompromised patients, causing high mortality rates. Objective: describe infection due to Cryptococcus spp. in patients with HIV/AIDS from Guayaquil, Ecuador. Methods: a descriptive cross-sectional prospective study was conducted from December 2013 to January 2015. Eighty-two cerebrospinal fluid samples were collected, as well as the demographic, clinical and laboratory data of an equal number of HIV seropositive inpatients from Dr. José Daniel Rodríguez Maridueña infectious diseases hospital. Cryptococcal infection was confirmed by India ink direct microscopic examination of cerebrospinal fluid, Sabouraud agar culture and conventional biochemical tests. The study met the ethical requirements established. Results: 89.02 percent of the patients included in the study were male and 45.12 percent were in the 20-30 years age group. 33 percent had infection with C. neoformans, and their most common clinical features were diagnostic impression of neuroinfection (41 percent), headache (78 percent; 21/27), vomiting (85 percent; 23/27), weight loss (89 percent; 24/27); CD4 counts < 200/uL (26 percent; 7/27), leucocytes 5 000-10 000 cells/mm3 (63 percent; 17/27), hemoglobin 11-15 g/dL (44 percent; 12/27) and hematocrit < 35 percent (78 percent; 21/27). An association was also found between infection and the presence of vomiting, weight loss and adenopathies (prevalence ratio >1). Conclusions: cryptococcal infection is an important opportunistic mycosis in HIV/AIDS patients. It may be associated with certain features, which makes it possible to define control and prevention mechanisms(AU)

Cryptococcus and cryptococcosis in Cuba. A minireview.

Cryptococcosis has emerged as an important public health problem in Africa, Asia and the Americas due to the increasing numbers of persons at risk of this infection and the adaptation of its aetiological agents to new environments. The proper management requires early recognition of Cryptococcus neoformans/C. gattii species complex infection, familiarity with the use and limitations of diagnostic tests and knowledge of the available treatment options. This review will address these issues with the goal of providing sufficient information to suspect, diagnose and treat patients with cryptococcosis based on Cuban data and review of the literature.

Aspectos epidemiológicos, clínicos, microbiológicos y terapéuticos de la histoplasmosis / Epidemiological, clinical, microbiological and therapeutic aspects of histoplasmosis

El Histoplasma capsulatum se considera un hongo dimórfico. Constituye una micosis endémica que presenta un comportamiento oportunista. Su modo de transmisión es principalmente respiratorio, por la inhalación de conidios presentes en la naturaleza. El cuadro clínico puede variar desde infecciones asintomáticas hasta cuadros graves diseminados, sobre todo en pacientes con sida, trasplantados o con neoplasias hematológicas. El diagnóstico del hongo se obtiene de fluidos orgánicos o tejidos, el cultivo de materiales biológicos y la serología. Se utilizaron las bases de datos de Scielo, HINARI, Pubmed-Medline y diferentes textos y artículos donados por especialistas de la materia, los cuales resultaron muy útiles para confeccionar la revisión. Los trabajos encontrados mostraron una información útil y valiosa de la histoplasmosis, entidad considerada la micosis respiratoria más frecuente en pacientes inmunocompetentes y la tercera causa de muerte en pacientes con sida. El objetivo de este trabajo es presentar una actualización sobre los principales aspectos clínicos, epidemiológicos, microbiológicos y terapéuticos de la micosis sistémica más frecuentes en Cuba y en el continente americano.

Histoplasma capsulatum is considered a dimorphic fungus. It is an endemic mycosis presenting opportunistic behavior. Its transmission is mainly by respiratory inhalation of naturally occurring conidia. The clinical conditions may vary from asymptomatic infections to severe disease spread, especially in AIDS patients, transplant or with haematological malignancies patients. The diagnosis of the fungus is obtained from body fluids or tissues, the culture of biological materials and serology. The database used in this work was selected from SciELO, HINARI, PubMed, Medline databases and various texts and articles donated by specialists, which were very useful material for this review. The papers found showed useful and valuable information of histoplasmosis, which is a breathing entity considered the most common fungal infection in immuno-competent patients and the third cause of death in AIDS patients. The objective of this review is to present an update on key clinical, epidemiological, microbiological and therapeutic systemic fungal infection, which are most common in Cuba and America.

