Comparação de dois ésteres de estradiol como indutores da ovulação sobre o diâmetro folicular e a taxa de gestação de bovinos leiteiros submetidos a programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo

SUMMARY This study aimed to evaluate the effect of using two estradiol esters, on the diameter of the ovulatory follicle (DFOL), and pregnancy rates of dairy cows submitted to FTAI program. Therefore, 94 females crossbred Dutch-Gir were subjected to the following hormone protocol started on a random day D0, by insertion of an intravaginal device of progesterone (P4) associated to 2.0 mg of estradiol benzoate (EB) intramuscular (im). In D8, the devices were removed and 500 µg of sodium cloprostenol prostaglandin F2 was administered and 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) i.m. At this time the animals were divided in two groups: 50 cows were allocated to EC group and received 1 mg of estradiol cypionate i.m., while the other 44 received 1.0 mg of EB i.m. 24 hours after removal of the devices (D9), being called the BE Group. At D10, inseminations were carried out, and prior to each IA procedure were performed trans rectal ultrasonography to measure the DFOL. Pregnancy diagnosis was performed 55 days after the FTAI. There was no significant difference between measurement of DFOL found for the BE and CE groups being, respectively, 11.45 ± 2.34 and 10.71 ± 2,43mm. The BE group also showed a 34.10% pregnancy rate, similar to the EC group which was 40.00%. It is concluded that CE can replace the BE in TAI protocol in dairy cows, representing an alternative to simplify the FTAI protocol.

RESUMO Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da utilização de dois ésteres de estradiol, sobre o Diâmetro do Folículo Ovulatório (DFOL) e taxa de gestação de fêmeas bovinas leiteiras submetidas a um programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Para tanto, 94 fêmeas mestiças Holandês-Gir foram submetidas ao seguinte protocolo hormonal, iniciado em um dia aleatório, D0, por meio da inserção de um dispositivo intravaginal de progesterona (P4) associado à 2mg de Benzoato de Estradiol (BE) via intramuscular (i.m.). No D8, os dispositivos foram removidos e administrados 500 µg de Cloprostenol sódico prostaglandina F2 e 300 UI de Gonadotrofina Coriônica equina (eCG) i.m. Neste momento, os animais foram divididos em dois grupos experimentais: 50 vacas foram alocadas no grupo Cipionato de Estradiol (CE) e receberam 1mg dessa substância via i.m., enquanto outras 44 receberam 1mg de BE i.m., 24 horas após a retirada dos dispositivos (D9), sendo chamadas grupo BE. No D10, foram realizadas as inseminações e, previamente a cada procedimento de IA, foi executada a mensuração do DFOL por meio de ultrassonografia transretal. O diagnóstico de gestação foi realizado 55 dias após as IATFs. Não houve diferença significativa entre as médias de DFOL encontradas para os grupos BE e CE sendo, respectivamente, 11,45 ± 2,34 e 10,71 ± 2,43mm. O grupo BE também apresentou um índice de gestação de 34,10%, semelhante ao grupo CE que foi de 40,00%. Conclui-se que o CE pode substituir o BE em protocolo de IATF em vacas leiteiras, representando uma alternativa para simplificar o protocolo de IATF.

Comparação de dois ésteres de estradiol como indutores da ovulação sobre o diâmetro folicular e a taxa de gestação de bovinos leiteiros submetidos a programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo

SUMMARY This study aimed to evaluate the effect of using two estradiol esters, on the diameter of the ovulatory follicle (DFOL), and pregnancy rates of dairy cows submitted to FTAI program. Therefore, 94 females crossbred Dutch-Gir were subjected to the following hormone protocol started on a random day D0, by insertion of an intravaginal device of progesterone (P4) associated to 2.0 mg of estradiol benzoate (EB) intramuscular (im). In D8, the devices were removed and 500 µg of sodium cloprostenol prostaglandin F2 was administered and 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) i.m. At this time the animals were divided in two groups: 50 cows were allocated to EC group and received 1 mg of estradiol cypionate i.m., while the other 44 received 1.0 mg of EB i.m. 24 hours after removal of the devices (D9), being called the BE Group. At D10, inseminations were carried out, and prior to each IA procedure were performed trans rectal ultrasonography to measure the DFOL. Pregnancy diagnosis was performed 55 days after the FTAI. There was no significant difference between measurement of DFOL found for the BE and CE groups being, respectively, 11.45 ± 2.34 and 10.71 ± 2,43mm. The BE group also showed a 34.10% pregnancy rate, similar to the EC group which was 40.00%. It is concluded that CE can replace the BE in TAI protocol in dairy cows, representing an alternative to simplify the FTAI protocol.

