ABSTRACT
The objective of this study was to describe phenotypically and biochemically the symbiotic bacteria associated with three populations of Heterorhabditis amazonensis Andalo et al., 2006 (isolates: UEL-n 01, UEL-n 07, and UEL-n 08) and evaluate their pathogenicity on Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae) larvae. Bacteria were isolated by maceration of infective juveniles (IJs) and grown in culture medium (NBTA and MacConkey). The characterization of the bacteria was evaluated by employing motility test and biochemical tests like Gram staining, lipase activity, protease, and lecithinase. The production of antibiotics and bioluminescence was also evaluated. The pathogenicity was evaluated on the last instar larvae of G. mellonella at a concentration of 104 cells/mL. The bacteria from the three entomopathogenic nematodes isolates were positive for all biochemical tests except for lecithinase, and have presented bioluminescence when subjected to ultraviolet light, indicating that they belong to the genus Photorhabdus sp. Both were pathogenic to G. mellonella larvae causing 93.3 to 100.0% mortality.(AU)
O objetivo desse trabalho foi descrever fenotípica e bioquimicamente as bactérias simbiontes associadas a três isolados do nematoide Heterorhabditis amazonensis Andalo et al., 2006 (isolates: UEL-n 01, UEL-n 07, and UEL-n 08) e avaliar sua patogenicidade sobre lagartas de Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae). As bactérias foram isoladas por meio de macerado de juvenis infectantes (JIs) e cultivadas em meio de cultura (NBTA e MacConkey). A caracterização das bactérias foi realizada por meio de testes de motilidade e bioquímicos de coloração de Gram, atividade de lipase, protease e lecitinase. Avaliou-se também a produção de antibióticos e de bioluminescência. A patogenicidade foi avaliada em lagartas de G. mellonella na concentração de 104 células/mL. Observou-se que as bactérias dos três isolados de nematoides entomopatogênicos foram positivas para todos os testes bioquímicos, com exceção da lecitinase, e apresentaram bioluminescência quando submetidas a luz ultravioleta, indicando que estas cepas pertencem ao gênero Photorhabdus sp. Ambas foram patogênicas às lagartas de G. mellonellacausando mortalidade entre 93,3 e 100,0%.(AU)
Subject(s)
Rhabditida/isolation & purification , Lepidoptera , Phenotype , Virulence , BiochemistryABSTRACT
Objetivou-se selecionar isolados nativos de nematoides entomopatogênicos (NEPs) e avaliar o efeito da cama de aviário na sua patogenicidade e virulência, visando o controle do cascudinho de aviário. Foram utilizados 18 isolados (Steinernema e Heterorhabditis) no teste de seleção e os três isolados mais virulentos foram utilizados no teste de concentrações (10, 20, 40, 50 juvenis infectantes (JIs)/cm²). O efeito da cama de aviário (nova e velha) foi avaliado sobre S. feltiae (IBCB-n 47), S. carpocapse (IBCB-n 02), H. bacteriophora e H. amazonensis (UEL 08). Os experimentos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado. Os dados do teste de seleção e efeito da cama foram submetidos ao teste de médias Scott-Knott (P?0,05) e, do teste de concentrações à análise de regressão. Observou-se no teste de seleção para adultos, que os três isolados mais virulentos foram Heterorhabditis amazonensis (UEL 07), H. amazonensis (RSC 05) e Steinernema carpocapsae (IBCB-n 02) com 76,5; 73,5; 70% mortalidade respectivamente. Para larvas, Heterorhabditis sp. (NEPETT 11), S. feltiae (IBCB-n 47), H. amazonensis. (UEL 07) foram os mais virulentos e causaram 100; 96; 93,7% de mortalidade respectivamente. No teste de concentrações, a maior mortalidade em adultos (98%) e larvas (98%) foi observada para S. feltiae nas concentrações de 30 JIs/cm² e 50JIs/cm² respectiv