Una actualización acerca de histoplasmosis / Histoplasmosis updating

La histoplasmosis infección causada por el hongo Histoplasma capsulatum ha sido reportada en todos los continentes y se considera endémica en el continente americano, incluida Cuba. El hongo se desarrolla en el suelo con excretas de aves y murciélagos, donde es capaz de producir abundantes microconidios, que al ser inhalados por el hombre son capaces de causar la infección. El cuadro clínico puede variar, desde infecciones asintomáticas hasta cuadros diseminados graves que involucran a uno o varios órganos y sistemas y que afectan sobre todo a pacientes con sida, neoplasias hematológicas, con trasplantes u otras inmunodeficiencias. Los principales grupos de riesgo incluyen además, aquellos individuos que por razones ocupacionales se expongan los aerosoles contaminados con el hongo. El diagnóstico de laboratorio se basa en la observación de este en fluidos y tejidos orgánicos, en el cultivo de esos materiales y en la detección de anticuerpos y antígenos específicos. Los métodos moleculares, en especial mediante la reacción en cadena de la polimerasa, aunque no han sido suficientemente evaluados, pudieran representar un importante avance en el diagnóstico temprano de esta micosis. Para el tratamiento de las formas agudas moderadas, localizadas y respiratoria crónica se recomienda el itraconazol, mientras que para las formas graves y diseminadas la droga de elección es la anfotericina B, con preferencia en alguna de sus formulaciones lipídicas. La histoplasmosis representa hoy una de las micosis sistémicas más importante en las Américas, con una amplia distribución en todas las regiones de Cuba(AU)

Histoplasmosis, an infection caused by the fungus Histoplasma capsulatum, has been reported all over the world and is considered endemic in the American continent, including Cuba. This fungus grows on the soils contaminated with bird and bat excreta, where it produces a great number of microconidia that could cause the infection when they are inhaled. The clinical spectrum varies from asymptomatic infections to serious disseminated diseases involving one or many organ systems and affects mainly AIDS patients, patients with hematological neoplasias, transplant recipients or other immunosuppressed patients. The main risk groups include those individuals whose working activities make them be exposed to aerosols contaminated with H. capsulatum. Lab diagnosis is based on the microscopic observation, isolation and identification of the fungus in fluid or tissue samples of patients, and on specific antigen and antibodies detection. The molecular methods based on polymerase chain reaction have not been sufficiently defined, and they could be an important advance in the early diagnosis of this mycosis. Itraconazole is recommended for treatment of moderate, localized and chronic infection whereas amphotericin B is the drug of choice for disseminated and serious manifestations, particularly in its lipidic formulations. At present, histoplasmosis is considered one of the most important systemic mycoses in the Americas, and it is widely spread over all regions of Cuba(AU)

Una actualización acerca de histoplasmosis / Histoplasmosis updating

La histoplasmosis infección causada por el hongo Histoplasma capsulatum ha sido reportada en todos los continentes y se considera endémica en el continente americano, incluida Cuba. El hongo se desarrolla en el suelo con excretas de aves y murciélagos, donde es capaz de producir abundantes microconidios, que al ser inhalados por el hombre son capaces de causar la infección. El cuadro clínico puede variar, desde infecciones asintomáticas hasta cuadros diseminados graves que involucran a uno o varios órganos y sistemas y que afectan sobre todo a pacientes con sida, neoplasias hematológicas, con trasplantes u otras inmunodeficiencias. Los principales grupos de riesgo incluyen además, aquellos individuos que por razones ocupacionales se expongan los aerosoles contaminados con el hongo. El diagnóstico de laboratorio se basa en la observación de este en fluidos y tejidos orgánicos, en el cultivo de esos materiales y en la detección de anticuerpos y antígenos específicos. Los métodos moleculares, en especial mediante la reacción en cadena de la polimerasa, aunque no han sido suficientemente evaluados, pudieran representar un importante avance en el diagnóstico temprano de esta micosis. Para el tratamiento de las formas agudas moderadas, localizadas y respiratoria crónica se recomienda el itraconazol, mientras que para las formas graves y diseminadas la droga de elección es la anfotericina B, con preferencia en alguna de sus formulaciones lipídicas. La histoplasmosis representa hoy una de las micosis sistémicas más importante en las Américas, con una amplia distribución en todas las regiones de Cuba.