RESUMO Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da utilização de dois ésteres de estradiol, sobre o Diâmetro do Folículo Ovulatório (DFOL) e taxa de gestação de fêmeas bovinas leiteiras submetidas a um programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Para tanto, 94 fêmeas mestiças Holandês-Gir foram submetidas ao seguinte protocolo hormonal, iniciado em um dia aleatório, D0, por meio da inserção de um dispositivo intravaginal de progesterona (P4) associado à 2mg de Benzoato de Estradiol (BE) via intramuscular (i.m.). No D8, os dispositivos foram removidos e administrados 500 µg de Cloprostenol sódico prostaglandina F2 e 300 UI de Gonadotrofina Coriônica equina (eCG) i.m. Neste momento, os animais foram divididos em dois grupos experimentais: 50 vacas foram alocadas no grupo Cipionato de Estradiol (CE) e receberam 1mg dessa substância via i.m., enquanto outras 44 receberam 1mg de BE i.m., 24 horas após a retirada dos dispositivos (D9), sendo chamadas grupo BE. No D10, foram realizadas as inseminações e, previamente a cada procedimento de IA, foi executada a mensuração do DFOL por meio de ultrassonografia transretal. O diagnóstico de gestação foi realizado 55 dias após as IATFs. Não houve diferença significativa entre as médias de DFOL encontradas para os grupos BE e CE sendo, respectivamente, 11,45 ± 2,34 e 10,71 ± 2,43mm. O grupo BE também apresentou um índice de gestação de 34,10%, semelhante ao grupo CE que foi de 40,00%. Conclui-se que o CE pode substituir o BE em protocolo de IATF em vacas leiteiras, representando uma alternativa para simplificar o protocolo de IATF.

Taxa de gestação de receptoras de embriões bovinos tratadas com um análogo do GnRH no momento da inovulação

The aim of the study was to evaluate the pregnancy rate of bovine embryo recipients categorized according to quality of the corpus luteum (CL), treated or not with a GnRH analogue (Fertirelina) at the time of embryo transfer. Only viable embryos were selected for embryo transfer (1 - excellent, 2 - good, 3 - fair) and transferred. Therefore, 272 heifers were divided into six groups: CL1-S/GnRH (recipients with CL area 1,5cm² and not treated with GnRH, n = 26); CL1-C/GnRH (recipients with CL area 1,5cm² and treated with GnRH, n = 29); CL2-S/GnRH (recipients with CL area between 1,5 and 2,0cm² and not treated with GnRH, n = 46); CL2-C/GnRH (recipients with CL area between 1,5 and 2,0cm² and treated with GnRH, n = 45); CL3-S/GnRH (recipients witch CL area > 2cm² and not treated with GnRH, n = 63); and CL3-C/GnRH (recipients witch CL area > 2cm² and treated with GnRH, n = 63). Pregnancy rates of embryo recipients in relation to CL quality and the application or otherwise of GnRH were 43.31% and 41.38, 56.52 and 46.67%, 46.03 and 42.86% for CL1-S/GnRH and CL1-C/GnRH, CL2-S/GnRH and CL2-C/GnRH and CL3-S/GnRH and CL3-C/GnRH, respectively. Therefore, administration of GnRH analogue (Fertirelina) did not increase the pregnancy rate in bovine embryo recipients, independent of the quality of CL, demonstrating that this strategy is not effective in increasing fertility rates.