O cascudinho causa grande prejuízo para a avicultura. Seu controle é dificultado, devido ao hábito do inseto de viver em meio a cama de aviário. Por outro lado, os nematoides entomopatogênicos (NEPs) podem ser uma alternativa no controle destes insetos, pois são indicados contra pragas que vivem ou passam uma fase no solo. Desta forma objetivou-se selecionar isolados nativos de NEPs e avaliar o efeito da cama de aviário na sua patogenicidade e virulência, visando o controle do cascudinho de aviário. Foram utilizados 14 isolados nativos e dois isolados importados no teste de seleção e os três isolados mais virulentos foram utilizados no teste de concentrações (10, 20, 40, 50 juvenis infectantes (JIs)/cm²). Ambos experimentos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado, sendo que os dados do teste de seleção foram submetidos a teste de média Scott-Knott (P ≤ 0,05) e o teste de concentrações à análise de regressão. O efeito da cama de aviário (nova e velha) foi avaliado sobre Steinernema feltiae (IBCB-n 47), Steinernema carpocapse (All), e Heterorhabditis amazonensis (UEL 08), e o ensaio foi conduzido em fatorial 2 x 3 (dois tipos de cama e três isolados), e os dados foram submetidos ao teste de médias Tukey (P ≤ 0,05). Observou-se no teste de seleção para adultos, que os três isolados mais virulentos foram Heterorhabditis amazonensis (UEL 07), H. amazonensis (RSC 05) e S. carpocapsae (All) com 76,5; 73,5; 70% mortalidade, respectivamente. Para larvas, os isolados Heterorhabditis sp. (NEPET 11), S. feltiae (IBCB-n 47), H. amazonensis (UEL 07), Heterorhabditis sp. (IBCB-n40) e H. amazonensis (UEL 08) foram os mais virulentos e diferiram estatisticamente. No teste de concentrações, a maior mortalidade em adultos (98%) e larvas (98%) foi observada para S. feltiae nas concentrações de 30 JIs/cm² e 50JIs/cm² respectivamente, e o isolado nativo avaliado (UEL 07) foi o que apresentou o pior desempenho. Com relação ao efeito da cama de aviário, observou-se que S. feltiae (IBCB-n 47) e S. carpocapse (All) causaram as maiores mortalidades, tanto em cama nova (60,7 e 58,7%) quanto em cama velha (80 e 74,7%) respectivamente sendo também superiores ao desempenho do isolado nativo (UEL 08)(AU)
Subject(s)
Nematode Infections , Coleoptera/parasitology , Pest Control, Biological , Virulence Factors/analysisABSTRACT
Objetivou-se selecionar isolados nativos de nematoides entomopatogênicos (NEPs) e avaliar o efeito da cama de aviário na sua patogenicidade e virulência, visando o controle do cascudinho de aviário. Foram utilizados 18 isolados (Steinernema e Heterorhabditis) no teste de seleção e os três isolados mais virulentos foram utilizados no teste de concentrações (10, 20, 40, 50 juvenis infectantes (JIs)/cm²). O efeito da cama de aviário (nova e velha) foi avaliado sobre S. feltiae (IBCB-n 47), S. carpocapse (IBCB-n 02), H. bacteriophora e H. amazonensis (UEL 08). Os experimentos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado. Os dados do teste de seleção e efeito da cama foram submetidos ao teste de médias Scott-Knott (P?0,05) e, do teste de concentrações à análise de regressão. Observou-se no teste de seleção para adultos, que os três isolados mais virulentos foram Heterorhabditis amazonensis (UEL 07), H. amazonensis (RSC 05) e Steinernema carpocapsae (IBCB-n 02) com 76,5; 73,5; 70% mortalidade respectivamente. Para larvas, Heterorhabditis sp. (NEPETT 11), S. feltiae (IBCB-n 47), H. amazonensis. (UEL 07) foram os mais virulentos e causaram 100; 96; 93,7% de mortalidade respectivamente. No teste de concentrações, a maior mortalidade em adultos (98%) e larvas (98%) foi observada para S. feltiae nas concentrações de 30 JIs/cm² e 50JIs/cm² respectiv