Histoplasmosis, an infection caused by the fungus Histoplasma capsulatum, has been reported all over the world and is considered endemic in the American continent, including Cuba. This fungus grows on the soils contaminated with bird and bat excreta, where it produces a great number of microconidia that could cause the infection when they are inhaled. The clinical spectrum varies from asymptomatic infections to serious disseminated diseases involving one or many organ systems and affects mainly AIDS patients, patients with hematological neoplasias, transplant recipients or other immunosuppressed patients. The main risk groups include those individuals whose working activities make them be exposed to aerosols contaminated with H. capsulatum. Lab diagnosis is based on the microscopic observation, isolation and identification of the fungus in fluid or tissue samples of patients, and on specific antigen and antibodies detection. The molecular methods based on polymerase chain reaction have not been sufficiently defined, and they could be an important advance in the early diagnosis of this mycosis. Itraconazole is recommended for treatment of moderate, localized and chronic infection whereas amphotericin B is the drug of choice for disseminated and serious manifestations, particularly in its lipidic formulations. At present, histoplasmosis is considered one of the most important systemic mycoses in the Americas, and it is widely spread over all regions of Cuba.

Estudio comparativo de medición entre lecturas visuales y espectrofotométricas en pruebas de susceptibilidad in vitro de aislamientos de candida / Comparative study of measure visual and spectrophotometer lectures in a in vitro antifungal susceptibility testing in candida isolates

Se realizó un estudio de susceptibilidad in vitro frente a itraconazol, ketoconazol y clotrimazol de 144 cepas de Candida, conservadas y previamente identificadas, aisladas de la cavidad oral de pacientes infectados por el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) con cuadros clínicos de candidiasis orofaríngea (COF). El estudio se llevó a cabo mediante dos metodologías; la primera, utilizando los requerimientos del Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI), en el cual está establecida la lectura visual para determinar los patrones de susceptibilidad; y la segunda, mediante la propuesta de la European Committee on Antibiotic Susceptibility Testing, el cual tiene fijado la lectura espectrofotométrica para eliminar las posibles subjetividades de la metodología del CLSI. Los resultados obtenidos mediante ambas lecturas no mostraron diferencias mayores a dos diluciones en los valores de concentración mínima inhibitoria, y demostraron que ambos métodos se correlacionan y es importante para aquellos laboratorios de pocos recursos económicos.

A study of in vitro susceptibility was realized opposite to itraconazol, ketoconazol and clotrimazol of 144 strains of Candida, conserved and previously identified, isolated of the oral cavity of patients infected by the virus of human immunodeficiency (VIH) with clinical pictures of oropharingeal candidiasis (COF). The study was realized by means of two methodologies; the first one, using the requests of the Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI), in which the visual reading is established to determine the patterns of susceptibility; and the second one, by means of the proposal of the European Committee on Antibiotic Susceptibility Testing, which has fixed the spectrophotometric to eliminate the possible subjectivities of the methodology of the CLSI. The results obtained by means of both readings did not show differences bigger than two dilutions in the values of minimal inhibitory concentration, demonstrating that both methods are correlated and it is important for those laboratories of few economic resources.

Estudio comparativo de medición entre lecturas visuales y espectrofotométricas en pruebas de susceptibilidad in vitro de aislamientos de candida / Comparative study of measure visual and spectrophotometer lectures in a in vitro antifungal susceptibility testing in candida isolates

Se realizó un estudio de susceptibilidad in vitro frente a itraconazol, ketoconazol y clotrimazol de 144 cepas de Candida, conservadas y previamente identificadas, aisladas de la cavidad oral de pacientes infectados por el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) con cuadros clínicos de candidiasis orofaríngea (COF). El estudio se llevó a cabo mediante dos metodologías; la primera, utilizando los requerimientos del Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI), en el cual está establecida la lectura visual para determinar los patrones de susceptibilidad; y la segunda, mediante la propuesta de la European Committee on Antibiotic Susceptibility Testing, el cual tiene fijado la lectura espectrofotométrica para eliminar las posibles subjetividades de la metodología del CLSI. Los resultados obtenidos mediante ambas lecturas no mostraron diferencias mayores a dos diluciones en los valores de concentración mínima inhibitoria, y demostraron que ambos métodos se correlacionan y es importante para aquellos laboratorios de pocos recursos económicos(AU)

A study of in vitro susceptibility was realized opposite to itraconazol, ketoconazol and clotrimazol of 144 strains of Candida, conserved and previously identified, isolated of the oral cavity of patients infected by the virus of human immunodeficiency (VIH) with clinical pictures of oropharingeal candidiasis (COF). The study was realized by means of two methodologies; the first one, using the requests of the Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI), in which the visual reading is established to determine the patterns of susceptibility; and the second one, by means of the proposal of the European Committee on Antibiotic Susceptibility Testing, which has fixed the spectrophotometric to eliminate the possible subjectivities of the methodology of the CLSI. The results obtained by means of both readings did not show differences bigger than two dilutions in the values of minimal inhibitory concentration, demonstrating that both methods are correlated and it is important for those laboratories of few economic resources(AU)

Microsatellite typing and susceptibilities of serial Cryptococcus neoformans isolates from Cuban patients with recurrent cryptococcal meningitis.