O objetivo com este estudo foi avaliar a taxa de gestação de receptoras de embriões bovinos categorizadas de acordo com a qualidade do corpo lúteo (CL) e tratadas ou não com um análogo de GnRH (Fertirelina) no momento da inovulação. Somente os embriões viáveis foram selecionados para inovulação (1- excelente, 2- bom e 3- regular) e transferidos. Para tanto, 272 novilhas foram distribuídas em seis grupos: CL1-S/GnRH (receptoras com área do CL 1,5cm² e não tratadas com GnRH, n =26); CL1-C/GnRH (receptoras com área do CL 1,5cm² e tratadas com GnRH, n=29); CL2-S/GnRH (receptoras com área do CL entre 1,5 e 2,0cm² e não tratadas com GnRH, n =46); CL2-C/GnRH (receptoras com área do CL entre 1,5 e 2,0cm² e tratadas com GnRH, n=45); CL3-S/GnRH (receptoras com área do CL > 2,0cm² e não tratadas com GnRH, n=63); e CL3-C/GnRH (receptoras com área do CL > 2cm² e tratadas com GnRH, n=63). As taxas de gestação das receptoras de embrião em relação à qualidade do CL e a aplicação ou não do GnRH foram respectivamente, 43,31 e 41,38%, 56,52 e 46,67%, e 46,03 e 42,86% para CL1-S/GnRH e CL1-C/GnRH, CL2-S/GnRH e CL2-C/GnRH, e CL3-S/GnRH e CL3-C/GnRH. Não houve diferença (P>0,05) entre as variáveis avaliadas. Portanto, a administração do análogo de GnRH (Fertirelina) não elevou a taxa de gestação em receptoras de embriões bovinos, independente da qualidade do CL, demonstrando que esta estratégia não foi eficaz em incrementar os índices de fertilidade.

SUPLEMENTAÇÃO DO MEIO DE REFRIGERAÇÃO ESPERMÁTICA COM VITAMINA C E CATALASE EM SÊMEN OBTIDO DE CÃES JOVENS E IDOSOS

O uso de sêmen refrigerado é uma boa opção na rotina clínica de inseminação, sendo um método prático e barato que permite melhor preservação da fertilidade quando comparado ao sêmen congelado. Contudo, o período de sobrevivência dos espermatozoides é curto. A adição de moléculas antioxidantes ao meio de diluição pode reduzir o estresse oxidativo durante o armazenamento e assim melhorar sua qualidade. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da adição da catalase e vitamina C ao diluente sobre a qualidade do sêmen canino refrigerado. Para isso foram utilizados cinco cães com idade variando de 2 a 5 anos, e cinco com mais de sete anos. O sêmen foi colhido e dividido em três amostras para a refrigeração nos meios controle (sem adição de antioxidante), com adição de vitamina C e com adição de catalase. Antes e após a refrigeração as amostras foram analisadas através do sistema computadorizado CASA, da análise da morfologia espermática e da integridade das membranas plasmática e acrossomal. No presente trabalho a única variável que se beneficiou da ação dos antioxidantes foi à integridade do acrossomo nas amostras de sêmen resfriado obtidas de animais idosos. Além disso, neste mesmo grupo a concentração de catalase utilizada parece ter tido um efeito deletério sobre parâmetros da motilidade espermática. Estes resultados reforçam a evidencia de variações individuais na resposta

Suplementação do meio de refrigeração espermática com vitamina c e catalase em sêmen obtido de cães jovens e idosos

O uso de sêmen refrigerado é uma boa opção na rotina clínica de inseminação, sendo um método prático e barato que permite melhor preservação da fertilidade quando comparado ao sêmen congelado. Contudo, o período de sobrevivência dos espermatozoides é curto. A adição de moléculas antioxidantes ao meio de diluição pode reduzir o estresse oxidativo durante o armazenamento e assim melhorar sua qualidade. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da adição da catalase e vitamina C ao diluente sobre a qualidade do sêmen canino refrigerado. Para isso foram utilizados cinco cães com idade variando de 2 a 5 anos, e cinco com mais de sete anos. O sêmen foi colhido e dividido em três amostras para a refrigeração nos meios controle (sem adição de antioxidante), com adição de vitamina C e com adição de catalase. Antes e após a refrigeração as amostras foram analisadas através do sistema computadorizado CASA, da análise da morfologia espermática e da integridade das membranas plasmática e acrossomal. No presente trabalho a única variável que se beneficiou da ação dos antioxidantes foi à integridade do acrossomo nas amostras de sêmen resfriado obtidas de animais idosos. Além disso, neste mesmo grupo a concentração de catalase utilizada parece ter tido um efeito deletério sobre parâmetros da motilidade espermática. Estes resultados reforçam a evidencia de variações individuais na resposta