O cascudinho causa grande prejuízo para a avicultura. Seu controle é dificultado, devido ao hábito do inseto de viver em meio a cama de aviário. Por outro lado, os nematoides entomopatogênicos (NEPs) podem ser uma alternativa no controle destes insetos, pois são indicados contra pragas que vivem ou passam uma fase no solo. Desta forma objetivou-se selecionar isolados nativos de NEPs e avaliar o efeito da cama de aviário na sua patogenicidade e virulência, visando o controle do cascudinho de aviário. Foram utilizados 14 isolados nativos e dois isolados importados no teste de seleção e os três isolados mais virulentos foram utilizados no teste de concentrações (10, 20, 40, 50 juvenis infectantes (JIs)/cm²). Ambos experimentos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado, sendo que os dados do teste de seleção foram submetidos a teste de média Scott-Knott (P ≤ 0,05) e o teste de concentrações à análise de regressão. O efeito da cama de aviário (nova e velha) foi avaliado sobre Steinernema feltiae (IBCB-n 47), Steinernema carpocapse (All), e Heterorhabditis amazonensis (UEL 08), e o ensaio foi conduzido em fatorial 2 x 3 (dois tipos de cama e três isolados), e os dados foram submetidos ao teste de médias Tukey (P ≤ 0,05). Observou-se no teste de seleção para adultos, que os três isolados mais virulentos foram Heterorhabditis amazonensis (UEL 07), H. amazonensis (RSC 05) e S. carpocapsae (All) com 76,5; 73,5; 70% mortalidade, respectivamente. Para larvas, os isolados Heterorhabditis sp. (NEPET 11), S. feltiae (IBCB-n 47), H. amazonensis (UEL 07), Heterorhabditis sp. (IBCB-n40) e H. amazonensis (UEL 08) foram os mais virulentos e diferiram estatisticamente. No teste de concentrações, a maior mortalidade em adultos (98%) e larvas (98%) foi observada para S. feltiae nas concentrações de 30 JIs/cm² e 50JIs/cm² respectivamente, e o isolado nativo avaliado (UEL 07) foi o que apresentou o pior desempenho. Com relação ao efeito da cama de aviário, observou-se que S. feltiae (IBCB-n 47) e S. carpocapse (All) causaram as maiores mortalidades, tanto em cama nova (60,7 e 58,7%) quanto em cama velha (80 e 74,7%) respectivamente sendo também superiores ao desempenho do isolado nativo (UEL 08)
Subject(s)
Coleoptera/parasitology , Pest Control, Biological , Virulence Factors/analysis , Nematode InfectionsABSTRACT
Infestações e danos de Dichelops melacanthus (Dallas) (Hemiptera: Pentatomidae), na cultura do milho e trigo no Brasil tem aumentado nos últimos anos, principalmente devido à sua capacidade de sobreviver ao período de entressafra. O controle deste inseto é realizado principalmente com inseticidas químicos, porém o desenvolvimento de métodos alternativos, como o controle biológico, pode contribuir para um manejo mais sustentável. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial de nematoides entomopatogênicos (NEPs) no controle de D. melacanthus. O teste de seleção foi realizado com 15 isolados dos gêneros Steinernema e Heterorhabditis quanto à patogenicidade e virulência sobre adultos de D. melacanthus. Foram realizados, também, teste de concentrações (10, 20, 40, 50 e 100 juvenis infectantes (JIs)/cm²) e teste em casa-de-vegetação, nos quais utilizou-se apenas o isolado Steinernema feltiae (IBCB-n 47). Todos os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado. Os dados do teste de seleção foram submetidos ao teste de médias de Scott-Knott (P ≤ 0,05) e os do ensaio em casa-de-vegetação ao Teste-t de Student. Os resultados do ensaio de concentrações foram submetidos à análise de regressão. Todos os isolados apresentaram patogenicidade e virulência sobre adultos de D. melacanthus. Os isolados GL (Heterorhabditis amazonensis), IBCB-n27 (Steinernema sp.) e RSC05 (H. amazonensis) foram os mais virulentos (80,0; 82,0 e 88,0% de mortalidade respectivamente). As concentrações mais altas de S. feltiae (50 e 100 JIs/cm²) foram responsáveis pelas maiores taxas de mortalidade dos percevejos (88,0 e 86,0% respectivamente). No teste realizado em casa-de-vegetação, S. feltiae causou mortalidade (38%) superior ao controle.(AU)