BACKGROUND: Cryptococcus neoformans is commonly associated with meningoencephalitis in immunocompromised patients and occasionally in apparently healthy individuals. Recurrence of infection after initial treatment is not uncommon. We studied C. neoformans isolates from 7 Cuban patients with recurrent cryptococcal meningitis. Antifungal susceptibility and genotyping with microsatellite molecular typing were carried out. METHODS: Isolates (n = 19) were recovered from cerebrospinal fluid, blood, urine and semen. Antifungal susceptibilities for amphotericin B, fluconazole, flucytosine, itraconazole, voriconazole, posaconazole and isavuconazole were tested by CLSI M27A3 broth microdilution method. Genotyping was done using a panel of 9 microsatellite (STR) markers: (CT)n, (TG)n, (TA)n, (CTA)n, (TCT)n, (CCA)n, (TTAT)n, (ATCC)n and (TATT)n. RESULTS: The average number of isolates/patient was 2.71. The mean time interval between the collection of any two isolates was 52.5 days. All strains were identified as C. neoformans var. grubii (serotype Aα). Although none of the strains were resistant to the studied drugs, in serial isolates from two patients, MICs values of triazoles increased 4-5 log2 dilutions over time. STR patterns showed 14 distinctive profiles. In three patients the recurrent infection was associated with genotypically identical isolates. The four other patients had relapse isolates which were genotypically different from the initial infecting strain. CONCLUSION: Recurrences of cryptococcal meningitis in our series of patients was not associated with development of drug resistance of the original strain but by an initial infection with different strains or a reinfection with a new strain.

Microsatellite typing of clinical and environmental Cryptococcus neoformans var. grubii isolates from Cuba shows multiple genetic lineages.

BACKGROUND: Human cryptococcal infections have been associated with bird droppings as a likely source of infection. Studies toward the local and global epidemiology of Cryptococcus spp. have been hampered by the lack of rapid, discriminatory, and exchangeable molecular typing methods. METHODOLOGY/PRINCIPAL FINDINGS: We selected nine microsatellite markers for high-resolution fingerprinting from the genome of C. neoformans var. grubii. This panel of markers was applied to a collection of clinical (n = 122) and environmental (n = 68; from pigeon guano) C. neoformans var. grubii isolates from Cuba. All markers proved to be polymorphic. The average number of alleles per marker was 9 (range 5-51). A total of 104 genotypes could be distinguished. The discriminatory power of this panel of markers was 0.993. Multiple clusters of related genotypes could be discriminated that differed in only one or two microsatellite markers. These clusters were assigned as microsatellite complexes. The majority of environmental isolates (>70%) fell into 1 microsatellite complex containing only few clinical isolates (49 environmental versus 2 clinical). Clinical isolates were segregated over multiple microsatellite complexes. CONCLUSIONS/SIGNIFICANCE: A large genotypic variation exists in C. neoformans var. grubii. The genotypic segregation between clinical and environmental isolates from pigeon guano suggests additional source(s) of human cryptococcal infections. The selected panel of microsatellite markers is an excellent tool to study the epidemiology of C. neoformans var. grubii.

Sensibilidad in vitro de cepas de Candida frente a fluconazol y anfotericina B / In vitro susceptibility of Candida strains to fluconazole and amphotericin B