Pregnancy rate of cattle embryo recipient with different degrees of difficulty on embryo transfer proceeding / Taxa de gestação de receptoras de embriões bovinos com diferentes graus de dificuldades no procedimento de inovulação

To evaluate the influence of the difficulty of cervix transposition, uterine tonus and place of embryo trnasfer on pregnancy rate of cattle embryos recipient, the superovulation and synchronization of donor and recipients were carried out. The difficulty of cervix transposition influenced the pregnancy rate. The pregnancy rate was 50.50% (420/830) for group CERV-E (cervix of easy transposition) and 43.02% (114/265) for group CERV-D (with some degree of difficulty of transposition). The uterine tonus did not affect the pregnancy rate. The groups TON-R (relaxed uterus), TON-M (medium relaxed uterus) and TON-C (contracted uterus) achieved rates of 50.08% (313/625), 45.69% (106/232) and 47.11% (106/225), respectively. Data also showed that the embryo transfer place affected the recipient pregnancy rate. Group DEP-F (embryo transfer at the final third) achieved pregnancy rate of 51.39% (314/611), higher than group DEP-I (at the initial third), which was 39.46% (58/147), while group DEP-M (at the middle third) achieved pregnancy rate of 48.22% (163/338), similar to DEP-I and DEP-F groups. The results suggest that, in embryo transfer programs, the technician should take into special account the difficulty of cervix transposition and the embryo transfer place.KEYWORDS: Bos indicus; embryo transfer; pregnancy rate.

Com o objetivo de avaliar a influência da dificuldade de transposição da cérvix, do tônus uterino e do local de inovulação sobre a taxa de gestação de receptoras de embriões bovinos, realizou-se superovulação e sincronização de doadoras e receptoras. A dificuldade de transposição cervical influenciou a taxa de gestação, o grupo CERV-F (cérvix de fácil transposição) obteve taxa de gestação de 50,60% (420/830), já CERV-D (com algum grau de dificuldade de transposição) obteve taxa de 43,02% (114/265). O tônus uterino não afetou a taxa de gestação, os grupos TON-R (útero relaxado), TON-M (medianamente relaxado) e TON-C (contraído) tiveram taxas de 50,08% (313/625), 45,69% (106/232) e 47,11% (106/225), respectivamente. Foi demonstrado efeito do local de inovulação sobre a taxa de gestação, o grupo DEP-F (inovulação no terço final) obtiveram taxa de gestação de 51,39% (314/611), superior à taxa de gestação do grupo DEP-I (no terço inicial) que foi de 39,46% (58/147), já os animais do grupo DEP-M (no terço médio) lograram taxa de gestação de 48,22% (163/338), não diferindo dos grupos DEP-I e DEP-F. Os resultados sugerem que em programas de transferência de embriões o técnico deverá levar em consideração especialmente a dificuldade de transposição cervical e o local de inovulação.PALAVRAS-CHAVE: Bos indicus; taxa de prenhez; transferência de embrião.

PREGNANCY RATE OF CATTLE EMBRYO RECIPIENT WITH DIFFERENT DEGREES OF DIFFICULTY ON EMBRYO TRANSFER PROCEEDING / TAXA DE GESTAÇÃO DE RECEPTORAS DE EMBRIÕES BOVINOS COM DIFERENTES GRAUS DE DIFICULDADES NO PROCEDIMENTO DE INOVULAÇÃO