Infestations of Dichelops melacanthus (Dallas; Hemiptera: Pentatomidae) in corn and wheat in Brazil, and the subsequent damage, have increased in recent years, mainly owing to this insects ability to survive the off-season. The control of this insect is mainly carried out with chemical insecticides, but the development of alternative methods, such as biological control, can contribute to a more sustainable management. Thus, the objective of this study was to evaluate the potential of entomopathogenic nematodes (EPNs) for the control of D. melacanthus. A selection test was performed with 15 isolates of genera Steinernema and Heterorhabditis regarding their pathogenicity and virulence on adults of D. melacanthus. Concentration (10, 20, 40, 50, and 100 infective juveniles (IJs)/cm2) and greenhouse tests were carried out only with the Steinernema feltiae isolate (IBCB-n 47). All experiments were conducted in a completely randomized design. The selection test data were submitted to the Scott-Knott averages test (P ≤ 0.05), and those from the greenhouse test to the Students t-test. The results of the concentration assay were subjected to regression analysis. All isolates showed pathogenicity and virulence in adults of D. melacanthus. The isolates GL (Heterorhabditis amazonensis), IBCB-n27 (Steinernema sp.), and RSC05 (H. amazonensis) were the most virulent (80.0, 82.0, and 88.0% mortality, respectively). The higher concentrations of S. feltiae (50 and 100 IJs/cm²) were responsible for the highest mortality rates of green belly stink bug (88.0 and 86.0%, respectively). In the greenhouse test, S. feltiae caused higher mortality (38%) than the control.(AU)
Subject(s)
Animals , Hemiptera , Zea mays , Triticum , Pest Control, Biological/methods , Insect Control/methods , Nematoda/pathogenicity , Virulence , Rhabditida/pathogenicity , Agricultural PestsABSTRACT
Infestações e danos de Dichelops melacanthus (Dallas) (Hemiptera: Pentatomidae), na cultura do milho e trigo no Brasil tem aumentado nos últimos anos, principalmente devido à sua capacidade de sobreviver ao período de entressafra. O controle deste inseto é realizado principalmente com inseticidas químicos, porém o desenvolvimento de métodos alternativos, como o controle biológico, pode contribuir para um manejo mais sustentável. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial de nematoides entomopatogênicos (NEPs) no controle de D. melacanthus. O teste de seleção foi realizado com 15 isolados dos gêneros Steinernema e Heterorhabditis quanto à patogenicidade e virulência sobre adultos de D. melacanthus. Foram realizados, também, teste de concentrações (10, 20, 40, 50 e 100 juvenis infectantes (JIs)/cm²) e teste em casa-de-vegetação, nos quais utilizou-se apenas o isolado Steinernema feltiae (IBCB-n 47). Todos os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado. Os dados do teste de seleção foram submetidos ao teste de médias de Scott-Knott (P ≤ 0,05) e os do ensaio em casa-de-vegetação ao Teste-t de Student. Os resultados do ensaio de concentrações foram submetidos à análise de regressão. Todos os isolados apresentaram patogenicidade e virulência sobre adultos de D. melacanthus. Os isolados GL (Heterorhabditis amazonensis), IBCB-n27 (Steinernema sp.) e RSC05 (H. amazonensis) foram os mais virulentos (80,0; 82,0 e 88,0% de mortalidade respectivamente). As concentrações mais altas de S. feltiae (50 e 100 JIs/cm²) foram responsáveis pelas maiores taxas de mortalidade dos percevejos (88,0 e 86,0% respectivamente). No teste realizado em casa-de-vegetação, S. feltiae causou mortalidade (38%) superior ao controle.