Las pruebas de sensibilidad in vitro a los agentes antifúngicos se han convertido en una necesidad actual de los laboratorios de micología médica. Se determinó la concentración mínima inhibitoria de 210 cepas de levaduras del género Candida aisladas de pacientes VIH/SIDA que presentaban lesiones orales, con el objetivo de conocer la sensibilidad a fluconazol y anfotericina B. Fue utilizado un micrométodo de dilución según el protocolo M27A2 del CLSI. C. albicans fue la especie predominante (62,4 por ciento), seguida, en orden de frecuencia, de C. glabrata, C. parapsilosis, C. krusei y C. tropicalis. Frente a la anfotericina B el valor de la moda y la CMI50 fue de 0,125 µg/mL, lo que indica la efectividad in vitro de este fármaco. Solo una cepa (C. krusei) mostró una concentración mínima inhibitoria superior a 1 µg/mL. De las cepas, 8,1 por ciento resultó resistente al fluconazol y 8,1 por ciento sensible dependiente de la dosis. Las especies que se comportaron menos sensibles fueron C. krusei y C. glabrata. Los resultados obtenidos sentaron las bases para estudios más amplios en el medio cubano y sugirieron la necesidad de continuar la vigilancia del comportamiento de los aislamientos clínicos de levaduras frente a los agentes antifúngicos(AU)

In vitro antifungal susceptibility testing is really necessary at present in medical mycology laboratories. Minimal inhibitory concentration of 210 Candida yeast strains isolated from HIV/AIDS patients with oral lesions was determined to find out susceptibility to fluconazole and amphotericin B. A CLSI´s M27A2 protocol-based dilution micromethod was used. C. albicans was predominant (62.4 percent)followed by C. glabrata, C. parapsilosis, and C. tropicalis. Regarding amphotericin B, the mode value and MIC50 were 0,125 µg/mL, which indicated the effectiveness of this drug in vitro conditions. Only C. krusei strain showed a minimal inhibitory concentration over 1 µg/mL. 8.1 percent of strains were resistent to fluconazole whereas 8.1 percent was dose- depending susceptible. The less susceptible species were C. krusei and C. glabrata. The achieved results laid the foundations for wider studies to be made in the Cuban context and indicated the need of keeping surveillance on the behaviour of clinical yeast isolates to antifungal drugs(AU)

Sensibilidad in vitro de cepas de Candida frente a fluconazol y anfotericina B / In vitro susceptibility of Candida strains to fluconazole and amphotericin B

Las pruebas de sensibilidad in vitro a los agentes antifúngicos se han convertido en una necesidad actual de los laboratorios de micología médica. Se determinó la concentración mínima inhibitoria de 210 cepas de levaduras del género Candida aisladas de pacientes VIH/SIDA que presentaban lesiones orales, con el objetivo de conocer la sensibilidad a fluconazol y anfotericina B. Fue utilizado un micrométodo de dilución según el protocolo M27A2 del CLSI. C. albicans fue la especie predominante (62,4 por ciento), seguida, en orden de frecuencia, de C. glabrata, C. parapsilosis, C. krusei y C. tropicalis. Frente a la anfotericina B el valor de la moda y la CMI50 fue de 0,125 µg/mL, lo que indica la efectividad in vitro de este fármaco. Solo una cepa (C. krusei) mostró una concentración mínima inhibitoria superior a 1 µg/mL. De las cepas, 8,1 por ciento resultó resistente al fluconazol y 8,1 por ciento sensible dependiente de la dosis. Las especies que se comportaron menos sensibles fueron C. krusei y C. glabrata. Los resultados obtenidos sentaron las bases para estudios más amplios en el medio cubano y sugirieron la necesidad de continuar la vigilancia del comportamiento de los aislamientos clínicos de levaduras frente a los agentes antifúngicos.

In vitro antifungal susceptibility testing is really necessary at present in medical mycology laboratories. Minimal inhibitory concentration of 210 Candida yeast strains isolated from HIV/AIDS patients with oral lesions was determined to find out susceptibility to fluconazole and amphotericin B. A CLSI´s M27A2 protocol-based dilution micromethod was used. C. albicans was predominant (62.4 percent)followed by C. glabrata, C. parapsilosis, and C. tropicalis. Regarding amphotericin B, the mode value and MIC50 were 0,125 µg/mL, which indicated the effectiveness of this drug in vitro conditions. Only C. krusei strain showed a minimal inhibitory concentration over 1 µg/mL. 8.1 percent of strains were resistent to fluconazole whereas 8.1 percent was dose- depending susceptible. The less susceptible species were C. krusei and C. glabrata. The achieved results laid the foundations for wider studies to be made in the Cuban context and indicated the need of keeping surveillance on the behaviour of clinical yeast isolates to antifungal drugs.

[In vitro susceptibility of Candida strains to fluconazole and amphotericin B]. / Sensibilidad in vitro de cepas de Candida frente a fluconazol y anfotericina B.