To evaluate the influence of the difficulty of cervix transposition, uterine tonus and place of embryo trnasfer on pregnancy rate of cattle embryos recipient, the superovulation and synchronization of donor and recipients were carried out. The difficulty of cervix transposition influenced the pregnancy rate. The pregnancy rate was 50.50% (420/830) for group CERV-E (cervix of easy transposition) and 43.02% (114/265) for group CERV-D (with some degree of difficulty of transposition). The uterine tonus did not affect the pregnancy rate. The groups TON-R (relaxed uterus), TON-M (medium relaxed uterus) and TON-C (contracted uterus) achieved rates of 50.08% (313/625), 45.69% (106/232) and 47.11% (106/225), respectively. Data also showed that the embryo transfer place affected the recipient pregnancy rate. Group DEP-F (embryo transfer at the final third) achieved pregnancy rate of 51.39% (314/611), higher than group DEP-I (at the initial third), which was 39.46% (58/147), while group DEP-M (at the middle third) achieved pregnancy rate of 48.22% (163/338), similar to DEP-I and DEP-F groups. The results suggest that, in embryo transfer programs, the technician should take into special account the difficulty of cervix transposition and the embryo transfer place.KEYWORDS: Bos indicus; embryo transfer; pregnancy rate.

Com o objetivo de avaliar a influência da dificuldade de transposição da cérvix, do tônus uterino e do local de inovulação sobre a taxa de gestação de receptoras de embriões bovinos, realizou-se superovulação e sincronização de doadoras e receptoras. A dificuldade de transposição cervical influenciou a taxa de gestação, o grupo CERV-F (cérvix de fácil transposição) obteve taxa de gestação de 50,60% (420/830), já CERV-D (com algum grau de dificuldade de transposição) obteve taxa de 43,02% (114/265). O tônus uterino não afetou a taxa de gestação, os grupos TON-R (útero relaxado), TON-M (medianamente relaxado) e TON-C (contraído) tiveram taxas de 50,08% (313/625), 45,69% (106/232) e 47,11% (106/225), respectivamente. Foi demonstrado efeito do local de inovulação sobre a taxa de gestação, o grupo DEP-F (inovulação no terço final) obtiveram taxa de gestação de 51,39% (314/611), superior à taxa de gestação do grupo DEP-I (no terço inicial) que foi de 39,46% (58/147), já os animais do grupo DEP-M (no terço médio) lograram taxa de gestação de 48,22% (163/338), não diferindo dos grupos DEP-I e DEP-F. Os resultados sugerem que em programas de transferência de embriões o técnico deverá levar em consideração especialmente a dificuldade de transposição cervical e o local de inovulação.PALAVRAS-CHAVE: Bos indicus; taxa de prenhez; transferência de embrião.

O efeito do tempo de equilíbrio sobre a qualidade do sêmen caprino criopreservado

Sete amostras de sêmen de um caprino adulto, colhidas com a utilização de vagina artificial, foram submetidas a criopreservação, com o objetivo de verificar a influência do tempo de equilíbrio sobre a congelabilidade do sêmen caprino. O tempo de equilíbrio foi considerado o tempo total em que os espermatozóides forma mantidos em contato com o glicerol e com os demais componentes do diluidor, previamente a congelação. Logo depois da colheita e avaliação, o sêmen foi diluído e envasado em palhetas de 0,25mL, com dose inseminante de 100 x 106 espermatozóides. Essas foram encaminhadas para o resfriamento, com uma curva média de resfriamento de -1,07oC/min, até atingirem a temperatura de 5oC (30min de período de resfriamento). Depois desse período as amostras foram mantidas a temperatura de 5oC até completarem 1, 2, 3 e 4h de tempo de equilíbrio total, repectivamente G1, G2, G3 e G4. Posteriormente, congeladas em vapor de nitrogênio líquido. A descongelação foi realizada em banho-maria a 37oC por 30s. Através dos parâmetros espermáticos estudados, o tempo de equilíbrio de 2h (G2) foi o protocolo que obteve os melhores índices de viabilidade espermática após o processo de congelação-descongelação, quando comparado com os demais grupos avaliados.