Infestations of Dichelops melacanthus (Dallas; Hemiptera: Pentatomidae) in corn and wheat in Brazil, and the subsequent damage, have increased in recent years, mainly owing to this insects ability to survive the off-season. The control of this insect is mainly carried out with chemical insecticides, but the development of alternative methods, such as biological control, can contribute to a more sustainable management. Thus, the objective of this study was to evaluate the potential of entomopathogenic nematodes (EPNs) for the control of D. melacanthus. A selection test was performed with 15 isolates of genera Steinernema and Heterorhabditis regarding their pathogenicity and virulence on adults of D. melacanthus. Concentration (10, 20, 40, 50, and 100 infective juveniles (IJs)/cm2) and greenhouse tests were carried out only with the Steinernema feltiae isolate (IBCB-n 47). All experiments were conducted in a completely randomized design. The selection test data were submitted to the Scott-Knott averages test (P ≤ 0.05), and those from the greenhouse test to the Students t-test. The results of the concentration assay were subjected to regression analysis. All isolates showed pathogenicity and virulence in adults of D. melacanthus. The isolates GL (Heterorhabditis amazonensis), IBCB-n27 (Steinernema sp.), and RSC05 (H. amazonensis) were the most virulent (80.0, 82.0, and 88.0% mortality, respectively). The higher concentrations of S. feltiae (50 and 100 IJs/cm²) were responsible for the highest mortality rates of green belly stink bug (88.0 and 86.0%, respectively). In the greenhouse test, S. feltiae caused higher mortality (38%) than the control.
Subject(s)
Animals , Pest Control, Biological/methods , Insect Control/methods , Hemiptera , Nematoda/pathogenicity , Agricultural Pests , Rhabditida/pathogenicity , Triticum , Virulence , Zea maysABSTRACT
Attack by the coffee berry borer Hypothenemus hampei causes significant damage to coffee crops because it affects the quality of the coffee fruit during different developmental stages, which results in production losses. Control of the borer is difficult owing to its cryptic behavior and the fact that it spends its entire life cycle inside the coffee berries. This makes it difficult for natural enemies to reach it, as well as for it to come into contact with chemical insecticides. The objective of the present study was to select and evaluate the virulence of entomopathogenic nematodes (EPNs) on the coffee berry borer H. hampei and their compatibility with the insecticide cyantraniliprole under laboratory conditions. Initially, the pathogenicity and virulence of 16 isolates of Steinernema and Heterorhabditis towards coffee berry borer larvae and adults were evaluated. The most virulent isolates to both larvae and adults were determined by topical inoculation tests in coffee fruits (berries) infested by the insect, using a concentration of 100 infective juveniles (IJs)/fruit. The same isolates were also evaluated for viability and infectivity when combined with cyantraniliprole. The isolates S. feltiae (IBCB-n 47) and Heterorhabditis amazonensis (GL) displayed the highest virulence towards adults (54%). For larvae, we observed a high virulence of S. feltiae, Heterorhabditis amazonensis, Heterorhabditis indica, Heterorhabditis sp. (JPM4), Heterorhabditis sp. (NEPET 11), Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46), and Heterorhabditis sp. (IBCB-n 44) that promoted 100% mortality. Regarding the topical inoculation test on infested fruits, S. feltiae and Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46) were unable to penetrate the fruit through the hole made by the borer, infect, and cause the death of insects. Cyantraniliprole formulation affected the viability of IJs of S. feltiae and Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46), mainly after 48 h of exposure.(AU)