In vitro antifungal susceptibility testing is really necessary at present in medical mycology laboratories. Minimal inhibitory concentration of 210 Candida yeast strains isolated from HIV/AIDS patients with oral lesions was determined to find out susceptibility to fluconazole and amphotericin B. A CLSI's M27A2 protocol-based dilution micromethod was used. C. albicans was predominant (62.4%)followed by C. glabrata, C. parapsilosis, and C. tropicalis. Regarding amphotericin B, the mode value and MIC50 were 0.125 microg/mL, which indicated the effectiveness of this drug in vitro conditions. Only C. krusei strain showed a minimal inhibitory concentration over 1 microg/mL. 8.1% of strains were resistent to fluconazole whereas 8.1% was dose-depending susceptible. The less susceptible species were C. krusei and C. glabrata. The achieved results laid the foundations for wider studies to be made in the Cuban context and indicated the need of keeping surveillance on the behaviour of clinical yeast isolates to antifungal drugs.

Obtención de antisueros específicos para la serotipificación de Cryptococcus neoformans var. neoformans / Obtention of specific antisera for the serotyping of Cryptococcus neoformans var. neoformans

Se propuso la obtención de antisueros en el Laboratorio de Micología del Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”, que permitiera la rápida identificación de las variedades y serotipos de Cryptococcus neoformans, dada la importancia clínico-epidemiológica que reviste su conocimiento. Mediante la inmunización de conejos con células enteras formalinizadas de los 4 serotipos de esta levadura, se obtuvieron antisueros que fueron adsorbidos con células de los serotipos heterólogos; lográndose 3 antisueros capaces de diferenciar a la var. neoformans (anti AD) y a sus respectivos serotipos (anti-A y anti-D). Este trabajo contribuirá al conocimiento de la epidemiología de esta importante enfermedad en el medio cubano, por ser la primera vez en Cuba que se logra la obtención de antisueros útiles para la identificación de los serotipos pertenecientes a la variedad neoformans, principal agente causal de la criptococosis(AU)

Obtención de antisueros específicos para la serotipificación de Cryptococcus neoformans var. neoformans / Obtention of specific antisera for the serotyping of Cryptococcus neoformans var. neoformans

Se propuso la obtención de antisueros en el Laboratorio de Micología del Instituto de Medicina Tropical ôPedro Kouríö, que permitiera la rápida identificación de las variedades y serotipos de Cryptococcus neoformans, dada la importancia clínico-epidemiológica que reviste su conocimiento. Mediante la inmunización de conejos con células enteras formalinizadas de los 4 serotipos de esta levadura, se obtuvieron antisueros que fueron adsorbidos con células de los serotipos heterólogos; lográndose 3 antisueros capaces de diferenciar a la var. neoformans (anti AD) y a sus respectivos serotipos (anti-A y anti-D). Este trabajo contribuirá al conocimiento de la epidemiología de esta importante enfermedad en el medio cubano, por ser la primera vez en Cuba que se logra la obtención de antisueros útiles para la identificación de los serotipos pertenecientes a la variedad neoformans, principal agente causal de la criptococosis

Utilidad de la D-prolina en la diferenciación de las variedades de Cryptococcus neoformans / Usefulness of D-proline in the differentiation of varieties of Cryptococcus neoformans

Se realizó un estudio comparativo entre la asimilación de la D-prolina y el crecimiento en medio canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB) utilizados para la clasificación de las variedades de Cryptococcus neoformans. En las 86 cepas estudiadas, 100 por ciento de coincidencia entre ambos métodos, permitió afirmar que 95,34 por ciento pertenecían a la var. neoformans y el resto (4,65 por ciento) a la var. gattii. Los resultados obtenidos corroboraronn que todos los aislamientos clínicos autóctonos, hasta el presente, corresponden a la var. neoformans y permitieron sugerir el uso de la D-prolina para la evaluación inicial de las cepas, como un método alternativo y sencillo que presentó, en estas condiciones, alta coincidencia con el método de referencia (crecimiento en CGB)(AU)

Utilidad de la D-prolina en la diferenciación de las variedades de Cryptococcus neoformans / Usefulness of D-proline in the differentiation of varieties of Cryptococcus neoformans