AVALIAÇÃO IN VITRO DO SÊMEN CAPRINO RESFRIADO, COM OU SEM CENTRIFUGAÇÃO DO PLASMA SEMINAL E DILUÍDO EM LEITE DESNATADO-GLICOSE E TRIS-GEMA DE OVO

O objetivo deste trabalho foi comparar in vitro quatro tratamentos para o resfriamento de sêmen caprino, a partir de 32 ejaculados de quatro bodes, submetidos aos diluidores tris-gema de ovo e leite desnatado-glicose, e processados com ou sem centrifugação do plasma seminal. O sêmen foi resfriado e conservado a 4º C durante 48 horas.Os resultados foram expressos em média e desvio padrão e submetidos a ANOVA (P0,05). Conclui-se que o diluidor tris-gema de ovo preservou melhor(p0,05) as características seminais avaliadas, exceto em relação à patologia de cauda. PALAVRAS-CHAVE: Caprino, centrifugação, diluidor, resfriamento, sêmen.

O efeito do tempo de equilíbrio sobre a qualidade do sêmen caprino criopreservado

Sete amostras de sêmen de um caprino adulto, colhidas com a utilização de vagina artificial, foram submetidas a criopreservação, com o objetivo de verificar a influência do tempo de equilíbrio sobre a congelabilidade do sêmen caprino. O tempo de equilíbrio foi considerado o tempo total em que os espermatozóides forma mantidos em contato com o glicerol e com os demais componentes do diluidor, previamente a congelação. Logo depois da colheita e avaliação, o sêmen foi diluído e envasado em palhetas de 0,25mL, com dose inseminante de 100 x 106 espermatozóides. Essas foram encaminhadas para o resfriamento, com uma curva média de resfriamento de -1,07oC/min, até atingirem a temperatura de 5oC (30min de período de resfriamento). Depois desse período as amostras foram mantidas a temperatura de 5oC até completarem 1, 2, 3 e 4h de tempo de equilíbrio total, repectivamente G1, G2, G3 e G4. Posteriormente, congeladas em vapor de nitrogênio líquido. A descongelação foi realizada em banho-maria a 37oC por 30s. Através dos parâmetros espermáticos estudados, o tempo de equilíbrio de 2h (G2) foi o protocolo que obteve os melhores índices de viabilidade espermática após o processo de congelação-descongelação, quando comparado com os demais grupos avaliados.

Avaliação in vitro do sêmen caprino resfriado, com ou sem centrifugação do plasma seminal e diluído em leite desnatado-glicose e tris-gema de ovo

O objetivo deste trabalho foi comparar in vitro quatro tratamentos para o resfriamento de sêmen caprino, a partir de 32 ejaculados de quatro bodes, submetidos aos diluidores tris-gema de ovo e leite desnatado-glicose, e processados com ou sem centrifugação do plasma seminal. O sêmen foi resfriado e conservado a 4º C durante 48 horas.Os resultados foram expressos em média e desvio padrão e submetidos a ANOVA (P0,05). Conclui-se que o diluidor tris-gema de ovo preservou melhor(p0,05) as características seminais avaliadas, exceto em relação à patologia de cauda. PALAVRAS-CHAVE: Caprino, centrifugação, diluidor, resfriamento, sêmen.

UTILIZAÇÃO DO TESTE HIPOSMÓTICO PARA AVALIAR A EFICÁCIA DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE CRIOPRESERVAÇÃO DO SÊMEN CAPRINO

Este estudo teve por objetivo comparar a eficácia de quatro protocolos de congelação do sêmen caprino (glicerol, glicerol+EDTA; etilenoglicol; etilenoglicol+EDTA), através da utilização do teste hiposmótico (HOST). O sêmen foi colhido de dois machos da raça Alpina, sexualmente maduros, diluído nos diferentes meios, congelado e armazenado em nitrogênio líquido. Após a colheita, 20ìL do sêmen fresco foram incubados com 01mL de solução hiposmótica (combinação de citrato de sódio e frutose em água destilada com osmolaridade de 125mOsmol), em banho-maria a 370C por 30 minutos. Este procedimento foi repetido após a descongelação e, em seguida, uma amostra foi colocada sobre lâmina/lamínula e avaliada em contraste de fase com mil vezes de aumento. Um total de 100 células foi contado, e as médias percentuais de espermatozóides com edema ou dobramento de cauda, após o HOST, foram para o sêmen fresco, glicerol, glicerol+EDTA; etilenoglicol; etilenoglicol+EDTA , respectivamente, 53,89; 16,90; 10,25; 52,64 e 57,54. PALAVRAS-CHAVE: Caprinos, criopreservação, sêmen, teste hiposmótico