A broca-do-café Hypothenemus hampei causa significativos prejuízos a esta cultura, pois seu ataque afeta a qualidade dos frutos de café em seus diferentes estádios de desenvolvimento e consequentemente leva a perdas na produção. O controle é dificultado devido ao seu comportamento críptico, uma vez que passa todo o ciclo dentro dos frutos de café, dificultando a ação de inimigos naturais, bem como o contato com inseticidas químicos. O objetivo deste estudo foi avaliar a virulência de nematoides entomopatogênicos (NEPs) sobre a broca-do-café H. hampei e a sua compatibilidade com o inseticida ciantraniliprole em condições de laboratório. Inicialmente, foram avaliadas a patogenicidade e virulência de 16 isolados de Steinernema e Heterorhabditis para larvas e adultos de H. hampei. Os isolados mais virulentos para larvas e adultos foram utilizados no teste de inoculação tópica em frutos de café infestados pelo inseto, utilizando uma concentração de 100 juvenis infectantes (JIs)/fruto. Os mesmos isolados também foram avaliados quanto à viabilidade e à infectividade quando combinados com ciantraniliprole. Os isolados Steinernema feltiae (IBCB-n 47) e Heterorhabditis amazonensis (GL) foram os que apresentaram maior porcentagem de mortalidade sobre os adultos (54%). Para larvas, observou-se alta virulência dos isolados S. feltiae, H. amazonensis, H. indica, Heterorhabditis sp. (JPM4), Heterorhabditis sp. (NEPET11), Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46) e Heterorhabditis sp. (IBCB-n 44) que promoveram 100% de mortalidade. Quanto ao teste de inoculação tópica sobre frutos infestados, observou-se que tanto S. feltiae quanto Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46) não foram capazes de penetrar o fruto pelo orifício feito pela broca, infectar e causar a morte dos insetos. A formulação de ciantraniliprole afetou a viabilidade dos JIs de S. feltiae e Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46), principalmente após 48 horas de exposição.(AU)
Subject(s)
Pest Control, Biological/methods , Weevils/growth & development , Weevils/parasitology , Coffea/growth & development , Coffea/parasitology , Rhabditida/parasitology , Pesticides/analysis , Insecticides/analysis , Pest Control/methodsABSTRACT
Attack by the coffee berry borer Hypothenemus hampei causes significant damage to coffee crops because it affects the quality of the coffee fruit during different developmental stages, which results in production losses. Control of the borer is difficult owing to its cryptic behavior and the fact that it spends its entire life cycle inside the coffee berries. This makes it difficult for natural enemies to reach it, as well as for it to come into contact with chemical insecticides. The objective of the present study was to select and evaluate the virulence of entomopathogenic nematodes (EPNs) on the coffee berry borer H. hampei and their compatibility with the insecticide cyantraniliprole under laboratory conditions. Initially, the pathogenicity and virulence of 16 isolates of Steinernema and Heterorhabditis towards coffee berry borer larvae and adults were evaluated. The most virulent isolates to both larvae and adults were determined by topical inoculation tests in coffee fruits (berries) infested by the insect, using a concentration of 100 infective juveniles (IJs)/fruit. The same isolates were also evaluated for viability and infectivity when combined with cyantraniliprole. The isolates S. feltiae (IBCB-n 47) and Heterorhabditis amazonensis (GL) displayed the highest virulence towards adults (54%). For larvae, we observed a high virulence of S. feltiae, Heterorhabditis amazonensis, Heterorhabditis indica, Heterorhabditis sp. (JPM4), Heterorhabditis sp. (NEPET 11), Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46), and Heterorhabditis sp. (IBCB-n 44) that promoted 100% mortality. Regarding the topical inoculation test on infested fruits, S. feltiae and Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46) were unable to penetrate the fruit through the hole made by the borer, infect, and cause the death of insects. Cyantraniliprole formulation affected the viability of IJs of S. feltiae and Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46), mainly after 48 h of exposure.