Se realizó un estudio comparativo entre la asimilación de la D-prolina y el crecimiento en medio canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB) utilizados para la clasificación de las variedades de Cryptococcus neoformans. En las 86 cepas estudiadas, 100 por ciento de coincidencia entre ambos métodos, permitió afirmar que 95,34 por ciento pertenecían a la var. neoformans y el resto (4,65 por ciento) a la var. gattii. Los resultados obtenidos corroboraronn que todos los aislamientos clínicos autóctonos, hasta el presente, corresponden a la var. neoformans y permitieron sugerir el uso de la D-prolina para la evaluación inicial de las cepas, como un método alternativo y sencillo que presentó, en estas condiciones, alta coincidencia con el método de referencia (crecimiento en CGB)

[Obtention of specific antisera for the serotyping of Cryptococcus neoformans var. neoformans]. / Obtención de antisueros específicos para la serotipificación de Cryptococcus neoformans var. neoformans.

The obtention of antisera at the Mycology Laboratory of "Pedro Kouri" Institute of Tropical Medicine was proposed to allow the rapid identification of the varieties and serotypes of Cryptococcus neoformans, since it is very important from the clinico-epidemiological point of view to know them. By immunizing rabbits with formalized whole cells of the 4 serotypes of this yeast, it was possible to obtain antisera that were absorbed with cells of the heterologous serotypes. 3 antisera capable of differentiating the neoformans var. (anti AD) and its respective serotypes (anti-A and anti-D) were attained. This paper will contribute to the knowledge of the epidemiology of this important disease in the Cuban setting for being the first time that useful antisera are obtained in Cuba to identify the serotypes corrresponding to the neoformans variety, which is the main causal agent of criptococcosis.

Susceptibilidad in vitro de aislamientos vaginales de Candida frente a clotrimazol y nistatina

Se determinó la susceptibilidad in vitro frente a clotrimazol y nistatina de 123 aislamientos de Candida, obtenidos mediante exudados vaginales de 404 mujeres que asistieron al Hospital Ginecoobstétrico "Ramón González Coro" de Ciudad de La Habana. De acuerdo con el número de colonias obtenidas en el aislamiento primario, las cepas fueron separadas en 2 categorías: colonización e infección. Para cada cepa se determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI) de cada antifúngico, mediante un método de microdilución en caldo casitona. Las medias geométricas de los valores de CMI fueron mayores frente a nistatina (1,08 mg/mL) que frente a clotrimazol (0,22 mg/mL), aunque los rangos fueron similares (£ 0,125-16 mg/mL). Para Candida albicans, que fue la especie aislada con mayor frecuencia (54,5 %); las medias geométricas de los valores de la CMI fueron de 0,17 y 0,16 mg/mL para clotrimazol y de 0,71 y 0,92 mg/mL para nistatina, en ambas categorías. C. glabrata mostró el valor de CMI más elevado (16 mg/mL) frente a ambos antifúngicos. Solo los aislamientos de C. lusitaniae mostraron diferencia significativa (p < 0,01) entre los valores de CMI de nistatina de acuerdo con el número de colonias en el aislamiento primario. En aislamientos procedentes de mujeres tratadas con clotrimazol y/o nistatina en episodios anteriores de candidiasis, se observaron valores más elevados de las medias de CMI frente a nistatina que frente a clotrimazol; aunque esta diferencia no fue estadísticamente significativa.

The susceptibility in vitro of 123 isolates of Candida against clotrimazole and nystatin was determined. The isolates were obtained by vaginal smears from 404 women that attended "Ramón Gonzalez Coro" Gynecoobstetric Hospital, in Havana City According to the number of colonies obtained in the primary isolation, the strains were separated into 2 categories: colonization and infection. The inhibitory minimum concentration was determined for each antigunfal by a method of microdilution in casitone broth. The geometrical means of the IMC values were higher against nystatin (1.08 mg/mL) than against clotrimazole (0.22 mg/mL), eventhough the features were similar ( £ 0.125 -16 mg/mL) For Candida albicans, that was the most frequently isolated species (54.5 %), the geometrical means of the IMC values were 0.17 and 0.16 mg/mL for clotrimazole and 0.71 and 0.92 for nystatin, in both categories. C. glabrata showed the highest IMC values (16 mg/mL) against antifungals. Only the isolates of C. lusitaniae showed a significant difference (p < 0.001) between the IMC values of nystatin according to the number of colonies in the primary isolation. In isolates from women treated with clotrimazole and/or nystatin in previous episodes of candidiasis, there were observed more elevated values of the means of IMC against nystatin than against clotrimazole, although this difference was not statistically remarkable.