EFEITO DA SOLUÇÃO, DA FIXAÇÃO EM FORMOL-SALINA E DO TEMPO DE INCUBAÇÃO SOBRE OS RESULTADOS DO TESTE HIPOSMÓTICO PARA SÊMEN EQÜINO CONGELADO

Este experimento objetivou determinar o melhor protocolo de teste hiposmótico (HO) para avaliar a integridade funcional da membrana plasmática dos espermatozóides eqüinos submetidos à criopreservação. Foram avaliadas três soluções HO (água destilada, frutose 100 mOsmol/L e citrato de sódio 100 mOsmol/L), os tempos de incubação de 0, 15 e 30 minutos dependendo do tipo de solução utilizada e o processo de fixação ou não em formol-salina. Após a descongelação do sêmen foram retiradas alíquotas de sêmen para incubação nas três soluções HO. Decorridos os tempos de incubação (0, 15 e 30 minutos), retirou-se uma alíquota de sêmen para leitura do percentual de espermatozóides reativos ao teste HO e fixou-se, em formolsalina, o restante da mistura sêmen/solução HO para posterior leitura e comparação entre as leituras fixadas versus não fixadas. Não houve diferença (P>0,05) entre os tempos de incubação independente da solução HO utilizada. A água destilada apresentou maior percentagem de espermatozóides reativos ao teste no protocolo que não usou a fixação em formol, entretanto apresentou resultado semelhante às amostras incubadas em frutose e citrato de sódio, no protocolo que utilizou a fixação em formol. Não houve diferença (P>0,05) na comparação, por solução, da leitura fixada versus não fixada. PALAVRAS-CHAVE: Eqüino, sêmen congelado, teste hiposmótico

Efeito da solução, da fixação em formol-salina e do tempo de incubação sobre os resultados do teste hiposmótico para sêmen eqüino congelado

Este experimento objetivou determinar o melhor protocolo de teste hiposmótico (HO) para avaliar a integridade funcional da membrana plasmática dos espermatozóides eqüinos submetidos à criopreservação. Foram avaliadas três soluções HO (água destilada, frutose 100 mOsmol/L e citrato de sódio 100 mOsmol/L), os tempos de incubação de 0, 15 e 30 minutos dependendo do tipo de solução utilizada e o processo de fixação ou não em formol-salina. Após a descongelação do sêmen foram retiradas alíquotas de sêmen para incubação nas três soluções HO. Decorridos os tempos de incubação (0, 15 e 30 minutos), retirou-se uma alíquota de sêmen para leitura do percentual de espermatozóides reativos ao teste HO e fixou-se, em formolsalina, o restante da mistura sêmen/solução HO para posterior leitura e comparação entre as leituras fixadas versus não fixadas. Não houve diferença (P>0,05) entre os tempos de incubação independente da solução HO utilizada. A água destilada apresentou maior percentagem de espermatozóides reativos ao teste no protocolo que não usou a fixação em formol, entretanto apresentou resultado semelhante às amostras incubadas em frutose e citrato de sódio, no protocolo que utilizou a fixação em formol. Não houve diferença (P>0,05) na comparação, por solução, da leitura fixada versus não fixada. PALAVRAS-CHAVE: Eqüino, sêmen congelado, teste hiposmótico

Utilização do teste hiposmótico para avaliar a eficácia de diferentes protocolos de criopreservação do sêmen caprino