A broca-do-café Hypothenemus hampei causa significativos prejuízos a esta cultura, pois seu ataque afeta a qualidade dos frutos de café em seus diferentes estádios de desenvolvimento e consequentemente leva a perdas na produção. O controle é dificultado devido ao seu comportamento críptico, uma vez que passa todo o ciclo dentro dos frutos de café, dificultando a ação de inimigos naturais, bem como o contato com inseticidas químicos. O objetivo deste estudo foi avaliar a virulência de nematoides entomopatogênicos (NEPs) sobre a broca-do-café H. hampei e a sua compatibilidade com o inseticida ciantraniliprole em condições de laboratório. Inicialmente, foram avaliadas a patogenicidade e virulência de 16 isolados de Steinernema e Heterorhabditis para larvas e adultos de H. hampei. Os isolados mais virulentos para larvas e adultos foram utilizados no teste de inoculação tópica em frutos de café infestados pelo inseto, utilizando uma concentração de 100 juvenis infectantes (JIs)/fruto. Os mesmos isolados também foram avaliados quanto à viabilidade e à infectividade quando combinados com ciantraniliprole. Os isolados Steinernema feltiae (IBCB-n 47) e Heterorhabditis amazonensis (GL) foram os que apresentaram maior porcentagem de mortalidade sobre os adultos (54%). Para larvas, observou-se alta virulência dos isolados S. feltiae, H. amazonensis, H. indica, Heterorhabditis sp. (JPM4), Heterorhabditis sp. (NEPET11), Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46) e Heterorhabditis sp. (IBCB-n 44) que promoveram 100% de mortalidade. Quanto ao teste de inoculação tópica sobre frutos infestados, observou-se que tanto S. feltiae quanto Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46) não foram capazes de penetrar o fruto pelo orifício feito pela broca, infectar e causar a morte dos insetos. A formulação de ciantraniliprole afetou a viabilidade dos JIs de S. feltiae e Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46), principalmente após 48 horas de exposição.
Subject(s)
Coffea/growth & development , Coffea/parasitology , Pest Control, Biological/methods , Pest Control/methods , Weevils/growth & development , Weevils/parasitology , Insecticides/analysis , Pesticides/analysis , Rhabditida/parasitologyABSTRACT
The difficulty of storage and conservation of entomopathogenic nematodes (ENPs) is one of the major obstacles for the expansion of its use in the control of biological pest and in the maintenance of collections of these organisms. The objective of this study was to evaluate cryopreservation as a storage and conservation method for ENPs, using glycerol as cryoprotectant. Infective juveniles (IJs) of the species Heterorhabditis amazonensis (RSC 05), H. bacteriophora (HP88), Steinernema feltiae (Sn) and S. carpocapse (IBCB-n02) were subjected to the following treatments: (A) immersion in glycerol at different concentrations (10, 13 and 15%); (B) different exposure times of the isolates to glycerol (24 and 48 hours); and (C) two freezing times in liquid nitrogen (LN) at 196 ºC (24 and 168 hours). Each treatment was replicated four times, and the design was completely randomized in a factorial 3x2x2 (glycerol concentrations x glycerol exposure time x freezing time in LN). IJs survival was evaluated after each exposure time to glycerol and freezing time in LN. Data were subjected to analysis of variance, and means were compared by the Tukey test. S. feltiae and S. carpocapse survived when exposed to glycerol at 10, 13 and 15% for 24 and 48 hours. After storage in LN for 24 and 168 hours, only S. feltiae survived when exposed to glycerol for 48 hours at concentrations of 10, 13 and 15%, with 40.5; 58.2; and 57.7% survival, respectively. S. feltiae was able to infect Galleria mellonella larvae after freezing. However, for the freezing time of 168 hours, 90% reduction in infectivity was observed.
A dificuldade de armazenamento e conservação de nematoides entomopatogênicos (NEPs) é um dos principais obstáculos para ampliar seu uso no controle biológico de pragas bem como na manutenção de coleções destes organismos. O objetivo deste estudo foi avaliar a criopreservação como método de armazenamento e conservação de NEPs utilizando o glicerol como crioprotetor. Juvenis infectantes (JIs) das espécies Heterorhabditis amazonensis (RSC 05), H. bacteriophora (HP88), Steinernerma feltiae (Sn) e S. carpocapsae (IBCB-n02) foram submetidos aos seguintes tratamentos: (A) imersão em glicerol em diferentes concentrações (10, 13 e 15%), (B) diferentes tempos de exposição dos isolados ao glicerol (24 e 48 horas) e (C) dois tempos de congelamento em nitrogênio líquido (NL) a 196 ºC (24 e 168 horas). Cada tratamento teve quatro repetições e o delineamento foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 3x2x2 (concentrações de glicerol x tempo de exposição ao glicerol x tempo de congelamento). A sobrevivência dos JIs foi avaliada após cada tempo de exposição ao glicerol e tempo de congelamento em NL, e os dados submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey. S. feltiae e S. carpocapse sobreviveram quando expostos ao glicerol a 10, 13 e 15% por 24 e 48 horas. Após armazenamento em NL por 24 e 168 horas, somente S. feltiae sobreviveu quando exposto ao glicerol por 48 horas nas concentrações de 10, 13 e 15%, com 40,5; 58,2; 57,7% de sobrevivência respectivamente. S. feltiae foi capaz de infectar lagartas de Galleria mellonella após o congelamento, entretanto, para o tempo de 168 horas de congelamento foi observada uma redução de 90% na infectividade.
