Fertility-associated proteins in Nelore bull sperm membranes.

The present study was undertaken to evaluate the protein composition of the sperm membranes (SM) of Nelore bulls, assessing protein markers associated with bull fertility, and whether these markers can be used for predicting bull fertility. Samples were obtained of 20 Nelore bulls, with fertility ranked and divided into three groups (greater, normal and least). To rank the bull's fertility weighted classification was used (according to the number of pregnant cows, number of AI cows and number of herds, considering three different breeding seasons), using the PROC GENMOD as a statistical model, with 99% significance. A total of 7897 Nelore cows, randomly distributed among 28 different farms, were considered in the statistical analyses. The bulls were divided into three fertility groups (pregnancy rates): greater (%F > 80), normal (79 < %F > 71) and least (< 68%F) with 3, 13 and 4 bulls, respectively. Two-dimensional gel electrophoresis (2DE) of sperm membranes indicated in 27 spots (SM40, SM53, SM69, SM93, SM102, SM111, SM137, SM138, SM189, SM196, SM201, SM202, SM204, SM225, SM236, SM237, SM239, SM241, SM246, SM247, SM275, SM283, SM342, SM346, SM355, SM372, SM391) was prevalent in the higher fertility group, and just one spot (SM244) was prevalent in the lower fertility group. Spots SM244 and SM239 had their identification defined by PMF/MALDI-MS, as BSP-A3 and aSFP, respectively. Both these proteins showed a great potential for predicting bull's fertility. The amount of aSFP was 8.5 times greater in the sperm membrane protein profile of the higher fertility groups of Nelore bulls. Besides that, the BSP-A3 was 2.5 times greater in the lower fertility group. For the other spots potentially associated with fertility not yet identified, additional tests will be necessary, but it is clear that the 2D electrophoresis of the sperm membrane can be used for a new approach to predict Nelore bull fertility.

Sexagem de embriöes bovinos fecundados in vitro pela técnica de PCR multiplex / Sexing of in vitro fertilized bovine embryos by multiplex PCR

Neste trabalho, a técnica de PCR ("polymerase chain reaction") foi utilizada para a sexagem de 92 embriöes bovinos fertilizados in vitro. Os embriöes originaram-se de fertilizaçäo in vitro de oócitos aspirados de ovários de fêmeas bovinas, provenientes de abatedouros comerciais. Os oócitos foram maturados, fertilizados e cultivados até o estádio de blastocisto. Os embriöes foram lavados em soluçäo de PBS, transferidos para tubos de polipropileno contendo água ultrapura, e imediatamente congelados a -196§C. Os embriöes foram descongelados sobre isopor contendo gelo picado e tratados com proteinase K. Para a reaçäo de PCR, utilizaram-se alíquotas de 34 µl de cada tudo, onde foram acrescidos dois pares de primers, seqüência BC1.2 e seqüência satélite 1.715, desoxinucleotídeos, MgCl2, tampao PCR 10X, TaqDNA polimerase e água, em um volume final de 50 µl. As amostras foram amplificadas e a eletroforese realizada em gel de poliacrilamida a 8 por cento. Os géis foram corados com soluçäo de brometo de etídio e analisados em transiluminador de luz ultravioleta. Um índice de 93,47 por cento de amplificaçäo foi atingido, com 41 embriöes (47,67 por cento) machos e 45 (52,32 por cento) embriöes fêmeas. O uso de gel de poliacrilamida a 8 por cento foi eficaz na separaçäo de fragmentos de DNA muito próximos

Aspectos clínico e cirúrgicos do tumor mamário canino / Canine mammary neoplasia: clinical and surgical evolution

As neoplasias mamárias em cadelas representam importante parcela das neoplasias em cäes, merecendo atençäodos pesquisadores quanto ao diagnóstico, tratamento e prognóstico. No presente trabalho, 23 cadelas de várias raças ou cruzamentos, com idades entre 8 e 11 anos portadoras de neolasia mamária foram estudadas. Doze eram multíparas, 6 primíparas e 5 nulíparas. Todas eram da regiäo de Jaboticabal, SP, atendidas no Hospital Veterinário da FCAVJ-UNESP. Os animais foram avaliados clínica e radiológicamente e submetidos à punçäo aspirativa da massa anormal de tecido, com agulha fina. Dessa mesma massa foi também retirado, cirurgicamente, um fragmento para exame histopatológico. A maior incidência foi de carcinoma (52,17 porcento), seguidos por tumores mistos (17,39 porcento). Os tratamentos cirúrgicos empregados nos 23 animais foram: mastectomia regional ou mastectomia em bloco, com remoçäo de linfonodos. Quinze cadelas foram tratadas com doxorubicina, na dose de 20mg/m² e ciclofosfamida, na dose de 100mg/m², aos 7, 9 e 11 dias após o ato cirúrgico. Todos os animais tiveram evoluçäo favorável e, 12 meses após a cirurgia, 18 deles foram reavaliados, näo constatando nenhuma recidiva ou surgimento de metástase.