Este estudo teve por objetivo comparar a eficácia de quatro protocolos de congelação do sêmen caprino (glicerol, glicerol+EDTA; etilenoglicol; etilenoglicol+EDTA), através da utilização do teste hiposmótico (HOST). O sêmen foi colhido de dois machos da raça Alpina, sexualmente maduros, diluído nos diferentes meios, congelado e armazenado em nitrogênio líquido. Após a colheita, 20ìL do sêmen fresco foram incubados com 01mL de solução hiposmótica (combinação de citrato de sódio e frutose em água destilada com osmolaridade de 125mOsmol), em banho-maria a 370C por 30 minutos. Este procedimento foi repetido após a descongelação e, em seguida, uma amostra foi colocada sobre lâmina/lamínula e avaliada em contraste de fase com mil vezes de aumento. Um total de 100 células foi contado, e as médias percentuais de espermatozóides com edema ou dobramento de cauda, após o HOST, foram para o sêmen fresco, glicerol, glicerol+EDTA; etilenoglicol; etilenoglicol+EDTA , respectivamente, 53,89; 16,90; 10,25; 52,64 e 57,54. PALAVRAS-CHAVE: Caprinos, criopreservação, sêmen, teste hiposmótico

UTILIZAÇÃO DE GLICEROL E ETILENOGLICOL COMO CRIOPROTETORES NA CONGELAÇÃO DO SÊMEN CAPRINO

Dez amostras de sêmen de dois reprodutores caprinos, da raça Parda-alpina, colhidas em vagina artificial, foram submetidas a quatro tratamentos para avaliação da eficiência do etilenoglicol e do glicerol, associados ou não ao EDTA, na criopreservação da célula espermática caprina. O diluente usado era à base de Tris-gema de ovo contendo 7% de glicerol (glicerol E glicerol+EDTA) ou 7% de etilenoglicol (etilenoglicol e etilenoglicol + EDTA), sendo que nos grupos glicerol+EDTA e etilenoglicol+EDTA foi associado ao diluente 0,1% de EDTA. As amostras foram mantidas por 60 minutos em geladeira a 40C, onde então era efetuada a congelação em nitrogênio (-1960C). A descongelação foi realizada em banho-maria a 370C por 30segundos. As médias obtidas para motilidade (%) a descongelação, para os grupos glicerol, glicerol+EDTA, etilenoglicol, etilenoglicol+EDTA, foram, respectivamente, 51%; 61%; 10% e 12%. Os grupos que utilizaram o glicerol como crioprotetor obtiveram melhores taxas de motilidade pós-descongelação, principalmente quando foi associado ao diluidor o EDTA (grupo glicerol+EDTA). Porém, esse resultado foi comprometido pelos maiores índices de alterações patológicas nos grupos que continham o glicerol. PALAVRAS-CHAVE: Caprinos, criopreservação, sêmen, glicerol, etilenoglicol, EDTA

Utilização de glicerol e etilenoglicol como crioprotetores na congelação do sêmen caprino

Dez amostras de sêmen de dois reprodutores caprinos, da raça Parda-alpina, colhidas em vagina artificial, foram submetidas a quatro tratamentos para avaliação da eficiência do etilenoglicol e do glicerol, associados ou não ao EDTA, na criopreservação da célula espermática caprina. O diluente usado era à base de Tris-gema de ovo contendo 7% de glicerol (glicerol E glicerol+EDTA) ou 7% de etilenoglicol (etilenoglicol e etilenoglicol + EDTA), sendo que nos grupos glicerol+EDTA e etilenoglicol+EDTA foi associado ao diluente 0,1% de EDTA. As amostras foram mantidas por 60 minutos em geladeira a 40C, onde então era efetuada a congelação em nitrogênio (-1960C). A descongelação foi realizada em banho-maria a 370C por 30segundos. As médias obtidas para motilidade (%) a descongelação, para os grupos glicerol, glicerol+EDTA, etilenoglicol, etilenoglicol+EDTA, foram, respectivamente, 51%; 61%; 10% e 12%. Os grupos que utilizaram o glicerol como crioprotetor obtiveram melhores taxas de motilidade pós-descongelação, principalmente quando foi associado ao diluidor o EDTA (grupo glicerol+EDTA). Porém, esse resultado foi comprometido pelos maiores índices de alterações patológicas nos grupos que continham o glicerol. PALAVRAS-CHAVE: Caprinos, criopreservação, sêmen, glicerol, etilenoglicol, EDTA