Subject(s)
Animals , Cryoprotective Agents/administration & dosage , Cryoprotective Agents/chemistry , Glycerol/administration & dosage , NematodaABSTRACT
The difficulty of storage and conservation of entomopathogenic nematodes (ENPs) is one of the major obstacles for the expansion of its use in the control of biological pest and in the maintenance of collections of these organisms. The objective of this study was to evaluate cryopreservation as a storage and conservation method for ENPs, using glycerol as cryoprotectant. Infective juveniles (IJs) of the species Heterorhabditis amazonensis (RSC 05), H. bacteriophora (HP88), Steinernema feltiae (Sn) and S. carpocapse (IBCB-n02) were subjected to the following treatments: (A) immersion in glycerol at different concentrations (10, 13 and 15%); (B) different exposure times of the isolates to glycerol (24 and 48 hours); and (C) two freezing times in liquid nitrogen (LN) at 196 ºC (24 and 168 hours). Each treatment was replicated four times, and the design was completely randomized in a factorial 3x2x2 (glycerol concentrations x glycerol exposure time x freezing time in LN). IJs survival was evaluated after each exposure time to glycerol and freezing time in LN. Data were subjected to analysis of variance, and means were compared by the Tukey test. S. feltiae and S. carpocapse survived when exposed to glycerol at 10, 13 and 15% for 24 and 48 hours. After storage in LN for 24 and 168 hours, only S. feltiae survived when exposed to glycerol for 48 hours at concentrations of 10, 13 and 15%, with 40.5; 58.2; and 57.7% survival, respectively. S. feltiae was able to infect Galleria mellonella larvae after freezing. However, for the freezing time of 168 hours, 90% reduction in infectivity was observed.(AU)
A dificuldade de armazenamento e conservação de nematoides entomopatogênicos (NEPs) é um dos principais obstáculos para ampliar seu uso no controle biológico de pragas bem como na manutenção de coleções destes organismos. O objetivo deste estudo foi avaliar a criopreservação como método de armazenamento e conservação de NEPs utilizando o glicerol como crioprotetor. Juvenis infectantes (JIs) das espécies Heterorhabditis amazonensis (RSC 05), H. bacteriophora (HP88), Steinernerma feltiae (Sn) e S. carpocapsae (IBCB-n02) foram submetidos aos seguintes tratamentos: (A) imersão em glicerol em diferentes concentrações (10, 13 e 15%), (B) diferentes tempos de exposição dos isolados ao glicerol (24 e 48 horas) e (C) dois tempos de congelamento em nitrogênio líquido (NL) a 196 ºC (24 e 168 horas). Cada tratamento teve quatro repetições e o delineamento foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 3x2x2 (concentrações de glicerol x tempo de exposição ao glicerol x tempo de congelamento). A sobrevivência dos JIs foi avaliada após cada tempo de exposição ao glicerol e tempo de congelamento em NL, e os dados submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey. S. feltiae e S. carpocapse sobreviveram quando expostos ao glicerol a 10, 13 e 15% por 24 e 48 horas. Após armazenamento em NL por 24 e 168 horas, somente S. feltiae sobreviveu quando exposto ao glicerol por 48 horas nas concentrações de 10, 13 e 15%, com 40,5; 58,2; 57,7% de sobrevivência respectivamente. S. feltiae foi capaz de infectar lagartas de Galleria mellonella após o congelamento, entretanto, para o tempo de 168 horas de congelamento foi observada uma redução de 90% na infectividade.(AU)